Спосіб моделювання взаємодії живих клітинних структур із волокнами біополімерної природи

Спосіб моделювання взаємодії живих клітинних структур із волокнами біополімерної природи, що включає етап інкубації вказаних інгредієнтів з 3 рують за методикою поляризованої флуоресценції. Спосіб здійснюють наступним чином. На предметне скло вміщують обрізки шовкових волокон довжиною від 5 до 10мм при товщині від 0,05мм до 0,10мм включно, покривають силіконовою плівкою товщиною від 1 до 1,5мм включно. На поверхню останньої вносять декілька волокнистих особин грибка слизньовика із родини Dictyostelium discoideum та інкубують упродовж 60-90 діб в умовах вологого середовища. Мікропрепарат досліджують у полі зору люмінесцентного мікроскопу за методикою поляризованої флуоресценції. Звертають увагу на зміни структури шовкових волокон, індукованих присутністю живих волокнистих особин грибка слизньовика. Перелік фігур. Фіг.1. Поляризована флуоресценція інтактних шовкових волокон у мікропрепараті (контроль). Поляризаційний мікроскоп МС 200: об.х4; ок.х20. Фіг.2. Поліморфність структури і поліхромне світіння окремих шовкових волокон у мікропрепараті за присутності грибка слизньовика. Поляризована флуоресценція. МС 200: об.х10; ок.х20. Фіг.3. Розволокнення торців шовкових волокон у місці обрізки, осьові перекручування і поперечні перехвати. Поляризована флуоресценція. МС 200: об.х10; ок.х20. Фіг.4. Індукована грибком клубкоподібна зшивка шовкових волокон. Поляризоваана флуоресценція. МС 200: об.х10; ок.х20. Приклад 1 На предметному склі розмістили шовкові волокна довжиною 5-10мм при товщині 0,05мм і покрили їх шаром силіконового компаунду з утворенням плівки товщиною 1-1,5мм. На поверхню силіконової плівки помістили декілька волокнистих особин грибка слизньовика родини Dictyostelium discoideum із культури. Мікропрепарат інкубували впродовж двох з половиною місяців в умовах вологого середовища і досліджували методом поляризованої флуоресценції. Спостерігали розвиток різних за структуральними особливостями особин грибка слизньовика та вплив їх на зовнішній вигляд (форму і характер флуоресценції) шовкових волокон. Так, на відміну від однорідно поліхромних, правильної циліндричної форми інтактних волокон шовку (Фіг.1), присутність волокнистих особин грибка супроводжувалося появою в мікропрепараті поліморфних шовкових волокон (Фіг.2, внизу) з притаманною їм поліхромією внутрішньо волоконних утворів. 54298 4 Приклад 2 За запропонованим способом досліджували взаємодію шовкових волокон із грибком слизньовиком, отриманим при спонтанному пророщенні на силіконовому компаунді (а не взятому із культури). При цьому реєстрували зміни структури шовкових волокон у вигляді поперечних перехватів, осьових перекручень і клубкоподібних зшивок окремих шовкових волокон (Фіг.3). Характерними виявилися розволокнення торцевих закінчень цих волокон у місці обрізки (Фіг.4), подібно до живих волокнистих особин. Наведений приклад є відображенням активної інвазії макромолекулярних структур грибка у стінку і товщу шовкових волокон, а отже засвідчує агресивний «каннібалістичний» характер відношення грибка слизньовика до полімерних волокон іншого походження, що може розглядатися як адекватна модель принципових ознак мікологічного епідеміологічного процесу. Отже, запропонований спосіб забезпечує вищий, ніж за відомим способом-прототипом, рівень інформативності експериментальної моделі взаємодії живих клітинних структур із волокнами полімерної природи, що може бути використано при дослідженні закономірностей епідеміології мікологічного процесу, а також в системах контролю за мікологічною чистотою біотехнологічних процесів у різних галузях народного господарства. Джерела інформації, які слід взяти до уваги: 1. Пат. 66250 А, Україна. G09В23/28, С08G69/40, С08G77/04. Спосіб моделювання процесу слабої взаємодії на основі реакції живих клітин з алогенним субстратом / Дем'яненко В.В., Бігуняк В.В. - №2003098279; 08.09.2003; Опубл. 15.04.2004; Бюл. №4. 2. Hall A., Franke J., Faure M., Kessin R., The role of the cyclic nucleotide phosphodiesterase of Dictyostelium discoideum during growth, aggregation, and morphogenesis: overexpression and localization studies with the separate promoters ofthepde. DevBiol. 1993, 157, 73-84. 3. Himmel M., Van Der Ven P., Stocklein W., Furst D., The limits of promiscuity: isoformspecific dimerization of filamins. Biochemistry. - 2003, 42. 430-439. 4. Functional studies of phototaxis in Dictyostelium discoideum / Mutants inauguraldissertation zur Erlangung des Doktorgrades der Mathematisch-Naturwissenschaftlichen Fakultat der Universitat zu Koln vorgelegt von Nandkumar Krishna Khaire aus Solapur. - Indien, 2003. - 103p. 5 Комп’ютерна верстка А. Рябко 54298 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601