Спосіб визначення функціональної спроможності гладеньких м’язів кишки людини в експерименті

Спосіб визначення функціональної спроможності гладеньких м'язів кишки людини в експери 3 39571 ділянках кишки, на інші суміжні ділянки при атрезіях кишок у новонароджених. Найбільш близьким за технічною суттю є спосіб морфометричного визначення стану стінки кишки, який полягає у визначені морфологічних особливостей стінки кишки візуально нормальних фрагментів кишки [8]. Однак, даний спосіб має недоліки, оскільки не дає безпосередньої інформації про функціональний стан гладеньких м'язів у зоні резекції. Задача, яку вирішує корисна модель, що пропонується, - цілеспрямоване визначення функціональної спроможності гладеньких м'язів стінки кишки в межах зони резекції. Технічний результат, який досягається, полягає у відведенні гальмівних синаптичних потенціалів певної амплітуди, що генерується у відповідь на супрамаксимальне інтрамуральне подразнення гладеньких м'язів кишки людини, отриманні можливості більш досконало досліджувати фізіологічний стан гладеньких м'язів кишок та розробляти раціональні методи післяопераційного відновлення моторики кишечнику. Поставлена задача досягається тим, що у відомому способі морфометричного визначення стану стінки кишки, в якому згідно корисної моделі замість морфометричного визначення стану стінки кишки візуально нормальних ділянок, в межах зони резекції встановлюють функціональну спроможність гладеньких м'язів кільцевого шару кишки шляхом визначення амплітуди гальмівних синаптичних потенціалів, викликаних інтрамуральним електричним подразненням смужок гладеньком'я зових клітин. Величина амплітуди гальмівних синаптичних потенціалів до 3,0мВ вказує на функціональну неспроможність, а величина амплітуди більше 3,0мВ - на функціональну спроможність гладеньких м'язів стінки кишки. Перевагами способу, який пропонується є визначення функціонального стану гладеньких м'язів з зони резекції, які розташовані у візуально незміненій умовно нормальній ділянці межі резекційного фрагменту, що дозволяє більш коректно оцінити стан стінки кишки у ділянці, що залучена до створення анастомозу. Сутність способу, що пропонується, пояснюється графічно на рис., на якому представлена ілюстрація розбіжностей амплітуди гальмівних синаптичних потенціалів гладеньких м'язів ділянки: 1 - дванадцятипалої кишки пацієнта з виразковою хворобою дванадцятипалої кишки (з порушенням функціональної спроможності стінки кишки); 2 - порожньої кишки пацієнта з виразковою хворобою шлунку (характеризуються збереженою функціональною спроможністю); 3 - висхідної ділянки ободової кишки пацієнта зі злоякісним новоутворенням сліпої кишки (характеризуються збереженою функціональною спроможністю); 4 - сигмоподібної кишки пацієнта з малігнізацією поліпа ободової кишки (характеризуються збереженою функціональною спроможністю). Спосіб здійснюють таким чином: 4 З резекційних фрагментів візуально нормальних повношарових ділянок стінки кишки людей, яким в хірургічних клініках за медичними показаннями було проведено операції отримують ділянку стінки довжиною 20мм і шириною 10мм, максимально наближену до межі резекції. В операційній, одразу після вирізання, повношарову ділянку кишки ретельно промивають розчином Кребса, який має кімнатну температуру. Розчин Кребса має такий склад (ммоль/л): NaCl-120,4, КСl-5,9, NaHCO3-15,5, NaH2PO4-1,2, СаСl2-2,5, MgCl2-1,2, глюкоза-11,5. В лабораторії під бінокулярним стереомікроскопом з повношарової ділянки кишки вирізають ізольовані гладенько-м'язові смужки кільцевого шару довжиною 10мм і товщиною 12мм. Для цього послідовно відшаровують слизову оболонку разом з підслизовим шаром, а потім з цього фрагменту отримують ізольовані гладеньком'язові смужки кільцевого шару, які занурюють у розчин Кребса, що має температуру 35-36°С і для попередження холінергічних впливів містить блокатор М-холінорецепторів атропін (110-6моль/л). Смужки гладеньких м'язів розміщують у камері установки сахарозний місток і інтрамурально подразнюють прямокутними поштовхами електричного струму супрамаксимальної сили. Досягають того, щоб у відповідь на електричне подразнення у гладеньких м'язах генерувалися гальмівні синаптичні потенціали. їх амплітуду визначають шляхом порівняння з калібрувальним сигналом у 5 або 10 мілівольт (мВ). Якщо за зазначених умов відводять гальмівні синаптичні потенціали низької амплітуди (до 3,0мВ), то роблять висновок, що незважаючи на візуально нормальний стан стінки кишки у зоні резекції, функціональна спроможність окремих її шарів (гладенько-м'язових) є порушеною. Таким чином, запропонований спосіб дає можливість визначати в умовах експерименту функціональну спроможність кишки людини для впровадження при проведенні досліджень, спрямованих на поглиблення уявлень про функціональну спроможність гладеньких м'язів. Спосіб був апробований на кафедрі біології Національного медичного університету імені О.О.Богомольця. Література: 1. Laparoscopic Resection of Colonic Carcinoma EAES consensus conference Lisbon, June 2, 2002.: Consensus proceedings. - University Hospital Rotterdam, Dijkzigt, Depart, of Surg., 2002 - 32p. 2. Сафронов Д. В. Осложненные доброкачественные заболевания ободочной кишки / Д. В. Сафронов, Н. И. Богомолов // Сибирск. Мед. журн. 2005. - Т.58, №8.-С. 5-8. 3. Симонов Н.Н. Современные принципы хирургического лечения рака ободочной кишки / Н.Н.Симонов, И.В.Правосудов, А.В.Гуляев [и др.] // Практическая онкология. - 2000. - №1 (март). С.14-18. 4. Antonucci A. Chronic intestinal pseudoobstruction / A. Antonucci, L. Fronzoni, L. Cogliandro [et al.] // World J. Gastroenterol. - 2008. - Vol. 14, №19. - P.2953-2961. 5 39571 5. Koch T.R. Altered inhibitory innervation of circular smooth muscle in Crohn's colitis. Association with decreased vasoactive intestinal polypeptide levels / T.R.Koch, J.A. Carney, V.L.Go and J.H.Szurszewski // Gastroenterology. - 1990. - Vol. 98, №6. -P.1437-1444. 6. Lu G. Inflammation modulates in vitro colonic myoelectric and contractile activity and interstitial cells of Cajal / G. Lu, X. Qian, I. Berezin [et al.] // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. - 1997. - Vol. 273, №6. - P.G1233 - G1245. Комп’ютерна в ерстка Н. Лисенко 6 7. Der T. Interstitial cells of Cajal and inflammation-induced motor dysfunction in the mouse small intestine / T. Der, P. Bercik, G. Donnelly [et al.] // Gastroenterology. -2000. - Vol. 119, №6. - P.15901599. 8. Єршов В.Ю. Морфометрична характеристика кишки при атрезіях у новонароджених / В.Ю.Єршов, М.П.Ковальський // Науковий вісник НМУ ім. О.О.Богомольця. - 2007. - №4. - С.40-47. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601