Консервуючий розчин “б- 2″ для трансплантантів

Изобретение относится к медицине, в частности, к средствам используемым для консервации и защиты трансплантантов и может быть использовано в клинике и научных исследованиях. Актуальным вопросом современной трансплантологии является сохранение донорского органа на всех этапах его получения (изъятие, консервация, транспортировка, трансплантация). Изолированный орган, лишенный естественной среды обитания, становится объектом повреждающего воздействия таких сопутствующи х факторов трансплантологии, как ишемия и активация свободнорадикального окисления (СРО). Известен раствор для защиты трансплантанта, представляющий собой смесь цитропротектора, мукополисахарида высокомолекулярных спиртов, поверхностно-активного вещества в среде ионов и дистиллированную воду [Заявка на патент РФ №93039012/14, кл. А 01 N 1/02, с. 5]. Такой раствор усиливает тромборезистентные и каналообразующие свойства в среде динамических межклеточных контактов и поверхности трансплантанта, но не предотвращает активацию свободнорадикальных процессов и развитие энергодефицита в клетке. Известен по заявке на патент РФ №93006565/14, кл. А 01N 1/00, опублик. 1995, препарат для консервации биологических - тканей, сохраняющий ткани для пересадки, в котором для усиления термопротекторных свойств и увеличения продолжительности их сохранения в постимплантационном периоде используется в композиции: хлорид натрия, щелочь, мукополисахарид, непроникающий цитопротектор, проникающий цитопротектор. Недостатком такого препарата является: снижение мембранного потенциала за счет образующейся гипокалиемии и энергодефицита, что ограничивает применение добавляемых в раствор цитопротекторов. Известна по патенту РФ №2019965, кл. А 01 N 1/02, опублик. 1994, композиция для консервации и хранения органа, предназначенного для имплантации пациенту, содержащая, г/л: Недостатком такой композиции является образующийся при гипотермических условиях консервации осадок нерастворимых солей фосфорнокислого магния, вызывающий эмболизацию сосудов и нарушение адекватного кровотока в консервированных органах в посттрансплантационном периоде. Известен по патенту РФ №2025973, кл. А 01 N 1 /03, опублик. 1995, раствор для консервации живых органов, содержащий, г/л: Недостатком такого раствора является: отсутствие в растворе важнейших субстратов углеводноэнергетического обмена и антиоксидантов, не выполняется энергетический, антиоксидантный и пластический дефицит в клетке. Известен раствор Рингера Локка, содержащий, г/л:. Недостатком такого раствора является то, что при его использовании уже через 6 часов наблюдаются деструктивные изменения консервируемого трансплантанта. Наиболее близким к предлагаемому способу является бесперфузионное применение раствора Коллинза для консервации почек, который под названием базис-раствора используется в центрах по заготовке и трансплантации почек в Европе и США [G.M.Collins, R.D.Green, N.A.Halasz. Importance pf anion content and osmolarity In flush solution for 48 to 72 hr hyrothermic kidney storage // Cryoblology. - 1972. - Vol.16. - №3 - Р.217220]. Состав раствора Коллинза: (весовой на 1000,0 мл) Данный раствор принимаем за прототип. Однако применение данного раствора для консервации почек имеет ряд недостатков: 1. Отсутствие в его составе субстратов, метаболитов и других регуляторов, включающи хся в метаболизм и поддерживающих энергопродукцию в клетках. 2. Отсутствие в его составе мембрано-стабилизаторов, именно антиоксидантов инициального типа действия, которые не только ингибируют свободные формы кислорода, но и предотвращают пути их образования, тем самым сохраняя структуру клеточных мембран. 3. Невозможность применения р-ра Коллинза в гипотермических условиях (0-2°С), за счет выпадения в осадок приданном режиме солей фосфорнокислого магния. Задача изобретения: повышение эффективности фармакологической защиты трансплантанта путем применения консервирующего раствора, содержащего в своем составе антиоксидант "тиотриазолин". Для обеспечения задачи, согласно изобретению предлагается использовать для консервации почек раствор следующе го состава, г/л ±5%: Результаты исследования патентной и медицинской информации подтверждают новизну предлагаемого состава раствора: Следовательно по новизне предлагаемый раствор соответствует критерию изобретения. Сопоставление результатов апробации известных и заявляемого растворов подтвердили и преимущество последнего. Следовательно, и по эффективности заявляемый раствор соответствует критерию изобретения. Выше приведено оптимальное количество в граммах каждого компонента на 1000,0 мл в пределах допуска отклонений, не влияющих на его свойства. Тиотриазолин, как синтетический гепатопротекторный, кардиопротекторный препарат, обладающий противоишемической, мембраностабилизирующей, антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью, зарегистрирован 31.05.94 г. Минздравом Украины, приказ №85, регистрационный №94/85/1. Сущность изобретения поясняется ниже приведенным описанием консервирующего раствора, содержащего антиоксидант "Тиотриазолин". Фармакологический эффект раствора обусловлен сбалансированным катионно-анионным составом, снижающим энергозатраты органа на внешнюю работу (специфическая работа, на которую затрачивается около 60-70% всей клеточной энергии) и на поддержание трансмембранных ионных градиентов, а также содержанием в его составе субстратов, включающи хся в метаболизм и поддерживающих энергопродукцию в клетках. За щитный эффект раствора обеспечивается особенностью препарата "Тиотриазолин", его способностью усиливать компенсаторную активацию анаэробного гликолиза, снижать степень угнетения окислительных процессов в цикле Кребса с сохранением внутриклеточного фонда АТФ, активизировать антиоксидантную систему ферментов и снижать процессы перекисного окисления липидов. Препарат улучшает реологические свойства крови за счет активации фибринолитической системы. Раствор апробирован на кафедре детской хирургии ЗГМУ в клинике с положительным результатом. Проведены три сери исследований по консервации трупной детской почки тремя различными консервирующими растворами: раствором Рингера-Локка, раствором Коллинза, предлагаемым раствором (рр "Б-2"). Условия консервации были унифицированы и состояли в заборе обеих тр упных почек у детей, умерших не от почечной патологии, через 2-4 часа после смерти. Возраст доноров был 1-2 месяца, забор производили в условия х секционной в режиме исключения внешнего бактериального обсеменения, с удалением участка брюшной аорты и нижней полой вены с целью сохранения почечных сосудов. После этого производили канюлизацию почечных артерий и вен и промывали консервирующим раствором с температурой плюс 5°С с помощью роликового насоса НПР-301" при температуре окружающего воздуха плюс 18°С со скоростью 5 мл/мин. После этого погружали почки в 1 л того же раствора. Экспозиция составляла от 6 до 48 часов при t - 4 °С. Исследования проведены на 7 консервациях для каждого раствора. Применение раствора "Б-2" дли консервации приводило к торможению активности свободнорадикального окисления на все сроки наблюдения, а к 48 часам экспозиции отмечалось снижение уровня диеновых конъюгатов на 61-70%, малонового диальдегида на 60%, параллельно отмечалось повышение уровня АТФ на 27-30%, АДФ - 20-25% и снижение АМФ на 30-36% в тканях почек по сравнению к серии с раствором Коллинза на те же сроки наблюдения, что отражено в табл. 1. В табл. 2 приведена динамика гистоморфологических изменений почечной ткани. В описании и таблицах приведены результаты апробирования предлагаемого раствора при консервации донорских почек, что не исключает эффективность его использования для консервации других трансплантантов.