Спосіб діагностики порушень перекисно-антиоксидантного гомеостазу при захворюваннях підшлункової залози

Спосіб діагностики порушень перекисноантиоксидантного гомеостазу при захворюваннях підшлункової залози, що включає визначення концентрації ТБК-позитивних речовин, супероксиддисмутази та загальної антиоксидантної активності, який відрізняється тим, що визначають концентрацію зазначених речовин у дуоденальному середовищі шляхом проведення фракційного аналізу апарату підшлункової залози у тесті із солянокислим метіоніном [1] Солянокислий метіонін є стимулятором виділення рідкої частини панкреатичного соку, бікарбонатів та усіх видів панкреатичних ферментів Для стимуляції використовують розчин солянокислого метіоніну, який готується ex temроге у співвідношенні 25мг/кг ваги тіла хворого солянокислого метіоніну, що розчиняють у ЗОмл 0,5% розчину соляної кислоти Після евакуації шлункового та дуоденального вмісту крізь двоканальний зонд проводиться штрадуоденальне введення означеного розчину, потім проводиться фазовий аналіз панкреатичної секреції у першій порції (через 20хв), другій порції (через 40хв), та третій порції (через 1 годину) В отриманому секреті визначають активність амілази, трипсіну, ліпази та бікарбонатної лужності Дані дослідження проводять у базальній та в усіх трьох стимульованих порціях, незважаючи на те, що означена методика надає можливість отримання панкреатичного секрету, вона також не дає змогу визначення стану перекисно-антиоксидантного гомеостазу Сучасні уявлення про хронічний запальний процес свідчать про те, що досить інформативними маркерами активності неспецифічного запалення та аутолізує стан перекисноантиоксидантного гомеостазу Процеси перекисного окисленні ЛІПІДІВ (ПОЛ) є специфічним типом ферментативних окислювальних реакцій, що притаманні усім функціональним системам організму людини на клітинному та субклітинному рівні організації У нормі пероксидація со 00 ю 58132 ЛІПІДІВ є фізіологічною реакцією аутолізу, але при різних патологічних процесах, що супроводжуються порушенням ЦІЛОСТНОСТІ біологічних мембран клітин, процеси ПОЛ набувають патологічного характеру, реалізуючись каскадом мембранодеструктивних реакцій, основним субстратом для яких є фосфоліпіди Підтримання реакцій ПОЛ у фізіологічних межах можливо лише за умов рівноваги між прооксидантною та антиоксидантною ланками перекисно-антиоксидантного гомеостазу Пероксидація ЛІПІДІВ бюмембран є універсальною складовою патогенезу різних запальних, дистрофічних та неопластичних процесів Сучасна концепція діагностики стану перекисноантиоксидантного гомеостазу базується на визначенні вторинних та третинних продуктів ПОЛ у різних біологічних середовищах, та визначенні активності ферментів, що мають антиоксидантні властивості (каталаза, супероксидисмутаза, глутатюн-пероксидаза, НАДФ-Н) 3 літератури ВІДОМІ методики визначення концентрації ТБК - позитивних речовин у сироватці крові, визначення супероксиддисмутази та загальної антиокислювальної активності у сироватці крові [2] (прототип) Але означені діагностичні методики не дозволяють адекватно оцінити стан порушень перекисно-антиоксидантного гомеостазу селективне щодо патологічних процесів у підшлунковій залозі Найбільш інформативним інтегральним показником, що відображує інтенсивність процесу пероксидацм ЛІПІДІВ, є концентрація ТБК - позитивних речовин (для визначення яких використовується реакція с тюбарбитуровою кислотою) Одночасно з визначенням недоокислених ЛІПІДНИХ метаболітів повинно проводитись визначення концентрації антиоксидантних ферментів (супероксиддисмутази та загальної антиоксидантної активності) Таким чином, необхідна подальша оптимізація способів діагностики хронічного панкреатиту з урахуванням патонегетичних особливостей даного захворювання У основу винаходу покладена задача