Спосіб визначення рівня гіпоксії в пухлині як фактора прогнозу перебігу раку шлунка

Спосіб визначення рівня гіпоксії в пухлині як фактора прогнозу перебігу раку шлунка, що включає ЯМР дослідження операційного матеріалу, який відрізняється тим, що операційний матеріал перетворюють на перхлорний екстракт та на фосфорному ядрі ЯМР спектрометра визначають співвідношення фосфомоноестери/неорганічний фосфат і при його значенні нижче 1,4 пухлину оцінюють як гіпоксичну та прогнозують несприятливий перебіг захворювання, а при його значенні вище 1,4 п ухлину характеризують як оксигеновану, що вказує на сприятливий перебіг захворювання. (19) (21) u200802486 (22) 26.02.2008 (46) 10.06.2008, Бюл.№ 11, 2008 р. (72) БУБНОВСЬКА ЛАРИСА МИКИТІВН А, UA, КОВЕЛЬСЬКА АНТОНІНА ВАСИЛІВНА, U A, БОЛДЕСКУЛ ІГОР ЄВГЕНОВИЧ, UA, ОСИНСЬКИЙ ДМИТРО СЕРГІЙОВИЧ, UA, МЕРЕНЦЕВ СЕРГІЙ ПАВЛОВИЧ, U A, ОСИНСЬКИЙ СЕРГІЙ ПЕТРОВИЧ, UA (73) ДЕРЖАВНА УСТАНОВА "ІНСТИТУТ ОНКОЛОГІЇ АКАДЕМІЇ МЕДИЧНИХ Н АУК УКРАЇНИ", UA, ІНСТИТУТ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ ПАТОЛОГІЇ, ОНКОЛОГІЇ І РАДІОБІОЛОГІЇ ІМ. Р.Є. КАВЕЦЬКОГО НАН УКРАЇНИ, UA 3 33260 4 Radiother. Oncol. - 2003. - Vol.67. - P.3-15], яка догайно занурювали в рідкий азот, в якому її розтизволяє визначити умовний рівень експресії маркерали до порошковидного стану і екстрагували форів, залежної від рівня гіпоксії тканини. Встановлесфорвмісні речовини розчином холодної 1,2 н но, що існує кореляція між рівнями експресії цих НСlO4 (перхлорної кислоти) Потім рН перхлорного маркерів та гіпоксії. екстракту (ПХЕ) доводили до 7,6-8,0 (дівалентні Позитивним у прототипі є те, що рівень ексіони видаляли за допомогою Chelex 10мг/5мл пресії маркерів визначається за допомогою моно(Sigma, США)), фільтрували, ліофілізували та збеклональних антитіл, тобто з високим ступенем рігали при -20°С. Перед реєстрацією спектрів ПХЕ селективності. на 31Р Я МР спектрометрі зразки розчиняли в 1,0мл Недоліком прототипу є те, що рівень експресії D2O, центрифугували і переносили в ЯМР пробірмаркерів не завжди корелює з парціальним тиском ки для аналізу. кисню і залежить від типу гіпоксії - гострої чи хроСпектри ПХЕ реєстрували на ЯМР спектроменічної, що знижує прогностичну значущість визнатрі, використовували 5мм кювети. Спектри вимічення цього показника. рювали при 161,976 MHz, зі спектральною шириВ основу корисної моделі поставлено задачу ною в 64724,9 Hz, 90° шириною імпульсу та створити спосіб визначення рівня гіпоксії в пухлині затримкою в 4сек. Тринатрієва сіль метилендифояк фактора прогнозу перебігу раку шлунка шляхом сфонієвої кислоти (Sigma) правила за стандарт. визначення співвідношення РМЕ/Рі пухлини в опеВсі - Р хімічні зрушення у спектрах співвідносили раційному (біопсійному) матеріалі, що дасть мождо сигналу фосфокреатину (ФК), який позначаєтьливість прогнозувати перебіг захворювання. ся як 0,0ррm. Поставлена задача вирішувалася наступним Співвідношення РМЕ/Рі дорівнювало 1,62 (бічином: льше медіани, яка дорівнює 1,4), що вказує на Під час операції частку видаленої пухлинної добру оксигенованість пухлини, тобто на відносну тканини негайно занурюють в рідкий азот, в якому відсутність гіпоксії. її розтирають до порошковидного стану і екстраЗа цих умов тривалість життя хворого склала гують фосфорвмісні речовини розчином холодної 129 тижнів. 1,2н НСlО4 (перхлорної кислоти) Потім рН перхлоII. Хворий Б., (Історія хвороби №8073, АК рного екстракту (ПХЕ) доводять до 7,6-8,0 (дівале№5846/04, ПГЗ №17062 - аденокарцинома шлуннтні іони видаляють за допомогою Chelex ка, T3N2M0, G2, стадія ШВ). Виконана операція 10мг/5мл (Sigma, США), фільтрують, ліофілізують резекція шлунка по Більрот-2 в модифікації Гофта зберігають при -20°С. Перед реєстрацією спекмейстера-Фігстерера. трів ПХЕ на 31Р ЯМР спектрометрі зразки розчиПід час операції частку видаленої пухлинної няють в 1,0мл D2O, центрифугують і переносять в тканини негайно занурювали в рідкий азот, в якому ЯМР пробірки для аналізу. її розтирали до порошковидного стану і екстрагуСпектри ПХЕ реєструють на ЯМР спектрометвали фосфорвмісні речовини розчином холодної рі, використовуючи 5мм кювети. Спектри вимірю1,2н НСlО4 (перхлорної кислоти). Потім рН перхють при 161,976 MHz, зі спектральною шириною в лорного екстракту (ПХЕ) доводили до 7,6-8,0 (ді64724,9 Hz, 90° шириною імпульсу та затримкою в валентні іони видаляли за допомогою Chelex 4сек. Тринатрієва сіль метилендифосфонієвої 10мг/5мл (Sigma, США)), фільтрували, ліофілізукислоти (Sigma) править за стандарт. Всі 31Р хімічвали та зберігали при -20°С. Перед реєстрацією ні зрушення у спектрах співвідносять до сигналу спектрів ПХЕ на 31Р ЯМР спектрометрі зразки розфосфокреатину (ФК), який позначається як 0,0ррт. чиняли в 1,0мл D2O, центрифугували і переносили Межа розподілу між умовно «добре» та «погано» в ЯМР пробірки для аналізу. оксигенованими пухлинами складає 1,4 (0,44-5,32) Спектри ПХЕ реєстрували на ЯМР спектромедля всіх обстежених хворих, що відповідає медіані трі, використовували 5мм кювети. Спектри вимівищевказаного співвідношення. У хворих, у п ухлирювали при 161,976MHz, зі спектральною ширинах яких співвідношення РМЕ/Рі1,4 - пухлини добре оксигеновані. Встаносфонієвої кислоти (Sigma) правила за стандарт. влено, що в групі хворих з значенням РМЕ/Рі