Спосіб ранньої діагностики сенсибілізації організму шахтарів до вугільно-породного пилу

Спосіб ранньої діагностики сенсибілізації організму шахтарів до вугільно-породного пилу, що включає забір крові з периферичної вени, дослідження и в реакції імунолейколізу, визначення ступеня сенсибілізації по КІЛЬКОСТІ ушкоджених лейкоцитів, який відрізняється тим, що реакцію імунолейколізу проводять із специфічним гаптеном, виготовленим з вугільно-породного пилу, що дозволяє виявити алерпзацію організму шахтарів до складових частин вугільно-породного пилу і при виявленні більше 20% ушкоджених лейкоцитів дозволяє судити про наявність сенсибілізації до елементів вугільно-породного пилу на ранніх стадіях розвитку алергічних захворювань Винахід відноситься до медицини, а саме - до способів діагностики чутливості організму шахтарів до вугільно - породного пилу по імунологічному дослідженню клітин крові і може бути використаний для раннього виявлення сенсибілізації організму шахтарів до складових частин вугільно - породного пилу У більшості країн світу, особливо в індустріальноо розвинених країнах, спостерігається значний зріст алергічних захворювань За даними ВО0 3 до 10% населення страждає алергічними захворюваннями При цьому в усьому СВІТІ щорічно спостерігається збільшення частоти та посилення тяжкості цього виду патології Росту алергічних захворювань, на думку багатьох авторів, сприяє розвиток промисловості Таким чином, проблема діагностики алергічних ринітів у шахтарів є досить актуальною Наявні способи не дозволяють діагностувати специфічну сенсибілізацію організму шахтарів до вугільно - породного пилу, що викликало необхідність розробки методу ранньої діагностики сенсибілізації організму шахтарів до вугільно - породного пилу з використанням специфічного гаптена організму по висоті місцевої реакції Недоліками відомого способу є те, що введення додаткової КІЛЬКОСТІ алергену може привести до значного погіршення стану хворого, аж до розвитку шокової реакції, діагностичне введення цілої серії алергенів у високо алерпзований організм веде до поліалерпзаци і не дозволяє виявити основний алерген, тобто не є специфічною, внутрішкірна проба, не піддається КІЛЬКІСНІЙ ОЦІНЦІ Крім того, немає специфічного алергену для проведення внутрішкірних проб, здатного знайти сенсибілізацію до вугільне - породного пилу у шахтарів При ньому відсутність раннього виявлення даного виду сенсибілізації веде до розвитку важких алергічних захворювань дихальних, шляхів Найбільш близьким по технічній сутності заявленому способу є спосіб діагностики сенсибілізації організму [2 С В Морозова, Д М Лодинова, Діагностика бактеріальної алергії в хворих із захворюваннями носа та біля носових пазух, - Вестник отоларингології , 1990р , №6, стор 22] шляхом забору крові з периферичної вени, дослідження и в реакції імунолейкоза з різноманітними алергенами, тобто визначення ступеню сенсибілізації по КІЛЬКОСТІ ушкодженних лимфоцитів До того ж в якості алергену у даному методі використовується специфічний бактеріальний алерген (стрептококовий, стафілококовий і ш) Спосіб заснований на виявленні специфічної стафілококової чи стрептококової сенсибілізації in Відомий спосіб діагностики сенсибілізації організму [1 Плужников М С , Лавренова Г В Запальні й алергічні захворювання порожнини носа та біля носових порожнин - К Здоров'я, 1990 - с 54] шляхом внутрішкірного введення серії алергенів в передпліччя з наступною оцінкою сенсибілізації ю (О о ю vitro методом імунолейколіза, заснованому на здатності лейкоцитів довгостроково зберігати імунологічну пам'ять про зустріч з там чи іншим алергеном Повторна ж зустріч з алергеном призводить до загибелі сенсибілізованого лейкоцита Підрахунок загиблих лейкоцитів проводили в камері Горяєва і результат обчислювали за формулою контроль - досвід / контроль Оцінку отриманих результатів проводили по шкалі до 0,1 - фонове значення, 0,11 - 0,20 - слабкий ступінь, 0,21 - 0,30 середній ступінь, 0,31 і вище - сильний ступінь сенсибілізації КЛІНІЧНО визначальними є середній й сильний