удосконалення способу діагностики порушень перекисноантиоксидантного гомеостазу при захворюваннях підшлункової залози, в якому завдяки використанню визначення ТБК - позитивних речовин, супероксиддисмутази, та загальної антиоксидантної активності у дуоденальному середовищі шляхом проведення фракційного аналізу досягається підвищення якості діагностики захворювань підшлункової залози, вірогідності отриманих результатів щодо порушень зовнішньо секреторної функції підшлункової залози, що буде поліпшувати можливості надання лікувально-діагностичної допомоги даному контингенту хворих у лікувальнопрофілактичних закладах України та у свою чергу сприятиме зменшенню інвалідизацм та тимчасової втрати працездатності внаслідок патології підшлункової залози Поставлена задача вирішується тим, що у способі діагностики порушень перекисноантиоксидантного гомеостазу при захворюваннях підшлункової залози, що містить визначення концентрації ТБК - позитивних речовин, супероксиддисмутази та загальної антиоксидантної активності, згідно винаходу, визначають концентрацію означених речовин у дуоденальному середовищі, шляхом проведення фракційного аналізу Значне підвищення інформативності та специфічності діагностики різних нозологічних форм ураження підшлункової залози у методиці, що пропонується досягається саме шляхом застосування визначення концентрації ТБК - позитивних речовин, супероксиддисмутази та загальної антиоксидантної активності у дуоденальному ВМІСТІ при фракційному аналізі після стимуляції панкреатичної секреції солянокислим метіоніном, таким чином, є у наявності причинно-наслідковий зв'язок між суттєвими ознаками, що характеризують винахід, та технічним результатом, який досягається У даній методиці вперше досягається можливість визначення стану перекисноантиоксидантного гомеостазу безпосередньо у дуоденальному ВМІСТІ, таким чином, порушення означених показників встановлюється у панкреатичному та дуоденальному секретах Цим досягається підвищення специфічності методики, так як аналіз стану перекисного окислення ЛІПІДІВ у системному кровообігу (при заборі крові із периферійної вени) не дозволяє проводити чітку паралель між вираженістю патологічних змін у вивчаємому органі або системі та концентрацію ТБК позитивних речовин із антиоксидантними ферментами у сироватці крові, внаслідок того, що процеси пероксидацм ЛІПІДІВ є універсальними в усіх функціональних системах організму, таким чином, при наявності двох та більше вогнищ запального, дистрофічного або некротичного процесів у организм іхворого, інтерпретація результатів дослідження ПОЛ за існуючими методиками не може дати вірогідних результатів, стосовно вивчаємого органу або системи Цей недолік не притаманний у методиці, що пропонується, так як безпосередньо вивчається стан ПОЛ у дуоденальному середовищі, і концентрацію вивчаємих речовин у даному випадку обумовлює лише патологічний процес, локалізований безпосередньо у підшлунковій залозі Слід ВІДМІТИТИ, ЩО дана методика характеризується малоінвазивністю та зручністю використання у практиці лікувально-профілактичних установ завдяки технічній простоті, малому ризику у розвитку ускладнень, безпекою щодо можливості прогресування основного патологічного процесу у підшлунковій залозі Завдяки використанню пропонуємої методики можливо поліпшити діагностику різних видів уражень підшлункової залози, таких, як гострий та хронічний панкреатити, пухлини підшлункової залози, муковісцидоз, що пов'язано з тим, що пероксидація ЛІПІДІВ мембран є складовим елементом патогенезу означених захворювань, причому процеси ПОЛ розвиваються на самих ранніх етапах ураження підшлункової залози, і це, у свою чергу, обумовлює можливість ранньої діагностики Порушення перекисно-антиоксидантного гомеостазу супроводжують усі ланки запального процесу у підшлунковій