Спосіб оцінки ступеня дезадаптації підлітків

Спосіб визначення рівня адаптації ПІДЛІТКІВ шляхом дослідження зразків поту, який відрізняється тим, що методом газової хроматографії визначають вміст есенціальних жирних кислот, розраховують співвідношення кожної кислоти до суми поліненасичених жирних кислот і при підвищенні отриманих показників у порівнянні з контролем, визначають ступінь дезадаптації Заявл 25 03 1999, Опубл 15 02 2001, Бюл №1 Зс) Однак цей спосіб досить трудомісткий, потребує спеціального обладнання для взяття аналізу та підготовки проб, незручний у використанні Запропонований нами спосіб більш спрощений, швидкий, точніший, може застосовуватися як експресметод, виключає фактор травматичного втручання Найбільш близьким до запропонованого технічного рішення є калориметричний метод, який визначає наступні показники в поті лактат, сечовину, солі сечової кислоти та іони натрію і калію при запаленнях, викликаних стисненням тканин (Taylor R , Polhack A , Bader D Metabolism analyses of human perspiration Analytical methods and possibilities which applying for research process in the cases of ischemia pressure of soA tissue (Анализ метаболитов в поте человека аналитические методы и возможности применения для исследования при ишемическом сжатии мягких тканей) //Annals of Clinical Biochemistry -1994 - Vol 31 -№ 1 - P 18-24) Однак, цей спосіб має суттєві недоліки, він низько інформативний, незручний у використанні, не розкриває кількісної оцінки адаптивного процесу В основі нашого винаходу поставлено завдання визначення ЛІПІДНИХ порушень з метою виявлення ранніх проявів дезадаптаційних розладів у О со сч Ю ю 55230 ПІДЛІТКІВ Завдання досягається тим, що шляхом дослідження поту, за допомогою газової хроматографії визначають наявність есенціальних жирних кислот, їх КІЛЬКІСТЬ, порівнюють з контролем і за рівнем ВІДМІННОСТІ отриманих результатів оцінюють рівень дезадаптаційних порушень стану здоров'я ПІДЛІТКІВ Порівняння запропонованого способу з аналогами та прототипом дозволяє встановити його ВІДПОВІДНІСТЬ критерію „новизна", оскільки вперше для діагностики дезадаптаційних порушень використовується аналіз жирнокислотного спектру ЛІПІДІВ поту Що стосується дотримання критерію „суттєві ВІДМІННОСТІ , можна сказати, що запропонований спосіб розширює перелік біологічних об'єктів для дослідження порушень ЛІПІДНОГО метаболізму і використання в якості досліджуваних зразків неінвазивних середовищ Технічний результат від використання винаходу буде полягати в полегшенні процедури взяття проб та економічної переваги у порівнянні з аналогічним інвазійним методом, своєчасного виявлення і профілактики розвитку дезадаптаційних порушень стану здоров'я ПІДЛІТКІВ, ЩО дасть можливість знизити захворюваність та строки реабілітації Результати запропонованої оцінки представлені в таблиці, Таблиця Найменування ЖК(%) Сума ПНЖК Лшолеваі82 Арахідонова20 4 Коефіцієнт^ 2/пнжк КоефіЦІЄНТ204/ПНЖК контроль п = 25 16,3 ±1,1 4,8 ±1,0 4,5 ±0,5 0,3 0,3 де п - КІЛЬКІСТЬ досліджуваних осіб, ПНЖК полінснасичені жирні кислоти, ЖК - жирні кислоти Спосіб здійснюють таким чином у ПІДЛІТКІВ беруть натощак з пахвини піт за допомогою фільтрів (синя стрічка) Потім підготовку та аналіз поту здійснюють відомим методом газорідинної хроматографії (Андрашко Ю В , Коляденко В Г , Брюзпна Т С , Суліма Г Г Газохроматографічний аналіз ЛІПІДІВ крові та поту у хворих на псоріаз //Медична ХІМІЯ - 2001 - № 2 -С 49-52) Фільтр вмішують у пробірку з притертою пробкою ємністю 10 - 15мл, додають 5 - 7мл хлороформно-метацольної суміші (у відношенні 1 2) і тримають ЗО хвилин в холодильнику при 4°С, потім відбирають