Спосіб відбору форм гречки з високим вмістом рутину у вегетативній масі

Спосіб відбору форм гречки з високим вмістом рутину у вегетативній масі, що включає пророщування гречки, який відрізняється тим, що на ранніх стадіях розвитку проводять візуальну оцінку органів і відбирають рослини з найбільшою інтенсивністю антоціанового забарвлення первинного кореня чи сім'ядольних листків. (19) (21) u201009232 (22) 22.07.2010 (24) 10.02.2011 (46) 10.02.2011, Бюл.№ 3, 2011 р. (72) КОСЯН АНАТОЛІЙ МИХАЙЛОВИЧ (73) КИЇВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ ТАРАСА ШЕВЧЕНКА 3 57113 соким вмістом рутину в органах, для подальшого використання у селекційному процесі. Задача досягається тим, що відбір проводять на ранніх стадіях розвитку рослин по показникам інтенсивності антоціанового забарвлення первинного кореня чи сім'ядольних листків, яку оцінюють візуально, і при цьому вважають, що рослини, які мають більш інтенсивне антоціанове забарвлення органів, є високопродуктивними по рутину формами. Досягнення мети підтверджується експериментальними даними. Приклад 1. У лабораторних умовах, на водяній культурі, пророщують насіння гречки (сорт Рубра). З десятиденних проростків гречки відбирають 5 варіантів зразків з різною інтенсивністю антоціанового (пурпурового) забарвлення поверхні сім'ядольних листків: 4 1. Антоціанове забарвлення поверхні листків відсутнє. 2. Частина нижньої поверхні листків має пурпурове забарвлення. 3. Вся нижня поверхня листків має пурпурове забарвлення. 4. Вся нижня поверхня і частина верхньої поверхні листків має пурпурове забарвлення. 5. Вся нижня і верхня поверхні листків мають пурпурове забарвлення. Повторність досліду п'ятикратна. Результати кількісного аналізу вмісту рутину і антоціанових пігментів у тканинах листків і наявністю пурпурового забарвлення поверхні сім'ядольних листків показують наявність сильного позитивного корелятивного зв'язку між цими показниками, (табл. 1). Таблиця 1. Варіант 1 2 3 4 5 НСР01 Антоціани, мг/г сух. реч. 0,00 0,51 1,32 2,50 4,08 0,12 При збільшенні інтенсивності антоціанового забарвлення поверхні сім'ядольних листків спостерігається пропорційне збільшення вмісту рутину в їх тканинах з 21,0 до 48,8 мг/г сухої речовини. При коефіцієнті кореляції 0,848±0,136. Приклад 2. В лабораторних умовах, на зволоженому фільтрувальному папері, пророщують насіння гречки (сорт Рубра). Відбирають пророслі насінини з пурпуровим забарвленням корінців (дослід), і висаджують їх у вегетаційні посудини для Рутин, мг/г сух. реч. 22,1 21,9 35,6 40,3 47,8 0,24 подальшого дорощування. Як контроль використовують рослини вирощені з пророслого насіння з безбарвними корінцями. Повторність досліду п'ятикратна. Кількісний біохімічний аналіз рослин гречки на стадії початку цвітіння показав, що у тканинах усіх органів зразків відібраних з проростків з пурпуровими корінцями спостерігається значне збільшення вмісту рутину, в порівнянні з контролем, табл. 2. Таблиця 2. Варіант Контроль Дослід НСР01 Стебло 11,5 20,3 2,8 Приклад 3. В умовах польового досліду в підготовлений ґрунт на ізольованих ділянках висівають насіння гречки. На десятий день після посіву, в стадії сім'ядольних листків, проводять візуальну оцінку наявності антоціанових пігментів у листках. Відбирають рослини з найбільшою інтенсивністю пурпурового забарвлення поверхні листків, які і Рутин, мг/г сухої речовини Листки 70,1 122,8 10,4 Суцвіття 80,2 160,3 12,6 залишають на ділянці. Усі інші рослини вибраковують. Аналіз даних представлений у таблиці 3 свідчить про те, що рослини, відібрані за ознакою інтенсивності антоціанового забарвлення листкової поверхні мають високий вміст рутину у вегетативній масі. Таблиця 3. Варіант Контроль Дослід НСР01 Стебло 11,1 29,9 1,7 Рутин, мг/г сухої речовини Листки 55,5 121,8 5,3 Суцвіття 65,5 154,0 11,2 5 57113 Пропонований спосіб дає можливість використовувати його на ранніх стадіях розвитку рослин зі збереженням їх цілісності і життєздатності, для подальшого дорощування виділених форм і отримання насіння. Спосіб дозволяє вести цілеспрямований відбір форм гречки з високим вмістом рутину в органах. Створення сортів гречки з високим вмістом рутину у вегетативній масі здатне забезпечити фармакологічну промисловість дешевою сировиною для отримання цінного фармакологічного препарату з Р-вітамінною активністю. Пропонований спосіб простий у використані, не потребує великих затрат і продуктивний, що дозволяє при великій кількості селекційного матеріалу швидко відокремлювати високопродуктивні форми. Робота може проводитись як у польових, так і лабораторних умовах, упродовж усього року, при дорощувані рослин у зимовий час в умовах захищеного ґрунту, що у свою чергу дозволяє прискорити створення нових сортів. Джерела інформації. 1. Di Carlo G, N. Mascolo, AA Izzo, F. Capasso. Flavonoids: Old and new aspects of a class of natural therapeutic drugs //Life Science. - 1999, 65. - P. 337353. 2. Hollman PC, MB Katan. Dietary flavonoids: Intake, health effects and bioavailability //Food Chemistry Toxicology. - 1999. - 37, 937-942. Комп’ютерна верстка М. Мацело 6 3. Алексеева Е.С, Елагин И.Н., Тараненко Л.К. и др. История культура, ботанические и биологические особенности //Культура гречихи. Часть 1.1 Под ред. Алексеевой Е.С. - Каменец-Подольский, 2005. - 191 с. 4. Cheol Но Park, Yeon Bok Kim, Yong Soon Choi, Kwon Heo, Sun Lim Kim, Ki Cheol Lee, Kwang Jin Chang And Han Bum Lee. Rutin content in food products processed from groats, leaves, and flowers of buckwheat //Fagopyrum. - 2000. - 17. - P. 63-66. 5. Kreft I., K. Fabjan. Rutin content in buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench) food materials and products //Food Chemistry. - 2006. - 98. - P. 508-512. 6. Yu Zhanrong and Li Xiulian. Determination of Rutin Content on Chinese Buckwheat Cultivars //Proceedings of the 10th International symposium on buckwheat, Yangling, Shaanxi, People's Republic of China. - 2007. - P. 465-468. 7. Довженко Л.И., Баландина И.А. Изменчивость содержания рутина у тетраплоидной гречихи //Перспективы повышения урожайности и качества зерна гречихи: Межвуз. сб. науч. ст. Кишинев, 1983. - С. 119-124. 8. Киселев В.Е., Коваленко В.И., Минаева В.Г. и др. Гречиха источник флавоноидов. Новосибирск, Наука, 1985. - С. 699-75. 9. КликовА.Г., Моисеенко Л.М. Способ отбора растений гречихи с високим содержанием рутина в надземой массе. RU 2255466 С2, 27.09.2004. Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601