Спосіб біоіндикації забруднення грунту свинцем

Спосіб бюіндикацм забруднення ґрунту свинцем шляхом визначення мікроядерного індексу клітин букального епітелію дітей дошкільного віку, який відрізняється тим, що після забору стериль Винахід відноситься до медицини, екології та генетики, метою його є розробка діагностичних ПІДХОДІВ до виявлення несприятливого екогенетичного пресингу на дитячий організм факторів зовнішнього середовища для вдосконалення профілактичних та лікувально-реабілітаційних заходів, спрямованих на корекцію зрушень в дитячому організмі, які спостерігаються вже на доклінічному етапі за допомогою бюіндикацм забруднення грунту солями свинцю в місцях розташування дитячих дошкільних установ Мікроядерний тест є цитогенетичним методом, що відображає стабільну мутацію, дозволяє виявити цитогенетичні дефекти у ексфоліативних клітинах людського організму (букальний епітелій, клітини епітелію сечового міхура, респіраторного тракту тощо) [Нерсесян А К Микроядерный тест в эксфолиативных клетках человека как метод изучения действия мутагенов/канцерогенов // Цитология и генетика - 1996 - №5 - С 80 - 87] Прототипом способу діагностики, що заявляється є робота, авторами котрої є Горова А І , Бобир Л Ф , Скворцова Т В и др Методологические аспекты оценки мутагенного фона и генетического риска для человека и биоты от действия мутагенных экологических факторов // Цитология и генетика, 1996 - Т 30, №6 - С 78 - 86], де представлено результати екогенетичного дослідження, проведеного у різних районах м Дніпропетровськ Аналізувалися частота хромосомних аберацій у соматичних клітинах букального епітелію дітей ним шпателем ексфоліативних клітин букального епітелію, висушування та дворазової фіксації препаратів впродовж 15 хвилин, наступного фарбування препаратів розчином ацетокарміну, не менше як на 1000 клітин підраховується КІЛЬКІСТЬ КЛІТИН з мікроядрами та визначається мікроядерний індекс, при значеннях якого вище 0,026 умов одиниць робиться висновок про наявність забруднення солями свинцю ґрунту в місцях розташування дитячих дошкільних закладів дошкільного віку та генетичних зрушень у чутливих тест-рослинах Спільним між прототипом і роботою, що планується, є комплексна оцінка екологічної ситуації, проведення моніторингу забруднення довкілля, включаючи спостереження за джерелами антропогенного впливу, а також за "ВІДПОВІДДЮ" ЖИВИХ систем на екогенетичний пре синг, що проявляється зростанням мікроядерного індексу Прототипу притаманний ряд недоліків, головними з яких є хибнопозитивні та хибнонегативні результати, а також відсутність аналізу діагностичної ЦІННОСТІ вказаного методу з позицій клінічної епідеміологи Тест запропоновано використовувати у промислово забруднених регіонах, де вміст полютантів у зовнішньому середовищі нерідко перевищує гранично допустимі концентрації Завданням даного винаходу є забезпечення специфічності та достовірності способу бюіндикацм забруднення грунту солями свинцю в місцях розташування дитячих дошкільних закладів та, ВІДПОВІДНО до цього, - підвищення ефективності профілактичних заходів ще на донозолопчному рівні Завдання, яке поставлене, може бути досягнене за рахунок того, що у дітей, які відвідують ДОШКІЛЬНІ установи в регіонах із різним щодо вмісту у грунті солей свинцю геохімічними умовами, проводять оцінку мікроядерного індексу в клітинах букального епітелію, враховуючи який, оцінюють забруднення грунту вище вказаним металом О ю о 47050 Даний спосіб відрізняється від прототипу тим, що мікроядерний індекс вивчається в аспекті ймовірного зв'язку з підвищеним вмістом у грунті зон розташування дошкільних закладів солей свинцю, із визначенням діагностичної ЦІННОСТІ мікроядерного тесту, що дозволяє зробити висновок про ВІДПОВІДНІСТЬ технічного вирішення, яке заявляється, критерію "новизна" Суттєва ознака, яка відрізняє від прототипу технічне вирішення, що заявляється, не виявлена у інших технічних вирішеннях при вивченні даної та суміжних галузей науки та, таким чином, забезпечує ВІДПОВІДНІСТЬ способу, який заявляється, критерію "суттєва ВІДМІННІСТЬ" Методика визначення мікроядерного індексу полягає в наступному після забору стерильним шпателем ексфоліативних клітин букального епітелію у дітей дошкільного віку, висушування та дворазової фіксації препаратів (спочатку 70° спирт, а через ЗО хвилин - фіксатор Карнуа спирт + хлороформ + оцтова льодяна кислота у співвідношенні 6 3 1) впродовж 15 хвилин проводиться фарбування препаратів розчином ацетокарміну (ацетоорсешу) Проводиться підрахунок клітин з мікроядрами не менше, як на 1000 клітин, після чого визначається мікроядерний індекс (МЯІ) за формулою дорівнював 0,031 ±0,00051умов одиниць А у 137 дітей з п'яти дошкільних закладів, де вміст свинцю у грунті в середньому склав 15,5 ± 3,3мг/кг, середнє значення мікроядерного тесту було суттєво меншим і склало 0,024 ± 0,0005 умов, одиниць (Р < 0,05) Виходячи з отриманих даних, слід вважати, що показник МЯІ в букальному епітелії дошкільнят можна використовувати в якості бюмаркеру забруднення грунту місць розташування дитячих дошкільних закладів як прогностичний критерій негативного впливу на дітей ЗОВНІШНІХ екостимулів антропогенного походження Показники діагностичної ЦІННОСТІ цього тесту щодо підвищеного вмісту в грунті солей свинцю наведені в таблиці 1 МЯІ = КІЛЬКІСТЬ КЛІТИН З мікроядрами / Загальна КІЛЬКІСТЬ клітин *Примітка Se - сенситивність тесту, Sp - специфічність тесту, PV+ - позитивна передбачувана Середній регіональний показник мікроядерного індексу вираховувався обчисленням середнього арифметичного МЯІ 277 дошкільнят, які мешкають в МІСТІ Чернівці, та склав 0,026 ± 0,004 умовних одиниць При перевищенні даного показника більше 0,026умов одиниць робили висновок про підвищення МЯІ у співставленні із середньорепональними значеннями У дітей, які відвідують ДДУ, розташовані у зонах з вмістом у грунті солей свинцю, більше за 20мг/кг, мікроядерний індекс був суттєво вищим за критерієм Розенбаума, Q (Q = 22, ро < 0,01), ніж у дітей в екологічно більш сприятливих умовах виховання Так, зростання середнього по дитячій установі мікроядерного індексу корелювало із вмістом у грунтах місць розташування ДДУ солей свинцю, і складало г = + 0,8 (Р 0,026 Sp PV+ PV 70,8 90,0 89,5 72,0 ЦІННІСТЬ, PV- негативна передбачувана ЦІННІСТЬ Таким чином, діагностична ЦІННІСТЬ способу бюіндикацм забруднення грунту свинцем, що заявляється, суттєво вища, ніж способу прототипу Сутність винаходу пояснюється певними прикладами Приклад 1 ДДУ №40 Середній МЯІ складає 0,047умов од Вміст солей свинцю у грунті складає 75,0мг/кг (ГДК = 20мг/кг) Приклад 2 ДДУ №38 Середній МЯІ складає 0,023умов од Вміст солей свинцю у грунті складає 15,5мг/кг (ГДК = 20мг/кг) Приклад З ДДУ №4 Середній МЯІ складає 0,028умов од Вміст солей свинцю у грунті складає 21,7мг/кг (ГДК = 20мг/кг) Таким чином, використання способу, що заявляється, дозволяє надійно, без використання коштовних хіміко-аналітичних досліджень, проводити бюшдикацію забруднення грунту зон розташування ДДУ солями важких свинцю Це на підставі отриманих даних, по-перше, позитивно впливатиме на показники здоров'я дітей як результат раціонально сформованих груп ризику та підвищення ефективності профілактичних та лікувальнореабілітаційних заходів, а, по-друге, дозволить отримати позитивний економічний ефект 47050 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71