піпеткою Пастера нижній хлороформний шар Для повноти реакції етап екстракції хлороформно-метанольною сумішшю повторюють ДВІЧІ Об'єднанні хлороформні екстракти концентрують випарюванням до висихання в потоці азоту при температурі 45°С на водянійібані До сухого осаду ЛІПІДІВ поту додають 5мл 1% H2SO4 в метанолі та переносять розчин у склянку ампулу ємністю Юмл, після запаювання проводять гідроліз і метилювання в термостаті при температурі 85°С протягом 20 хвилин Екстракцію метильованих жирних кислот (ЖК) ЛІПІДІВ поту здійснюють ДВІЧІ гексан-ефірною сумішшю (у співвідношенні 1 1) в об'ємі 5мл ( для розмежування фаз додають 1мл дистильованої води), відбирають піпеткою Пастера верхній шар Об'єднані екстракти випарюють до висихання в потоці азоту при температурі 45°С на водяній бані Сухий осад розчиняють в 40 - 50мкл чистого гексану та вводять у випарювач хроматографах в об'ємі 5мкл Газохроматографічний аналіз спектру жирних кислот ЛІПІДІВ поту здійснюється на газохроматографі серії „Цвет-500" з полум'яно-іонізаційним детектором в ізотермічному режимі за таких умов використовують скляну колонку (розміром 2м * 0,3см), заповнену фазою 5% ПЕГС (полі етиленг І група п = 17 (ле- II група п = 36 (сегка ступінь деза- редня ступінь дедаптації) задаптації) 9,6±07 17,5 ±0,9 4,7 ±0,5 4,2 ±0,3 5,3±06 12,4 ±0,7 0,3 0,3 0,3 0,7 III група п = 17 (важка ступінь дезадаптації) 25,1 ±1,5 3,5 ±0,3 21,2 ±1,5 0,2 13 ліколю сукцинату) на хроматин, N-AW-HMDS (зернистість 0,125 - 0,160мм), температура колонки +187°С, температура випарювання + 250°С, витрати азоту та водню 35мл/хв, повітря - 200мл/хв, швидкість діаграмної стрічки - 240мм/год, чутливість шкали 10А 7 , об'єм проби, яка вводиться 5мкл, тривалість аналізу - 20хв Кількісна оцінка спектру жирних кислот ЛІПІДІВ сироватки проводиться методом нормування площ з визначенням частки кислот у відсотках Похибка визначення ± 10%, Кількісну оцінку спектра жирних кислот ЛІПІДІВ проводять за методом нормування площин і визначають долі кислот в процентах На базі Науково-дослідного інституту проблем військової медицини Збройних Сил України запропонованим способом було обстежено 70 ПІДЛІТКІВ вихованців Київського військового ліцею (експериментальна група) та Київського спортивного інтернату (контрольна група), у переважної більшості ПІДЛІТКІВ було виявлено порушення ЛІПІДНОГО обміну Таким чином, даний метод досить точний для оцінки порушень ЛІПІДНОГО метаболізму при визначенні ступеню адаптації у ПІДЛІТКІВ В процесі навчання Переваги цього методу чутливість газорідинної хроматографії (10 7А), висока інформативність, що дозволяє КІЛЬКІСНО проводити оцінку ступеню порушень, можливість перевірки ЛІПІДНИХ порушень у динаміці, прогнозування подальшого перебігу адаптаційного процесу, постійний контроль реабілітації Література 1 Неинвазивные методы диагностики Тезисы докладов - М , 1995 2 Дислипопротеидемии и ишемическая бо 5 55230 6 лезнь сердца /Под ред ЕЖ Чазова, А Н Климова вания при ишемическом сжатии мягких тканей) - М Медицина, 1980 -312с //Annals of Clinical Biochemistry - 1994 - Vol 31 3 Taylor R, Polhack A, BaderD Metabolism №1 -P 18-24 analyses of human perspiration Analytical methods 4 Андрашко Ю В , Коляденко В Г, Брюзпна and possibilities which applying ibr research process Т С , Суліма Г Г - Газохроматографічний аналіз in the cases of ischemia pressure of soft tissue (АнаЛІПІДІВ крові та поту у хворих на псоріаз //Медична лиз метаболитов в поте человека аналитические ХІМІЯ - 2001 - № 2 - С 49-52 методы! и возможности применения для исследо Підписано до друку 03 04 2003 р Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24