Спосіб визначення дельтаметрину в комплексному дезінфікуючому засобі з діючою речовиною бензалконію хлоридом

Спосіб визначення дельтаметрину в комплексному дезінфікуючому засобі з діючою речовиною 3 комплексному дезінфікуючому препараті «Діамант» з діючою речовиною бензалконію хлоридом. Принцип корисної моделі заснований на методі високоефективної рідинної хроматографії. Основна модифікація методу полягала в тому, що з метою оптимізації умов одночасного визначення ідентичності та кількісною вмісту дельтаметрину у комплексному дезінфікуючому засобі з діючою речовиною бензалконію хлоридом (приведення цих умов у відповідність із складом препарату і його фармацевтичною формою), для розчинення дельтаметрину та проведення хроматографічного розділення використовується суміш метанолу з водою, детекція поглинання випромінювання для проби відбувається за довжини хвилі 204 нм. Запропонований спосіб здійснюється наступним чином. Спосіб визначення ідентичності та кількісного вмісту дельтаметрину у комплексному дезінфікуючому препараті з діючою речовиною бензалконію хлоридом. Визначення ідентичності дельтаметрину. Визначення ідентичності проводять методом високоефективної рідинної хроматографії (умови проведення хроматографічного розділення див. нижче), порівнюючи час виходу піка діючої речовини на хроматограмі розчину робочого стандартного зразка (РРСЗ) та піка, що відповідає діючій речовині на хроматограмі робочого розчину досліджуваної проби (РРДП). Різниця у часі виходу не повинна перевищувати відносного стандартного відхилення, розрахованого для РРСЗ з п'яти послідовних хроматограм, але не більше 5 %. Визначення масової частки дельтаметрину. Визначення масової частки дельтаметрину в препараті "Діамант" проводять одночасно із визначенням ідентичності. Підготовка до проведення аналізу Обладнання, посуд, реактиви: - система високоефективної рідинної хроматографії, яка забезпечує створення тиску для прокачування елюенту через аналітичну колонку зі шви3 дкістю 0,5 см /хв.; - оптичний детектор, який забезпечує детекцію елюенту по оптичній густині за довжини хвилі 204 нм; - колонка хроматографічна, розміри: 250  4,0 мм, заповнена сорбентом Partisil ODS3, або аналогічна; - терези аналітичні за ГОСТ 24104; - наважки за ГОСТ 7328; - дельтаметрину сертифікований стандартний зразок; - метиловий спирт для хроматографії; - фільтри мембранні з розміром пор 0,2-0,5 мкм; - вода очищена Р, згідно з ДФУ 1-е видання, 2001, розд.4 1.1.с.187. - посуд лабораторний згідно з ГОСТ 23932-90 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия. Приготування розчину рухомої фази 3 У мірну колбу місткістю 1000 см вливають 200 3 см метилового спирту та доводять об'єм до позначки водою очищеною Р. Одержаний розчин мо 62649 4 жна зберігати за звичайних умов у закритому пришліфованому корком посуді протягом одного тижня або при 4° С протягом одного місяця. Приготування розчину робочого стандартного зразка (РРСЗ) дельтаметрину. Близько 0,1 г (точна наважка) сертифікованого стандартного зразка дельтаметрину вносять у 3 3 мірну колбу місткістю 100 см , розчиняють в 70 см метилового спирту, поміщають на 5 хв. в ультразвуковий диспергатор, охолоджують до кімнатної температури та доводять об'єм розчину метиловим спиртом до позначки (розчин 1). 3 1 см розчину 1 поміщають у мірну колбу міст3 кістю 100 см , доводять об'єм розчину рухомою фазою до позначки, перемішують і фільтрують крізь мембранний фільтр із діаметром пор 0,2-0,5 мкм (розчин 2). Розчин 2 придатний протягом одного тижня, при зберіганні в холодильнику, за температури 4 °С, у закритому пришліфованому корком посуді. 3 1 см розчину 2 містить близько 0,00001 г дельтаметрину. Приготування робочого розчину досліджуваної проби (РРДП) для визначення дельтаметрину. 3 20 см препарату Діамант вносять у мірну кол3 3 бу місткістю 100 см , розчиняють в 70 см метилового спирту, доводять об'єм метиловим спиртом до позначки та перемішують (розчин 3). 3 1 см розчину 3 вносять у мірну колбу місткіс3 тю 100 см , доводять об'єм розчину рухомою фазою до позначки, перемішують і фільтрують крізь мембранний фільтр з діаметром пор 0,2-0,5 мкм (розчин 4). Розчин досліджуваної проби (4) використовують свіжоприготованим. Проведення контролю Одержують почергово не менше 3 хроматограм стандартного зразка та досліджуваної проби за наступних умов: - колонка хроматографічна, розміри: (250  4,0) мм, заповнена сорбентом Partisil ODS3, або аналогічна; - рухома фаза: згідно з описом, дегазована будь-яким зручним способом; 3 - швидкість потоку рухомої фази 0,5 см /хв.; - детектування за довжини хвилі 204 нм; - температура колонки +25 °С; - масштаб реєстрації - 0,5 одиниці оптичної густини; - інтегрування