Спосіб зберігання водного екстракту пігменту r-фікоеритрину

Спосіб зберігання водного екстракту пігменту R-фікоеритрину, що включає зберігання в темноті при температурі 3-5°С з використанням консерванту, наприклад етанолу, в концентрації 20 %, який відрізняється тим, що початкова концентрація сухої речовини сировинного джерела, наприклад червоної водорості гелідіум (Gelidium latifolium (Grev.) Born. et Thur), складає 10-40 мг/мл. (19) (21) u200906727 (22) 26.06.2009 (24) 25.02.2010 (46) 25.02.2010, Бюл.№ 4, 2010 р. (72) БЕРЕГОВА НАТАЛІЯ МИХАЙЛІВНА (73) ІНСТИТУТ БІОЛОГІЇ ПІВДЕННИХ МОРІВ ІМ. О.О. КОВАЛЕВСЬКОГО НАН УКРАЇНИ 3 1) з кінцевою концентрацією консерванта в екстракті 10%; 2) з концентрацією консерванта 20% і 40%. Порівнюючи отримані результати з результатами способу зберігання екстракту С-фікоціаніну, можна відзначити аналогію, за винятком концентрації етанолу 40%: для С-фікоціаніну консервант даної концентрації викликав часткову денатурацію пігменту. R-фікоеритрин виявився стійкішим пігментом в порівнянні із С-фікоціаніном: при зберіганні С-фікоціаніну навіть в оптимальних умовах через 2 тижні концентрація пігменту знижувалася на 1020%, тоді як концентрація R-фікоеритрину в даному тимчасовому інтервалі практично не змінювалась. Відсутність консерванта в пробі впливала на розкладання R-фікоеритрину. Так, на графіці видно різка зміна оптичній щільності проб, що не містять консерванта. Хаотичну зміну оптичній щільності (графіки 1 ,2, Фіг.1) можна пояснити швидким руйнуванням пігменту в результаті появи бактерій в екстракті. Таким чином, можемо зробити висновок про необхідність присутності консерванта в пробі. Світло і відсутність охолоджування (кімнатна температура) також негативно впливали на пробу: спостерігали повне руйнування пігменту протягом місяця (графік 7, Фіг.1). Наявність цих же чинників викликали руйнування С-фікоціаніну вже на 13 добу. Результати дослідження залежності зберігання водного екстракту R-фікоеритрину від концентрації сировинного джерела (гелідіуму), представлені на Фіг.2: 1 - початкова концентрація гелідіуму 42мг/мл; 2-21мг/мл; 3-10,5мг/мл. Початкова концентрація червоної водорості гелідіуму (Gelidium latifolium (Grev.) Born, et Thur у меншій мірі, чим концентрація спіруліни (як сировинного джерела С-фікоціаніну) позначалася на розкладанні фікобіліпротєїну: якщо при початковій концентрації сировини 26мг/мл концентрація Сфікоціаніну за 25 днів зменшилася в 3,3 рази, то при концентрації сировини 21мг/мл рівень R 47701 4 фікоеритрину за 28 діб знизився в 1,5 рази. Проте, менша початкова концентрація сировини (графік 3, Фіг.3) виявлялася переважнішою (10мг/мл порівняно з 42мг/мл і 21мг/мл). На підставі проведених експериментів, що виявляють оптимальні умови зберігання Rфікоеритрину, можна зробити висновок про переважне зберігання водного розчину R-фикоцианина в темноті, на холоді (4-5°С), при початковій концентрації сухої речовини гелідіуму 10-40мг/мл, при кінцевій концентрації етанолу як консервант 20%40%. Приклад реалізації способу. Фікоеритрин отримували з червоної водорості Gelidium latifolium (Grev.) Born, et Thur, зібраної в морі. Біомасу ретельно промивали проточною водою, очищали від супутніх видів. Зважували, просушували, 2г водоростей заливали 50мл холодної дистильованої води, доводили до гомогенної субстанції. Гомогенат поміщали в морозильну камеру холодильника на 2-3 години, потім операцію заморожування-розморожування проводили кілька разів для кращого витягу пігменту. Гомогенат центрифугували протягом 20хв. Про чистоту пігменту, що виділяється з клітки, судили після зняття спектру на спектрофотометрі (Фіг.3) по положенню максимумів поглинання у видимій області і співвідношенню інтенсивностей видимого (5007000нм) і ультрафіолетового (300-400нм) максимумів. Центрифугат розводили холодною дистильованою водою, до концентрації речовини водорості 40мг/мл. Для зберігання екстракту протягом 2 місяців як консервант додавали етанол в кінцевій концентрації в розчині 20%. Отриманий екстракт зберігали без доступу світла при температурі 4°С протягом 2-х місяців без втрати властивостей. Перевага даної технології полягає в дешевизні і методичній простоті. Розробка умов зберігання водних екстрактів пігментів дозволяє забезпечити широке застосування фікоеритрину в біопромисловості. 5 Комп’ютерна верстка М. Ломалова 47701 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601