Застосування (1,1-діоксотіолан-3-іл)дитіокарбамату калію як антимікробного засобу

Застосування (1,1-діоксотіолан-3-іл)дитіокарбамату калію як антимікробного засобу. (19) (21) u201012923 (22) 01.11.2010 (24) 25.06.2011 (46) 25.06.2011, Бюл.№ 12, 2011 р. (72) ШКАРАПУТА ЛЕОНІД МИКОЛАЙОВИЧ, ДАНИЛЕНКО ВАЛЕРІЙ ВАСИЛЬОВИЧ, ТИЩЕНКО ЛЮДМИЛА ОЛЕКСАНДРІВНА, ШЕВЧЕНКО ЛЮДМИЛА АНАТОЛІЇВНА, RU, КУХАР ВАЛЕРІЙ ПАВ 3 60476 Приклад № 1. Вивчали фунгіцидну та бактерицидну дії (1,1діоксотіолан-3-іл)дитіокарбамату калію (ДТДК) відносно грибів роду кандид (види: к. альбіканс, к. тропікаліс) і мікроорганізмів, що найчастіше викликають госпітальні (ранові) та кишкові інфекції: кишкова паличка, золотистий стафілокок, шігела Флекснера, кл. пневмонії, синьогнійна паличка. При роботі використовували метод серійних розбавлень ДТДК у м'ясо-пептоновому бульйоні, починаючи з початкової - 20 мг/мл до кінцевої концентрації 0,04 мг/мл. Об'єм, що використовувався, становив 1 мл. 4 До розчинів ДТДК вносили мікроорганізми по 9 0,025 мл (суспензії 10 мікробних клітин на мл). Контролем служив м'ясо-пептоновий бульйон без ДТДК, куди вносились досліджувані мікроорганізми. Життєздатність бактерій в бульйоні визначали подальшим його висівом на тверді живильні середовища. Результати наведені в таблиці № 1. Отримані дані дозволяють зробити висновок, що антибактеріальний ефект ДТДК виявляється в концентраціях (1,5-5,0) мг/мл. Фунгіцидна дія ДТДК відносно грибів роду кандид виявляється в концентраціях 0,08 і 0,62 мг/мл для к. альбіканс і к. тропікаліс, відповідно. Таблиця 1 Бактерицидна та фунгіцидна дія препарату на мікрофлору, що вивчається (метод серійних розбавлень) Мікроорганізми Розбавлення препаКишкова Золотистий Кл. пневШигела Синьогній- К. тропікарату (мг/мл) паличка стафілокок монії Флекснера на паличка ліс 20 мг/мл ні ні ні ні ні ні 10 мг/мл ні ні ні ні ні ні 5 мг/мл ні ні ні ні ні ні 2,5 мг/мл ні ні так ні так ні 1,25 мг/мл ні так так так так ні 0,62 мг/мл так так так так так ні 0,31 мг/мл так так так так так так 0,16 мг/мл так так так так так так 0,08 мг/мл так так так так так так Контроль культури так так так так так так № 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. К. альбіканс ні ні ні ні ні ні ні ні ні так Примітка: так - наявність росту, ні - ріст відсутній. Таблиця 2 Бактерицидна дія препарату відносно деяких патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів (на твердих живильних середовищах) Розбавлення препарату 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 20 мг/мл 10 мг/мл 5 мг/мл 2,5 мг/мл 1,25 мг/мл 0,62 мг/мл 0,31 мг/мл 0,16 мг/мл 0,08 мг/мл 0,04 мг/мл Діаметр затримки росту мікроорганізмів, що вивчаються (у мм) Золотистий стаСиньогнійна паКишкова паличка К. альбіканс К. тропікаліс філокок личка 38±2 33±1 30±2 42±1 40±2 27±2 22±1 25±2 37±1 23±1 25±1 19±2 20±2 22±1 20±1 18±2 17±1 18±2 20±1 16±1 13±1 0 15±1 17±1 14±1 0 0 0 12±1 12±1 0 0 0 10±1 10±1 0 0 0 8±1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Приклад № 2. Фунгіцидну та бактерицидну дії ДТДК вивчали лунковим методом [5]. Розчини ДТДК (0,0420 мг/мл) вносили до лунок, виконаних у стандартному агарі (АГВ) діаметром 6 мм. Кількість розчину, що вводився, становила 