Спосіб діагностики невиношування вагітності на тлі формування плацентарної недостатності

Корисна модель відноситься до медицини, а саме до акушерства і гінекології і може бути використана для ранньої діагностики загрози невиношування вагітності на тлі формування плацентарної недостатності. Відомим є спосіб діагностики невиношування вагітності, який здійснюють шляхом визначення сенсибілізації лімфоцитів матері до ембріонального антигену (ЕАГ) і наявністю блокуючих антитіл в сироватці крові жінок (БАТ) [Говалло В.И., Сидельникова В.М. Иммунизация беременных женщин аллогенными лимфоцитами мужа как метод профилактики самопроизвольных выкидышей//Акушерство и гинекология.-1983.-№12.-С. 25-27], обраний нами за найближчий аналог. Спосіб має недоліки, які пов'язані з тим, що спосіб визначає блокуючий антиген тільки в 50-60% вагітних жінок. Антиген, який використовують при дослідженні, виготовляється лабораторним шляхом, містить велику кількість неідентифікованих антигенних детермінант, які знижують специфічність способу. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу діагностики невиношування вагітності на тлі формування плацентарної недостатності, в якому за рахунок зміни досліджуваних показників, досягається визначення депресії аеробного обміну у вигляді порушення клітинного і тканинного обміну речовин, за рахунок чого підвищується точність діагностики. Поставлена задача вирушується в способі діагностики невиношування вагітності на тлі формування плацентарної недостатності шляхом дослідженя лімфоцитів крові, згідно з корисною моделлю, визначають активність сукцинатдегідрогенази (СДГ), і a -гліцерофосфатдегідрогеназа ( a -ГФДГ) і при активності СДГ вмісту 14г/л і нижче, а a -ГФДГ вмісту 8г/л і нижче діагностують плацентиарну недостатність. СДГ локалізується в мітохондріях і відбиває окисно-відновні процеси в клітині. У силу виняткової важливості СДГ в енергетичному обміні цей фермент називають "маркером" мітохондрій. З активністю цього ферменту зв'язані багато сторін метаболізму в цитоплазмі кліток, тому що СДГ, будучи ключовим ферментом циклу Кребса, бере участь у кінцевих фазах згорання вуглеводів, білків і жирів. Зниження активності СДГ свідчить про падіння енергетичних процесів у мітохондріях. Крім СДГ у виробленні енергії велику роль грає a -ГФДГ. Ізольований у мітохондрії енергетичний цикл Кребса протікає нормально в тому випадку, якщо в інтактну для великих молекул мітохондрію будуть "доставлені" електрони (пари атомів водню) із гіалоплазми, де вони вивільняються в результаті гліколізу й інших хімічних перетворень. Роль переносника електронів виконує фермент a -ГФДГ. Бесперебійна робота a гліцерофосфатного шунта в сук упності з циклом трикарбонових кислот забезпечує швидке утворення енергії в клітці. Цитохімічні визначення a - ГФДГ дозволяють характеризувати обмін фосфоліпідів, а відповідно стан клітинних мембран, а так само транспорт електронів з цитозоля в мітохондрії. Значення показників отримані на великій кількості пацієнток і показують наявність глибоких порушень біоенергетики гіпоксичного характеру у вагітни х з невиношуванням вагітності, що характеризує функціональний стан лімфоцитів-клітин з аеробним типом обміну. Спосіб, що заявляється, виконують таким чином. Цитохімічним методом досліджують в лейкоцитах периферичної крові активність окислювально-відновних ферментів: сукцинатдегідрогенази (СДГ), і a - ГФДГ. Активність СДГ і a - ГФДГ визначають кількісним цитохімічним методом [Нарциссов Р.П. Применение паранитрозолия фиолетового для количественного цитохимического определения дегидрогеназ человека. //Архив анат. -1969. -№5. - С. 85-91]. Для цитохімічного дослідження беруть мазки крові з пальця. Тонкі, висушені на повітрі мазки фіксували в перебіг 30 секунд при температурі 18-22°С 60% ацетоном, насиченим трилоном Б (дінатрієва сіль етілендіамінтетраоцтова кислота) з розрахунку 2,5мг/мл. Мазки ополіскують дистильованою водою 3-5 секунд і висушують. Потім інкубують у середовищі, що складається з 40мл 0,2 М - фосфа тного буфера з рН 7,2-7,3 + 540мг сукцината натрію для СДГ чи 630мг a -ГФДГ+ по 10мг трилона Б і п-нітротетразолія фіолетового при температурі 37°С в ультратермостаті протягом 1 години. Потім мазки промивають дистильованою водою і дофарбовують одно-відсотковим розчином метилового зеленого на ацетатному буфері (рН-5,0) протягом 5-10 хвилин. У кожнім лімфоциті підраховують кількість гранул формазана (у 50 клітках) с обчисленням середнього числа гранул 1л (продукту реакції) у 1 лімфоциті. Обстежено 180 вагітних, зі звичним перериванням вагітності, в анамнезі яких було два і більш мимовільних абортів чи передчасних пологів, ускладнених плацентарною недостатністю. 2 група - 200 вагітних зі звичним перериванням вагітності в анамнезі, у яких було два і більш мимовільних абортів чи передчасних пологів, але вагітність не була ускладнена плацентарною недостатністю. Крім того, для контролю знадобилося 100 соматично здорових жінок з фізіологічним перебігом вагітності, які мали в анамнезі одні і більше своєчасних пологів. Вік вагітних склав від 19 до 42 років. Переважна більшість 142 (78,9%) жінок першої групи були у віці старші 30 років, незважаючи на те, що вік жінок 2-ої групи старше 30 років складає 64 (32,5%) жінок. Клінічні дані отримано шляхом зв’язування скарг, об’єктивного акушерського обстеження та гормонального, біохімічного, цитохімічного, бактеріологічного, ультразвукового, доплерометричного дослідження вагітних. На момент дослідження всі вивчаємі вагітні мали задовільний стан здоров'я, нормальну температуру тіла (36,6°С), відсутність гострої повітряно-капельної інфекції та хронічна інфекція (шлунково-кишкового тракту, ЛОРорганів, дихальних шляхів, сечостатевої системи) була в стадії повної ремісії. Дані представлені в таблицях 1,2. Таблиця 1 Розподіл величини активності ферментів лейкоцитів периферичної крові у вагітних проспективної групи в І триместрі вагітності у термін 6 -9 тижнів вагітності. Групи жінок Контр.група (п 1=100) 1 група (п 2=180) 2 група (п 3=200) СДГ (г/л) 22,5±1,23 14,8±0,78* 17,9±0,94# a -ГФДГ (г/л) 14,1±0,82 9,1±0,45* 10,7±0,62# *- різниця достовірна (Р