Спосіб одержання поверхнево-активних речовин

Спосіб одержання поверхнево-активних речовин, що включає культивування Acinetobacter calcoaceticus ІMB В-7241 на рідкому середовищі, що містить етанол, мінеральні солі і сечовину як джерело азотного живлення, який відрізняється тим, що концентрація сечовини у середовищі становить 0,29-0,31 г/л, а співвідношення C/N - 56-60. (19) (21) u201003193 (22) 19.03.2010 (24) 27.09.2010 (46) 27.09.2010, Бюл.№ 18, 2010 р. (72) ПИРОГ ТЕТЯНА ПАВЛІВНА, АНТОНЮК СВІТЛАНА ІГОРІВНА, ЩЕРБИНА ОЛЕКСІЙ ВІТАЛІЙОВИЧ (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ХАРЧОВИХ ТЕХНОЛОГІЙ 3 53110 використовують етанол у концентрації 2 % (об'ємна частка). Як посівний матеріал використовують культуру A. calcoaceticus ІMB В-7241 з середини експоненційної фази (40-44 год росту), вирощену на рідкому середовищі з 0,5 % (об'ємна частка) етанолу. Кількість посівного матеріалу становить 5 % від об'єму середовища. Культивування здійснюють у колбах об'ємом 750 мл з 100 мл середовища на качалці (320 об/хв) при 30 °С упродовж 120 год. Використання нового способу дає змогу підвищити до 4,2 умовну концентрацію поверхневоактивних речовин. Приклад 1. Синтез ПАР залежно від концентрації сечовини у середовищі культивування A. calcoaceticus ІMB В-7241 Культивування A. calcoaceticus ІMB В-7241 здійснюють на рідкому мінеральному середовищі такого складу (г/л): NaCl - 1,0; Na2HPO4 - 0,6; KН2РО4 - 0,14; MgSO4 7H2O - 0,1; FeSO4 7H2O 0,001, pH 6,8-7,0. Як джерело азотного живлення використовують сечовину у концентрації 0,25-0,60 г/л. Як джерело вуглецю і енергії використовують етанол у концентрації 2 % (об'ємна частка). Як посівний матеріал використовують культуру A calcoaceticus ІМВ В-7241 з середини (40-44 год) експоненційної фази, вирощену на рідкому середовищі з 0,5 % (об'ємна частка) етанолу. Концентрація посівного матеріалу становить 5 % від об'єму середовища. Культивування здійснюють у кол 4 колбах об'ємом 750 мл з 100 мл середовища на качалці (320 об/хв) при 30 °С упродовж 120 год. Синтез ПАР оцінюють за показником умовної концентрації ПАР, яку визначають як ступінь розведення вільної від клітин культуральної рідини у точці збільшення поверхневого натягу на кривій залежності поверхневого натягу від значення розведень. Абсциса точки перетину кривої відповідає значенню умовної концентрації ПАР та виражається в безрозмірних одиницях. Як критерій оцінки синтезу ПАР використовують також індекс емульгування, який визначають через 24 год як величину відношення висоти шару емульсії до загальної висоти рідини у пробірці і виражають у процентах. Як субстрат для емульгування використовують соняшникову олію. Індекс емульгування визначають для культуральної рідини, розведеної дистильованою водою у 50 раз. Показники синтезу ПАР залежно від концентрації сечовини у середовищі культивування A. calcoaceticus ІМВ В-7241 наведено у табл. 1. Як свідчать дані, наведені у табл. 1, за зниження концентрації сечовини у середовищі показник умовної концентрації ПАР підвищується порівняно з прототипом. Проте слід зазначити, що за зниження концентрації сечовини у середовищі культивування змінюється і співвідношення вуглець/азот, значення якого також впливає на показники синтезу ПАР. Тому на наступному етапі визначали оптимальне для ПАР значення C/N. Таблиця 1 Залежність синтезу ПАР від концентрації сечовини у середовищі культивування A. calcoaceticus ІМВ В-7241 Концентрація сечовини, г/л 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 0,55 0,60 ПАР* 4,0 4,2 4,1 4,0 4,0 3,9 3,9 3,8 Показники синтезу ПАР Індекс емульгування розведеної у 50 разів культуральної рідини, % 90 90 88 89 89 90 90 80 Приклад 2. Вплив співвідношення C/N у середовищі культивування A. calcoaceticus ІМВ В-7241 на синтез ПАР Культивування A. calcoaceticus ІМВ В-7241 здійснюють на рідкому мінеральному середовищі наведеного вище складу. Концентрація сечовини становить 0,28-0,36 г/л, а співвідношення C/N - 5064. Як джерело вуглецю і енергії використовують етанол у концентрації 2 і 3 % (об'ємна частка). Як посівний матеріал використовують культуру A. calcoaceticus ІМВ В-7241 з середини (40-44 год) експоненційної фази, вирощену на рідкому сере довищі з 0,5 % (об'ємна частка) етанолу. Концентрація посівного матеріалу становить 5 % від об'єму середовища. Культивування здійснюють у колбах об'ємом 750 мл з 100 мл середовища на качалці (320 об/хв) при 30 °С упродовж 120 год. Показники синтезу поверхнево-активних речовин A. calcoaceticus ІМВ В-7241 залежно від співвідношення вуглець/азот у середовищі наведено у табл. 2. З даних, наведених у табл. 2, видно, що за співвідношення C/N 56-60 показник умовної концентрації ПАР є найвищим. 5 53110 6 Таблиця 2 Вплив співвідношення C/N у середовищі культивування A. calcoaceticus ІМВ В-7241 на синтез ПАР Співвідношення C/N 50 56 60 64 Концентрація сечовини, г/л Концентрація етанолу, % 0,36 2 0,54 3 0,31 2 0,47 3 0,29 2 0,44 3 0,28 2 0,42 3 Таким чином, зниження концентрації сечовини у середовищі культивування A. calcoaceticus ІМВ В-7241 до 0,29-0,31 г/л і підтримання співвідношення C/N у межах 56-60 супроводжується підвищенням синтезу поверхнево-активних речовин. Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко ПАР* 4,1 3,8 4,2 3,9 4,2 3,9 4,0 3,7 Отже, використання запропонованого способу дає змогу підвищити умовну концентрацію поверхнево-активних речовин до 4,2. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601