Спосіб виготовлення носія з іммобілізованими мікроорганізмами-біоіндикаторами забруднення води

Спосіб виготовлення носія з іммобілізованими мікроорганізмами-біоіндикаторами забруднення 3 тообл. ЗАО «Вектор-БиАльгам», автори Молокеев А.В. та др. заявл. 10.01.2008, опубл. 20.02.2008), який прийнятий за прототип. Спосіб включає: обробку носія, яким є пористий енергосорбент СУМС-1, розчином солі металу в об'ємному співвідношенні 1:1 та його відмивку від реагенту 2-3 кратним об'ємом дистильованої води, змішування енергосорбенту та бактерій з поживним та захисним субстратом у співвідношенні 1:1 та витримування суміші до повної іммобілізації бактеріальних клітин на носії з наступним заморожуванням та ліофільним сушінням перед стерилізацією. Як бактерії використовують концентрат консорціуму біфідобактерій або лактобакте8 10 рій, або їх суміш з титром 10 -10 KDE/г. Ознаками, спільними з прототипом, є: - використання носія; - відмивка носія 2-3 кратним об'ємом дистильованої води; - використання субстрату; - іммобілізація субстрату бактеріями із заданим титром; - сушка носія; - його стерилізація; - утримання суміші субстрату і бактерій на носії до повної її іммобілізації. Недоліком прототипу є те, що носій (пористий енергосорбент) має незначну площу контакту з мікроорганізмами, що знижує якість їх іммобілізації на поверхні носія. Крім того, бактерії, що використовують у цьому способі, не є пігментосинтезуючими біоіндикаторми, тому вони не можуть змінювати своє забарвлення при наявності забруднень у воді, наприклад іонів важких металів. У відомому способі застосовують відносно дорогі матеріали, які потребують значних коштів. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб виготовлення носія з іммобілізованими мікроорганізмами - біоіндикаторами забруднення води, який шляхом застосування пігментосинтезуючих бактерій, які за рахунок поживного середовища закріплюються на полімерному носії, що дозволяє забезпечити якісне визначення у воді токсичних забруднювачів, у тому числі іонів важких металів. Суттєвими ознаками способу є: - очищення полімерного носія, яким є капронове волокно «ВІЯ», у миючому розчині; - промивання носія 2-3 кратним об'ємом дистильованої води; - його сушка; - стерилізація; - внесення суспензій пігментосинтезуючих бактерій із заданим титром у поживне середовище м'ясо - лептонного агару (МПА); - іммобілізація носія бактеріями у поживному середовищі; - сушка носія на повітрі. Відмінними від прототипу ознаками способу є: 62712 4 - використання як носія капронового волокна «ВІЯ»; - очищення носія у миючому розчині; - виконання операції стерилізації носія безпосередньо після сушки; - внесення суспензій пігментосинтезуючих бактерій із заданим титром у поживне середовище м'ясо - лептонного агару (МПА). Спосіб здійснюють таким чином: фрагменти капронового носія «ВІЯ», який має розгалужену площу контакту з рідиною, вагою 50-100 г, очищують у безфосфатному миючому засобі, промивають 2-3 кратним об'ємом дистильованої води, висушують на повітрі, стерилізують, готують суспензію пігментосинтезуючих бактерій із заданим титром, яку вносять у розплавлений МПА, в який потім занурюють фрагменти «ВІЇ», висушують їх на повітрі. Запропонований спосіб отримання носія з іммобілізованими бактеріями-біоіндикаторами забруднення (з використанням поживного середовища МПА), дозволяє мікроорганізмам тривалий час утримуватися на носії зі збереженням оптимальної біомаси та здатності до пігментоутворення. Приклад конкретного виконання: Як носій використовували фрагменти капронового волокна, торговельної назви «ВІЯ», яке має розгалужену площу контакту з рідиною. Фрагменти «ВІЇ» вагою 50 г очищували в миючому розчині, що містив 2г безфосфатної миючої речовини на 1 л підігрітою до 35°С води. Потім їх відмивали 2 кратним об'ємом дистильованої води та просушували на відкритому повітрі при кімнатній температурі (24°С). Після чого фрагменти носія стерилізували упродовж 35 хвилин в автоклаві при температурі 130°С та тиску атмосфери 1,3 Па. Потім стерилізований носій занурювали в ємність з субстратом, яким був розігрітий до рідинного стану м'ясо-пептонний агар з доданою до нього суспензією мікроорганізмів 9 Serratia marcescensis з титром 1·10 кл/мл, а потім просушували на повітрі. Запропонований спосіб виготовлення носія, яким є капронове волокно «ВІЯ», з іммобілізованими мікроорганізмами-біоіндикаторами, у порівнянні із відомими способами, дозволяє якісніше визначити у воді наявність токсичних речовин, наприклад, іонів важких металів. Зниження витрат на виготовлення іммобілізованого мікроорганізмами носія «ВІЯ» досягається відносно низькими витратами матеріалів. На партію виготовлення (5 шт.) іммобілізованих мікроорганізмами носіїв витрачається, наприклад - 17,5 г м'ясо-пептидного агару, 50 мл суспензії культури мікроорганізмів,. Іммобілізований мікроорганізмами носій можливо виготовити у лабораторіях різних установ із застосуванням широковідомого обладнання, яке виготовляється в Україні - автоклав, аератор, ємності різного об'єму (ГОСТ 25336-82) та інші. 5 Комп’ютерна верстка Мацело М. 62712 6 Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601