сигналу - комп'ютерне інтегрування; 3 - об'єм інжекції - 0,050 см . Перевірка придатності хроматографічної системи. Хроматографічна система вважається придатною, якщо виконуються наступні умови: - ефективність хроматографічної системи, розрахована за піком діючої речовини, повинна бути не менше 800 "теоретичних тарілок" (Розраховується, як описано у Державній фармакопеї України [11 ]); - ступінь (фактор) розділення піків повинен бути більше 1,0 (Розраховується, як описано у Державній фармакопеї України [11]);• 5 - відносне стандартне відхилення для площі піка дельтаметрину, розраховане за хроматограмами РРСЗ повинно бути не більше 5 %; - коефіцієнт асиметрії піка повинен бути не менше 0,8 та не більше 2,5. (Розраховується, як описано у Державній фармакопеї України [11]); Обчислення результатів контролю. При комп'ютерному (графічному) інтегруванні хроматографічних піків візуально контролюють правильність детектування початку та закінчення піка. 3 Вміст X (г/ см ) дельтаметрину в препараті "Діамант" розраховують за формулою: S m F    1 0 1 0 ; S0  1  F0  100 де, S0 - середнє значення площ піка дельтаметрину, вирахуване за хроматограмами РРСЗ; S1 - середнє значення площ відповідного піка, вирахуване за хроматограмами РРДП; F0 - фактор розведення при приготуванні РРСЗ; F1 - фактор розведення при приготуванні РРДП; m0 - маса наважки, використаної для приготування РРСЗ, в грамах; v1 - об'єм препарату, використаний для приго3 тування РРДП, в см ; Ро - ступінь чистоти стандартної речовини, в процентах. Недоліком відомого способу є те, що він розроблений для препарату, який суттєво відрізняється за складом та фармацевтичною формою випуску від комплексного дезінфікуючого засобу з діючою речовиною бензалконію хлоридом «Діамант» і тому не може бути безпосередньо застосований для визначення дельтаметрину в ньому. Переваги способу визначення дельтаметрину у комплексному дезінфікуючому засобі з діючою речовиною бензалконію хлоридом перед аналогічними методами в наступному: - забезпечує спрощення методичної та матеріальної бази аналізів та забезпечує можливість одночасного визначення ідентичності та кількісного вмісту дельтаметрину у комплексному дезінфікуючому засобі з діючою речовиною бензалконію хлоридом. - простота та ефективна постановка експериментального дослідження; - порівняно дешевий для виконання досліджень з іншими методами; - спосіб може бути використаний в роботі наукових, науково-виробничих та контрольних лабо Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко 62649 6 раторій ветеринарної медицини. Запропонований нами спосіб може служити підставою для розробки різних нормативних документів, що регламентують застосування дезінфектантів. Бібліографічні дані: 1. Інструкція "Ветеринарна дезінфекція, дезодорація, дезінсекція, дезінвазія, дератизація", схвалена та затверджена науково-методичною радою Державного департаменту вет. Мед Мінагрополітики України, протокол №3, 23.12.2005р від 11.01.2006р. 2. Коваленко В.Л., Ященко М.Ф. Порівняльна характеристика антгельмінтних засобів для протипаразитарної профілактики та терапії тварин. Міжвідомчий тематичний науковий збірник УААН// Ветеринарна медицина.- Харків, 2008. №91-. С. 527534. 3. Дельтаметрин. Гигиенические критерии состояния окружающей среды 97//Всемирная орг. Здравохранения. Женева. 1997. 110с. 4. Каталог ветеринарних лікарських засобів і кормових добавок для тварин, зареєстрованих і дозволених для використання в Україні /під редак. Бісюка І.Ю.-, 2006. -170с. 5. Методические рекомендации по изучению эффективности репеллентов и инсектицидов в ветеринарии / ВАСХНИЛ, отделение ветеринарии. - М., 1982. -13 с. 6. Elliot М. Synthetic pyrethroids a new class of insecticides [Text] / M. Elliot, N.F. Janes // Chem. Soc. Revs. 1978. - Vol. 7. - P. 473-505. 7. COLLABORATIVE INTERNATIONAL PESTICIDES ANALYTICAL COUNCIL LIMITED (CIPAC)//Determination of deltamethrin in permanet ® by High performance liquid chromatography //deltamethrin long lasting insectidal nets CIPAC 333/LN, Book L, p.45. на офіційному сайті: http://www.cipac.org//. 8. Инструкция. по применению инсектоакарицидного средства. "АБСОЛЮТ-ДУСТ" /(ЗАО НПО Тарант", Россия, Самара) Москва-2005 г. 9. Методические указания по определению остаточных количеств дельтаметрина в зеленой массе, семенах и масле рапса газохроматографическим методом /МУК 4.1.1943-05. 10. Sanyal A., Handa S.K. //10th UIРАС International Congress on the Chemistry of Crop Protection. Basel 2002. Book of Abstracts. Volume 2. Convention Center Basel, Switzerland. August 2002. P. 234. 11. Державна Фармакопея України, 1-е видання, 2001, с. 48. Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601