Спосіб виготовлення гіперімунної антитоксичної сироватки крові до кон`югату термостабільного і термолабільного ентеротоксинів e. coli

Спосіб виготовлення гіперімунної антитоксичної сироватки крові до кон'югату 3 30128 4 загальновідомим методом. Кров збирають у 4 8 40 стерильні пробірки, закривають ватно-марлевими 5 12 50 пробками, ставлять на 20-30 хвилин у термостат 6 15 60 при 37°С, після чого відокремлюють згусток крові 7 19 70 від стінок пробірок стерильною пастеровською 8 22 80 пипеткою, і ставлять у холодильник на 3-4 години 9 26 90 при 4°С. Після чого відсасують відстояну прозору 10 29 100 сироватку пастеровською пипеткою і центрифугують її при 2000-3000об/хв. протягом 10-15хв. для повного осаджування формених елементів крові. Спосіб виготовлення гіперімунної антитоксично Приклад 1. до ко'нюгату термостабільного і термолабільного е Превентивні властивості одержаної гіперімунної сироватки крові визначали на білих Кількість Доза сироватки Доза антигену Випробуваний антиген безпородних мишах вагою 14-16г. Для цього мишей (мл) (мл) тваринам вводили інтраперітоніально 0,1мл ST гомологічного сироватки, а через добу їх заражали летальними 10 од 1,0 штаму дозами ентеротоксинів і культур (2 Dlm) LT гомологічного гомологічних і гетерологічних штамів Е.соlі. У 10 од 1,0 штаму контролі використовували мишей яких не Контроль 5 1,0 прищеплювали гіперімунною сироваткою. За ST гетерологіч ного дослідними і контрольними мишами вели 10 од 1,0 штаму спостереження протягом 7 днів, відмічаючи Контроль 5 1,0 кількість загиблих тварин (Таблиці 2, 3 ). LT гетерологіч ного Приклад 2. 10 од 1,0 штаму Нейтралізуючі властивості одержаної гіперімунної антитоксичної сироватки крові Контроль 5 1,0 визначали на білих безпородних мишах вагою 1416г. Для цього тваринам вводили нейтралізовані сироваткою летальні дози термостабільного і термолабільного ентеротоксинів Е.соlі. До 0,1мл Спосіб виготовлення гіперімунної антитоксич гіперімунної сироватки окремо додавали 0,05крові до кон'югату термостабільного і термолабільног 0,10мкг ентеротоксинів (3-6 Dlm), суміш видержували у термостаті одну годину при Доза антигену Випробуваний Кількість Доза сироватки температурі 37°С, після чого у дозі 0,3мл вводили (мікроб, антиген мишей у групі (мл) інтраперітоніально мишам. У якості контролю клітин/мл) використовували нормальну кролячу сироватку Культура крові. За дослідними і контрольними тваринами гомологічного (ST) 10 од 1,0´109 вели спостереження протягом 7 днів відмічаючи штаму Е.соlі кількість загиблих тварин (Таблиця 4). Контроль 5 1,0´109 Використання кон'югату термостабільного і Культура термолабільного ентеротоксинів Е.соіі для гомологічного (LT) 10 од 1,0´109 імунізації тварин дозволяє отримати гіперімунну штаму Е.соlі антитоксичну сироватку крові, яка містить Контроль 5 1,0´109 високоафінні антитіїа як до термостабільного, так і Культура термолабільного ентеротоксинів Е.соlі. Одержана 10 од 1,0´109 гетерологічного (ST) таким способом гіперімунна антитоксична штаму сироватка крові захищає щеплених нею тварин від Контроль 5 1,0´109 зараження 3-6 Dlm термостабільним і Культура термолабільним ентеротоксинами, а також від гетерологічного (LT) 10 од 1,0´109 зараження культурами (1,0´109) гомологічних і штаму гетерологічних токсигенних штамів Е.соlі, і може Контроль 5 1,0´109 використовуватися як профілактичний і лікувальний препарат при ентеротоксичній формі колібактеріозу сільськогосподарських тварин. Спосіб виготовлення гіперімунної антитоксич Таблиця 1 крові до ко'нюгату термостабільного і термолабільног Спосіб виготовлення гіперімунної антитоксичної сироватки К крові до ко'нюгату термостабільного і термолабільного ентеротоксинів Е.соlі Кількість опитних Об'єм сироватки Досліджувана сироватка енте тварин (мл) (м № ін'єкції Дні вакцинації Доза антигену (мкг/мл) Спосіб інокуляції Антитоксична до ST 1 1 10 підшкірно кон'югату ST/LT0,1 2 2 20 підшкірно 6 Ентеротоксинів Е.соlі внутривенно 6 0,1 3 5 30 5 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 Нормальна кроляча Нормальна кроляча 30128 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 6 6 6 6 6 6 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 6 6 6 6 6 6 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 6 0,07 0,08 0,09 0,10 LT-токсин 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 ST-токсин 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 LT-токсин 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 0/6 0/6 1/5 1/5 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 0/6 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0 6/0