0,05 мл. Агар заздалегідь засівали мікробною суспензією. Через 24 години при експозиції в термостаті вимірювали діаметри зон затримки росту навколо лунок. Конт роль вели по лунках без препарату. Результати наведені в таблиці № 2. З отриманих результатів виходить, що під час уведення в лунку препарату в кількості від 0,125 до 0,075 мг реєструються зони затримки росту для бактеріальної мікрофлори діаметром 15-17 (±1)мм. Затримка для грибкової мікрофлори відмічена при внесенні ДТДК у лунку у кількості 0,007-0,015 мг, що призводить до зони затримки в межах 8-10 (±1) мм. 5 60476 Таким чином, первісний бактерицидний ефект від додавання (1,1-діоксотіолан-3-іл)дитіокарбамату калію в дослідах на твердих живильних середовищах спостерігається при внесенні не більше 0,125 мг ДТДК, фунгіцидний ефект - при внесенні не більше 0,015 мг ДТДК. Мінімальна гнітюча концентрація (МГК) становить: - для грибів роду кандид к. альбіканс - 0,08 мг/мл к. тропікаліс - 0,62 мг/мл - для збудників ранових та кишкових інфекцій кишкова паличка - 1,25 мг/мл; золотистий стафілокок - 1,25 мг/мл; синьогнійна паличка - 1,25 мг/мл; шигела Флекснера - 2,5 мг/мл; кл. пневмонії - 5 мг/мл. Враховуючи невисоку порівняно з іншими відомими препаратами токсичність для теплокровних (ЛД50=2000-3950 мг/кг, перорально, щурі) препарат, що заявляється, може бути застосований в медицині та ветеринарній практиці, особливо при лікуванні гнійних ран, коли збудниками найчастіше є грибкова та бактеріальна мікрофлора одночасно. В такому разі орієнтовна добова доза ДТДК при лікуванні ран, ускладнених кандидозом, у вигляді добавки до аплікацій становить 0,021 мг (0,0074) 2 на кожні 30 мм ранової поверхні. При пероральному введенні ДТДК, наприклад, в іммобілізованому вигляді на ентеросорбентах за умов максимальної кількості сорбенту, що вводиться, 90 г, добова доза ДТДК буде сягати 30 мг (900,084). Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська 6 Аналогічно, при пероральному введенні ДТДК як бактерициду, добова доза препарату буде становити 1,8 г (9054). Коефіцієнт "4" було введено для орієнтовного розрахунку кількості препарату, як чотирикратне збільшення МГК. Одержані оціночні результати показують, що добові дози ДТДК значно менші токсичного бар'єру препарату - відношення токсичної дози препарату до добової перевищує 70 (2000/1800/70). Одержані результати показують, що у порівнянні з відомими препаратами ДТДК є найменш токсичним і має суміщену фунгіцидну та бактерицидну активність. Такі характеристики роблять перспективним подальше вивчення (1,1діоксотіолан-3-іл) дитіокарбамату калію як лікарської субстанції і розробку на його основі лікарських форм. Джерела інформації: 1. Навашин С.Н., Фомина И.П. Рациональная антибиотерапия. - М., 1982. - С.283. 5 2. А.с. 788669 (СССР), Мкл С07Г9/22, А0І57/26, 14.06.79. 5 3. А.с. 790700 (СССР), Мкл С07Г9/22, А0І57/26, 21.08.80. 4. Машковский М.Д. Лекарственные средства, ч.2. - М., 1984. - 375с. 5. Патент на винахід №84382 (UA), Бюл. №19, 2008. 6. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению препаратов для местного лечения гнойных ран. - М., 1989. Підписне Тираж 24 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601