Спосіб одержання поверхнево-активних речовин

Спосіб одержання поверхнево-активних речовин, що включає культивування Rhodococcus erythropolis EK-1 на рідкому середовищі, що містить мінеральні солі і джерело вуглецю і енергії, який відрізняється тим, що як джерело вуглецю і енергії використовують етанол у концентрації 1,82,0%. (19) (21) u200803305 (22) 17.03.2008 (46) 25.06.2008, Бюл.№ 12, 2008 р. (72) ПИРОГ ТЕТЯНА ПАВЛІВНА, UA, ТАРАСЕНКО ДМИТРО ОЛЕКСАНДРОВИЧ, UA (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ХАРЧОВИХ ТЕХНОЛОГІЙ, UA 3 33569 кість посівного матеріалу становить 5% від об'єму середовища. Культивування здійснюють у колбах об'ємом 750мл з 100мл середовища на качалці (320об/хв) при 30°С, рН6,8-7,0 упродовж 120год. Використання нового способу дає змогу скоротити тривалість культивування (зі 168 до 120год) і знизити вартість поживного середовища. Приклад 1 Залежність синтезу ПАР від природи джерела вуглецевого живлення у середовищі культивування R. erythropolis EK-1. Культивування R. erythropolis EK-1 здійснюють на рідкому мінеральному середовищі наведеного вище складу. Як джерело вуглецю і енергії використовують гексадекан у концентрації 2% (об'ємна частка) і етанол у концентрації 2,0% (об'ємна частка). Як посівний матеріал використовують культуру R. erythropolis ЕК-1 з середини експоненційної фази (44-48год росту), вирощену на рідкому середовищі з 1,0% (об'ємна частка) етанолу або гексаде 4 кану. Концентрація посівного матеріалу становить 5% від об'єму середовища. Культивування здійснюють у колбах об'ємом 750мл з 100мл середовища на качалці (320об/хв) при 30°С, рН 6,8-7,0 упродовж 168год. Синтез ПАР оцінюють за такими показниками: умовна концентрація ПАР (ПАР*) і індекс емульгування (Е24) розбавленої у 50 разів культуральної рідини. Як субстрат для емульгування використовують соняшникову олію. Умовну концентрацію ПАР визначають як ступінь розведення вільної від клітин культуральної рідини у точці збільшення поверхневого натягу на кривій залежності поверхневого натягу від логарифму значення розведень. Абсциса точки перетину кривої відповідає значенню умовної концентрації ПАР та виражається в безрозмірних одиницях. Показники синтезу ПАР залежно від природи ростового субстрату у середовищі культивування наведено у табл. 1. Таблиця 1 Вплив природи джерела вуглецю і енергії у середовищі культивування R. erythropolis ЕК-1 на синтез ПАР Джерело вуглецю і енергії Етанол, 2,0% Гексадекан, 2,0% Отже, незалежно від природи джерела вуглецю і енергії у середовищі культивування R. erythropolis ЕК-1 показники синтезу ПАР є практично однаковими. Проте слід зазначити, що вартість 1л етанолу майже у 10 раз нижча порівняно з гексадеканом (30 і 250-300 гривень відповідно). Таким чином, використання етанолу як джерела вуглецевого живлення дає змогу суттєво зменшити витрати на приготування поживного середови Показники синтезу ПАР ПАР* 3,4 3,4 Е24, % 60 40 ща і, отже, знизити собівартість кінцевого продукту. Приклад 2 Вплив концентрації етанолу на синтезу ПАР R. Erythropolis ЕК-1. Культивування R. erythropolis ЕК-1 здійснюють в умовах, описаних вище. Концентрація етанолу у середовищі становить, % (об'ємна частка): 1,5; 1,8; 2,0; 2,2; 2,5. Рівень синтезу поверхнево-активних речовин R. erythropolis ЕК-1 наведено у табл. 2. Таблиця 2 Залежність синтезу поверхнево-активних речовин Rhodococcus erythropolis ЕК-1 від концентрації етанолу Концентрація етанолу, % 1,5 1,8 2,0 2,2 2,5 Показники синтезу ПАР є найвищими за концентрації етанолу у середовищі 1,8-2,0. При подальшому підвищенні концентрації субстрату не спостерігали збільшення показників умовної концентрації ПАР і індексу емульгування. Приклад 3 Залежність синтезу ПАР від тривалості культивування R. erythropolis ЕК-1. ПАР* 3,0 3,35 3,4 3,35 3,3 Е24, % 57 62 60 55 55 Культивування R. erythropolis ЕК-1 здійснюють в умовах, описаних вище. Як джерело вуглецю і енергії використовують гексадекан у концентрації 2% (об'ємна частка) і етанол у концентрації 2,0% (об'ємна частка). Тривалість культивування становить 120 і 168год. Рівень синтезу поверхнево-активних речовин R. erythropolis ЕК-1 за таких умов культивування наведено у табл. 3. 5 33569 6 Таблиця 3 Вплив тривалості культивування Rhodococcus erythropolis ЕК-1 на синтез ПАР Джерело вуглецевого живлення Гексадекан, 2,0% Етанол, 2,0% Тривалість культивування, год 120 168 120 168 Таким чином, під час культивування R. erythropolis EK-1 на етанолі умовна концентрація ПАР досягає найвищого значення (3,4) на 120год культивування. Комп’ютерна верстка О. Рябко ПАР* 2,3 3,4 3,4 3,4 Отже, використання запропонованого способу дає змогу скоротити (зі 168 до 120год) тривалість культивування продуцента і знизити витрати на приготування поживного середовища в результаті заміни гексадекану на дешевший субстрат етанол. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601