залозі, причому згідно сучасних даних інтенсивність пероксидацм ЛІПІДІВ мембран відповідає до вираженості та поширеності запалення Також розвиток хронічного прогресуючого дистрофічно-склеротичного ураження 58132 підшлункової залози, що лежить у основі патогенезу хронічного панкреатиту, супроводжуються мембрано-деструктивними процесами у паренхимі підшлункової залози, маркерами яких являються концентрація ТБК - позитивних речовин, та ферментів антиоксидантної ланки Іншою патогеноертичною складовою хронічного панкреатиту є порушення штрапанкреатичної мікроциркуляцм із розвитком тканевої гіпоксії, що є основою для ініціації ПОЛ Таким чином, за допомогою визначення стану перекисно-антиоксидантного гомеостазу у дуоденальному середовищі можливо з високою точністю діагностувати різні патологічні стани у підшлунковій залозі, з можливістю максимально ранньої діагностики Підвищення якості діагностики захворювань підшлункової залози, що буде досягнено за допомогою розробленої діагностичної методики, буде сприяти оптимізацм лікування хворих означеного контингенту Спосіб діагностики хронічного панкреатиту полягає у наступному Перед обстеженням хворому дають жовчогінний сніданок Далі проводять дуоденальне зондування гастродуоденальним полімерним зондом №21 (ГОСТ 15150-69) Проводять аспірація шлункового вмісту Далі проводять забір базальної порції дуоденального вмісту Для стимуляції використовують розчин солянокислого метюнину, який готується ex tempore у співвідношенні 25мг/кг ваги тіла хворого солянокислого метюнину, що розчиняють у ЗОмл 0,5% розчину соляної кислоти Означений розчин вводиться інтрадуоденально по вільному каналу зонду Після стимуляції проводиться фракційний відбір дуоденального вмісту - першої порції (через 20хв), другої (через 40хв), та третьої порції (через 1 годину) У базальній та стимульованих порціях дуоденального вмісту визначають концентрацію ТБК - позитивних речовин реакцією з тюбарбітуровою кислотою, загальну антиоксидантну активність та активність супероксидисмутази Порушення перекисно-антиоксидантного гомеостазу діагностують у випадку підвищення концентрації ТБК - позитивних речовин та зниження загальної антиоксидантної активності одночасно із зниженням активності супероксиддисмутази в усіх Комп'ютерна верстка Л Ціхановська порціях дуоденального вмісту Приклад 1 Хворий В , № історії хвороби 1129, знаходився на лікуванні у хірургічному відділенні Укр Держ НДІ МСПІ з діагнозом "стеноз великого дуоденального соску, хронічний панкреатит середнього ступеню важкості з помірною зовнішньосекреторною недостатністю, післяопераційна вентральна кила" При обстеженні у КЛІНІЦІ у хворого є сонографічні ознаки хронічного панкреатиту, на РХПГ- помірна виражена актазія термінального відділу холедоху з ознаками склерозуючого папілліту При проведенні у хворого дослідження перекисно-антиоксидантного гомеостазу у дуоденальному середовищі, отримані наступні показники Таблиця Показник базальна Перша порція Друга порція Третя порція 3,09 3,61 4,62 4,74 2,13 2,92 5,14 7,19 38 40 42 40 ТБК - позитивні речовини Супероксиддисмутаза Загальна антиоксидантна активність дуоденального середовища Таким чином, у результаті дослідження у хворого виявлена пперпероксидація ЛІПІДІВ та зниження активності антиоксидантної ланки у дуоденальному ВМІСТІ, яке обумовлене хронічним запальним та дистрофічним процесом у підшлунковій залозі Список літератури, що була прийнята до уваги при розробці матеріалів даної заявки 1 Максимов В А Чернышов А Л , Тарасов К М Дуоденальные исследования - М ЗАО "Медицинская газета" 1998г - 192с , (С 133-138) 2 Барабой В А , Сутковой Д А Окислительноантиоксидантный гомеостаз в норме и при патологии К Чернобыльинтеринформ, 1997 Ч 2 - 220с Підписано до друку 05 08 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна