Спосіб діагностики схильності до виникнення системних хвороб сполучної тканини із переважним ураженням шкіри

Спосіб діагностики схильності до виникнення системних хвороб сполучної тканини із переважним ураженням шкіри, який включає визначення поліморфізму генів, який відрізняється тим, що визначають поліморфізм гена SPINK-5 1458A/G і, у випадку генотипу АА, визначають підвищену схильність до системних захворювань сполучної тканини - склеродермії або червоного вовчака, а у випадку генотипу AG - лише склеродермії. (19) (21) u201001529 (22) 15.02.2010 (24) 26.07.2010 (46) 26.07.2010, Бюл.№ 14, 2010 р. (72) БІЛОЗОРОВ ОЛЕКСІЙ ПАВЛОВИЧ, САВЕНКОВА ВІКТОРІЯ ВОЛОДИМИРІВНА, ЗУЄВА МАРІЯ ІГОРІВНА, ВАСИЛЬЧЕНКО ВАЛЕРІЙ МИКОЛАЙОВИЧ, БІЛОЗОРОВА ОЛЬГА ОЛЕКСІЇВНА (73) ДЕРЖАВНА УСТАНОВА "ІНСТИТУТ ДЕРМАТОЛОГІЇ ТА ВЕНЕРОЛОГІЇ АКАДЕМІЇ МЕДИЧНИХ НАУК УКРАЇНИ" 3 В основу корисної моделі покладено задачу розширення арсеналу способів діагностики схильності до виникнення системних хвороб сполучної тканини із переважним ураженням шкіри. Задачу, яку покладено в основу корисної моделі, вирішують тим, що у відомому способі діагностики схильності до виникнення системних хвороб сполучної тканини із переважним ураженням шкіри шляхом оцінки поліморфізму генів, згідно з корисною моделлю, визначають поліморфізм гена SPINK-5 1458A/G і, у випадку наявності генотипу АА, визначають підвищену схильність до системних захворювань сполучної тканини із переважним ураженням шкіри - склеродермії або червоного вовчака, а у випадку наявності генотипу AG - лише склеродермії. Технічний ефект корисної моделі обумовлений властивостями, гена SPINK-5. Ген SPINK-5 (синоніми: NETS, LEKTI, VAKTI, FLJ21544), що знаходиться у хромосомі 5q та кодує інгібітор серинових протеаз, відноситься до класу регуляторних генів. Продукт даного гену, інгібітор протеаз LEKTI, відіграє важливу роль у різноманітних морфофізіологічних процесах в організмі: бере участь у протизапальних та антимікробних процесах (імуносупресорні функції, диференціювання Тлімфоцитів та ін.), контролює диференціювання епітелію, контролює організацію міжклітинного матриксу, регулює ангіогенез та клітинну адгезію [Godic A, Dragos V. Successful treatment of Netherton's syndrome with topical calcipotriol. // Europ. J. Dermatol. - 2004. - Vol. 14, № 1. - P. 115117.; Kabesch M., Carr D.,Weiland S.K., von Mutius E. Association between polymorphisms in serine protease inhibitor, kazal type 5 and asthma phenotypes in a large German population sample // Clin Exp Allergy. - 2004. - Vol. 34, № 2. - P. 340345.]. Враховуючі дані функції гену SPINK-5, його обрано для визначення схильності до системних хвороб сполучної тканини із переважним ураженням шкіри. Спосіб діагностики схильності до виникнення обмеженої склеродермії та хронічного червоного вовчака здійснюють таким чином. Проводять виділення ДНК з лейкоцитів периферичної крові фенольним методом, після чого визначають поліморфізм гена SPINK-5 1258A/G. Для цього можна використовувати аналіз поліморфізму довжин рестрикційних фрагментів (ПДРФ) або інший метод. Якщо використовується ПДРФ, то проводять ампліфікацію фрагменту 14 екзону гену SPINK-5, обробляють отримані амплікони рестриктазою HphI, піддають отримані фрагменти електрофорезу в гелі агарози і за характером електрофоретичної картини визначають генотип. Ефективність способу ілюструють наступні приклади його клінічного застосування: Приклад 1. Хворий А., 34 роки. Діагноз - обмежена склеродермія. Хворому було проведено генотипування на поліморфізм гену SPINK-5 та виявлено генотип AG, який свідчить про те, що пацієнт є носієм алелі А, яка зумовлює схильність до розвитку системних хвороб сполучної тканини, зокрема, обмеженої 51690 4 склеродермії, та може передати цю алель своїм дітям. За проханням хворого його сину К., 18 років, для визначення схильності до виникнення захворювань сполучної тканини із переважним ураженням шкіри було проведено генотипування на поліморфізм гена SPINK-5 1458A/G. У результаті дослідження було виявлено генотип АА, у якому була наявна алель А, що пов'язана зі схильністю до обмеженої склеродермії. При детальному клінічному дослідженні шкіри було виявлено що хворий не переносить продовжене перебування на відкритому повітрі з підвищеною, або зниженою температурою, а також дію сонячних променів. У пацієнта спостерігається себорейний дерматит. Все разом свідчить про наявність у хворого підвищеної чутливості до дії факторів зовнішнього середовища і можливість підвищеного ризику розвитку системних хвороб сполучної тканини із переважним ураженням шкіри. Тому сину був рекомендований комплекс профілактичних заходів для попередження розвитку автоімунного захворювання, що включає: рекомендації уникати таких факторів ризику, як переохолодження, інсоляція, вібрація, дія хімічних агентів, у тому числі запобігання контакту з кремнієм та ін.; щорічно проходити медичні огляди за місцем проживання; при лікуванні попереджати медичний персонал про можливий розвиток автоімунного процесу для раціонального призначення імунозмінюючої терапії; прийом полівітамінів, препаратів, що впливають на гомеостаз, мікроелементів, зокрема магнію; дотримання раціонального режиму праці та відпочинку. Приклад 2. Хворий К., 54 роки. Діагноз - дискоїдний червоний вовчак. Хворому було проведено генотипування на поліморфізм гена SPINK-5 1458A/G та визначено генотип AG, який свідчить про те, що пацієнт є носієм алелі А, що зумовлює схильність до розвитку обмеженої склеродермії та може передати цю алель своїм дітям. На прохання хворого його двом донькам було проведено генотипування на поліморфізм гена SPINK-5 1458A/G для визначення схильності до виникнення захворювань сполучної тканини із переважним ураженням шкіри. У результаті дослідження у пацієнтки А., 25 років, було виявлено генотип АА, у якому була наявна алель А, що пов'язана зі схильністю до виникнення системних хвороб сполучної тканини. При клінічному дослідженні хвора відзначала непереносимість продовженого перебування на сонці, постійне відчуття охолодження кінцівок, пацієнтка працює в умовах з підвищеною температурою, у хворої спостерігається розацеа. Вказані деталі характеризують неблагоприятні ознаки, що можуть свідчити про підвищений ризик розвитку аутоімунних захворювань з переважним ураженням шкіри. Тому доньці був рекомендований комплекс профілактичних заходів для попередження розвитку автоімунного захворювання, що включає: рекомендації уникати таких факторів ризику, як переохолодження, інсоляція, вібрація, дія хімічних 5 51690 агентів; щорічно проходити медичні огляди за місцем проживання; при лікуванні попереджати медичний персонал про можливий розвиток автоімунного процесу для раціонального призначення імунозмінюючої терапії та естрогенів; прийом полівітамінів і препаратів, що впливають на гомеостаз, мікроелементів, зокрема магнію; дотримання раціонального режиму праці та відпочинку. У результаті дослідження у пацієнтки М., 27 років, було виявлено генотип GG, при наявності Комп’ютерна верстка А. Крижанівський 6 якого значно знижується ризик розвитку системних захворювань сполучної тканини. При клінічному дослідженні з боку шкіри та інших органів і систем патологічних змін не виявлено. Однак рекомендовано: уникати таких факторів впливу, як переохолодження, інсоляція, дія хімічно активних агентів; прийом полівітамінів і мікроелементів, зокрема магнію; дотримання раціонального режиму праці та відпочинку. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601