ступені Недоліками відомого способу є те, що він не виявляє сенсибілізації організму до специфічного для кожної групи досліджуваних алергену До того ж, хоч майже в 100% випадках у хворих з алергічним ринітом є сенсибілізація до різної мікробної флори, але частіше мікробна флора є вторинною А пусковим механізмом до розвитку КЛІНІКИ алергічного риніту є ІНШІ фактори, специфічні для кожної групи хворих, виходячи з професії, місця проживання і т д Крім того, бактеріальна алергія виявляється до різних видів мікробів (стрептококи, стафілококи, синегнійна паличка, пневмококи і т д ) у практично однаковій ВІДСОТКОВІЙ складовій, отже не можна простежити якусь залежність частоти розвитку алергічних захворювань від бактеріального забруднення навколишнього середовища Майже аналогічні показники бактеріальної сенсибілізації представлені в літературі при обстеженні людей інших професій, що не дає нам підстави стверджувати, що бактеріальна сенсибілізація є специфічною для шахтарів з алергічним ринітом Таким чином, відомий спосіб не дає можливості вірогідно встановити наявність сенсибілізації до складових частин вугільне - породного пилу у шахтарів В основу винаходу поставлена задача створення способу ранньої діагностики сенсибілізації організму шахтарів до вугільне - породного пилу шляхом забору крові з периферичної вени, дослідження її в реакції імунолейколіза з специфічним гаптеном, виготовленим з вугільно - породного пилу, що дає можливість знайти ушкодження лейкоцитів під дією специфічного гаптена в крові сенсибілізованого хворого при постановці реакції імунолейколіза і вірогідно встановити наявність сенсибілізації до складових частин вугільно - породного пилу, що дає можливість вірогідно встановити наявність сенсибілізації до складових частин вугільно - породного пилу Сутність способу ранньої діагностики сенсибілізації організму шахтарів до вугільно - породного пилу полягає в тому, що у шахтаря здійснюють забір венозної крові, дослідження її в реакції імунолейколіза і визначення ступеню сенсибілізації до складових частин вугільно - породного пилу за КІЛЬКІСТЮ ушкоджених лейкоцитів з використанням специфічного гаптену Новим у заяві є те, що реакцію імунолейколіза проводять з використанням специфічного гаптена, виготовленого з вугільно породного пилу, що дозволяє виявити алерпзацію організму шахтарів до складових частин вугільно - породного пилу і при виявленні більш ніж 20% ушкоджених лейкоцитів 50654 дозволяє судити про наявність сенсибілізації до елементів вугільно - породного пилу на ранніх стадіях розвитку алергічних захворювань Реалізують спосіб наступним чином здійснюють забір крові з периферичної вени, досліджують кров хворого алергічним ринітом у реакції імунолейколіза з гаптеном, виготовленим з вугільно породного пилу, який подрібнюють, готують водяний розчин різної концентрації, фільтрують і відпрацьовують робочу дозу з інтактною кров'ю Кров сенсибілізованого хворого в КІЛЬКОСТІ 0,3 - 0,5мл набирають у пробірку з 0,1 мл 3% тринола В, обережно перемішують і закривають пробками У контрольну пробірку вносять 0,01 мл фізіологічного розчину і 0,08 мл крові Обережно струшують, шкубірують протягом години в термостаті при 37°С Після інкубації пробірки обережно струшують З кожної пробірки відбирають 0,02мл суміші, ретельно перемішують і вносять в ІНШІ пробірки з 0,38мл 3% оцтової кислоти, знову обережно струшують і відбирають пастерівською піпеткою 1 - 2 краплі суміші і ставлять до камери Горяєва У досліджуваній пробірці відбувається лізис сенсибілізованих лейкоцитів при контакті з алергеном У контрольній пробірці лізису немає Підраховують КІЛЬКІСТЬ лейкоцитів у контрольній та досліджуваній пробірках Результат оцінюють стандартно, діагностичне достовірними і клінічне значущими є слабкий, середній і сильний ступені алерпзацм шахтарів, хворих алергічним ринітом до вугільно - породного пилу, що відповідає показникам більш 10% Застосовуваний гаптен - діагаостікум є повноцінним за ХІМІЧНОЮ складовою, електричному заряду компонентів, тобто відповідає стандартам