Спосіб моделювання гідрофобного генератора автоколивань макромолекул живої системи

Спосіб моделювання гідрофобного генератора автоколивань макромолекул живої системи, що включає відтворення умов взаємодії ліофобного середовища із макромолекулами живої системи, який відрізняється тим, що реакцію у ліофобному середовищі здійснюють між ізольованою колонією мікроорганізмів і молекулами нанесеного на паперовий диск антибіотика в присутності ізольованих лейкоцитів нативної крові, а результат оцінюють за динамікою автоколивальних рухів мікробної колонії в мікропрепараті під мікроскопом. (19) (21) u201004841 (22) 22.04.2010 (24) 25.10.2010 (46) 25.10.2010, Бюл.№ 20, 2010 р. (72) ДЕМ'ЯНЕНКО ВАСИЛЬ ВАСИЛЬОВИЧ, ПОКРИШКО ОЛЕНА ВОЛОДИМИРІВНА, САВЧИШИН ВАСИЛЬ ВОЛОДИМИРОВИЧ, БІЛОУС АЛЛА ПАВЛІВНА, БОГУН МАРІЯ ІГОРІВНА (73) ТЕРНОПІЛЬСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ І.Я. ГОРБАЧЕВСЬКОГО 3 антибіотика в присутності ізольованих лейкоцитів нативної крові, а результат оцінюють за динамікою автоколивальних рухів мікробної колонії в мікропрепараті під мікроскопом. Перелік фігур. Фіг.1. Схема розміщення інгредієнтів при відтворенні автоколивального процесу в мікропрепараті: 1 - предметне скло 2 - силіконова підложка 3 - колонія мікроорганізмів 4 - промотаний антибіотиком паперовий диск 5 - мікрокраплина нативної крові. Фіг.2. Окремі фази автоколивальних рухів мікробної колонії у полі зору поляризаційного мікроскопу. МС-200: об.х4; ок.х20. Спосіб здійснюють наступним чином. На предметне скло наносять тонкий шар ліофобного середовища - силіконового компаунду і витримують 30хв для утворення внаслідок полімеризації еластичної плівки. На останню обережно переносять колонію мікроорганізму, яку вирощено попередньо на твердому живильному середовищі, після чого біля колонії з одного краю укладають паперовий кружок, просотаний антибіотиком для проведення стандартної проби на чутливість до нього мікроорганізмів, а з іншого краю колонії впритул вносять 20мкл нативної крові (Фіг.1). Через 24год мікропрепарат досліджують у полі зору мікроскопу за методом поляризованої флуоресценції. Спостерігають за амплітудою, частотою та іншими особливостями руху інгредієнтів у мікропрепараті. Висновок про наявність автоколивального процесу макромолекул живої системи роблять за результатами візуального зіставлення рухів мікробної колонії у дослідному і контрольному (без внесення мікроорганізмів) препаратах. Приклад 1 Тонкий шар силіконового компаунду нанесли на предметне скло і витримали 30хв до утворення полімерної еластичної плівки, на поверхню якої обережно перенесли колонію Staphylococcus aureus ATCC 6538, вирощену попередньо на твердому живильному середовищі. Після цього впритул по краю колонії з одного боку уклали стандартний паперовий диск, просотаний пеніциліном. З іншого краю колонії впритул нашарували 20мкл нативної крові у вигляді мікрокраплі (Фіг.1). Через 24год мікропрепарат досліджували в полі зору мікроскопу за методом поляризованої флуоресце 54039 4 нції, ведучи спостереження за амплітудою, частотою та іншими проявами руху інгредієнтів у мікропрепараті. При цьому спостерігали інтенсивний коливальний рух нанесеної на силікон колонії мікроорганізму відносно краплини крові і паперового диску з антибіотиком. Періодичність самовільного руху колонії у тривимірному просторі у вигляді ритмічних переміщень у площині мікропрепарату, підйомів і опускань (Фіг.2) здійснювалися за закономірностями автоколивального процесу, індукованого фізичними силами гідрофобної взаємодії силіконового компаунду із макромолекулами водовмісних інгредієнтів. Приклад 2 За наведеним способом спостерігали за появою автоколивального процесу в колоніях інших мікроорганізмів, наприклад, кишечної і синьогнійної паличок та ін. Взаємодія взятих у дослід інгредієнтів без використання силіконового-ліофобного субстрату, наприклад, на предметному склі, у жодному випадку не супроводжувалася описаним механо-біологічним ефектом у вигляді автоколивальних рухів мікробних колоній. Отже, для збурення автоколивального процесу обов'язковою є гідрофобна взаємодія водовмісних сполук, тобто у присутності молекул ліофобного, в даному випадку - силіконового компаунду. Таким чином, запропонований спосіб, значно інформативніше, ніж за способом-прототипом, відображає ритмічні рухи взятої в дослідження системи як прояв автоколивального процесу, і може бути використаний як базова модель автоактивації молекул біологічно активних сполук для вирішення актуальних завдань теоретичної, експериментальної і практичної біології і медицини. Джерела інформації, якіслід взяти до уваги: 1. Пат. 42790 UA. Спосіб лабораторної діагностики жирової емболії / Кулянда І.С., Дем'яненко В.В., Савчишин В.В. - №u200815284 від 30.12.2008; опубл. 27.07.2009; Бюл. №14. 2. Пат. 42808 UA. Спосіб моделювання електромагнітної взаємодії в системах міжклітинного взаємозв'язку / Дем'яненко В.В., Покришко О.В., Бігуняк А.В. - №u200900455 від 22.01.2009; опубл. 27.07.2009; Бюл. №14. 3. Пчелин В.А. Гидрофобные взаимодействия в дисперсных системах, М., 1976. 4. Яминский В.В. Коагуляционные контакты в дисперсных системах, М., 1982. 5 Комп’ютерна верстка А. Рябко 54039 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601