Використовувана в запропонованому способі реакція імунолейколіза є різновидом тесту ППН виконується за більш короткий термін у результаті витрачається менш засобів і матеріалів, є менш трудомісткою Таким чином запропонований спосіб надійний Інформативний простий і доступний у використанні займає менш часу і вимагає забору невеликої КІЛЬКОСТІ крові та дозволяє по КІЛЬКОСТІ ушкоджених лейкоцитів під дією специфічного гапгена в крові сенсибілізованого хворого при постановці реакції імунолейколіза вірогідно встановити наявність сенсибілізації до складових частин вугільно - породного пилу Виявлена нами сенсибілізація до вільно породного пилу у більш ніж 60% обстежених шахтарів свідчить про клінічну значимість даної сенсибілізації організму шахтарів хворих алергічним ринітом і дозволяє виділи групу хворих, у яких у виникненні формуванні хронізації захворювання значна роль належить вугільно - породному пилу, який пошкоджує слизову оболонку порожнини носа з порушенням функції миготливого епітелію Це дає можливість виявляти схильність до алергічних реакцій на компоненти вугільно-породного пилу при проведеннії професійною огляду визначити ступінь тяжкості алергічних захворювань у шахтарів контролювали ефективність проведеної терапії і профілактики розвитку більш важких алергічних захворювань, тому числі бронхіальної астми Комплексне алергологічне обстеження шахтарів, хворих алергічним ринітом, проведене на базі Донецького Державного медичного університету, виявило середній і сильний ступень алерпзацм даних хворих до вугільною породною пилу Наводимо приклади конкретного виконання способу Приклад 1 Хворий Ковтун С П, 1946р н стаж роботи в шахті 20 років, поступив до терапевтичного відділення ОЛПХ з скаргами на утруднення носового подиху що підсилюється навесні, часта нежить кашель При риноскопії визначалося збільшення в обсязі нижніх носових раковин, синюшний ВІДТІНОК слизової оболонки При заборі венозної крові, дослідженні и в реакції імунолейколіза з специфічним гаптеном виявлений середній ступінь (більш 20 ВІДСОТКІВ ушкодженних лімфоцитів) алерпзацм до вугільне - породного пилу Приклад 2 Хворий Оганесян Р Х , 1938р н, поступив до терапевтичного відділення ОЛПХ з скаргами на періодичне утруднення носового подиху, що супроводжується ринореей, сльозотечею, що виникає влітку, часті респіраторні інфекції При риноскопи виявлені ознаки алергічного риніту, в аналізі крові еозшофілія до 7 При заборі венозної крові, дослідженні м в реакції імунолейколіза зі специфічним гаптеном виявлений середній ступінь (більш 20 ВІДСОТКІВ ушкодженних лімфоцитів) алерпзацм до вугльно - породного пилу Приклад 3 Хворий Коваль О Н , 1941 р н , поступив до терапевтичного відділення ОЛПХ з скаргами на утруднення носового подиху, що підсилю 50654 ється навесні, часта нежить, кашель При риноскопії визначалося збільшення в обсязі нижніх носових раковин, синюшний ВІДТІНОК слизуватої оболонки При заборі венозної крові, дослідженні м в реакції імунолейколіза з специфічним гаптеном виявлений високий ступінь (більш 40 ВІДСОТКІВ ушкодженних лімфоцитів) алерпзацм до вугільно породного пилу Перевага заявленого винаходу складається в можливості здійснення достовірної ранньої діагностики алерпзацм вугільно - породним пилом шахтарів, хворих алергічним ринітом і оцінки и простим, економічним експресним методом, що легко може бути впроваджений у клінічну практику Виявлення високого ступеню сенсибілізації до вугільно породного пилу у частини шахтарів, що страждають алергічним ринітом дозволяє диференційовано проводити профотбор, етюпатогенетичне лікування, запобігати генералізації процесу, розвитку бронхіальної астми у шахтарів з алергічним ринітом Література 1 М С Плужников, Г В Лавренова Воспалительные и аллергические заболевания носа и околоносовых пазух - К , Здоровье, 1990 , стр 54 2 С В Морозова, Л М Лодинова Диагностика бактериальной аллергии у больных с заболеваниями носа и околоносовых пазух -Вешшк отоларингологии, 1990г, № 6, стр 22 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71