Спосіб визначення рівня хронічної токсичності природної води

Спосіб визначення рівня хронічної токсичності природної води, що полягає у внесенні тестоб'єктів в контрольну і дослідну воду, щодобовому годуванні тест-об'єктів, веденні обліку кількості живих тест-об'єктів і потомства, проведенні оцінки хронічної токсичності води на підставі різниці між показниками виживаності або репродукції тестоб'єктів в природній воді і контрольній, який відрізняється тим, що як тест-об'єкти використовують церіодафнії Ceriodaphnia affinis Lilljeborg віком до 24 годин, як контрольну воду використовують питну воду або штучну прісну воду, як дослідна вода використовується природна вода, із якої готують U 1 3 Поставлена задача вирішується тим, що спосіб визначення рівня хронічної токсичності природної води, що полягає у внесенні тест-об'єктів в контрольну і дослідну воду, щодобовому годуванні тест-об'єктів, веденні обліку кількості живих тестоб'єктів і потомства, проведенні оцінки хронічної токсичності води на підставі різниці між показниками виживаності або репродукції тест-об'єктів в природній воді і контрольній, згідно з корисною моделлю, як тест-об'єкти використовують церіодафнії Ceriodaphnia affmis Lilljeborg віком до 24 годин, як контрольну воду використовують питну воду або штучну прісну воду, як дослідна вода використовується природна вода, із якої готують ряд розбавлень, перед щодобовим годуванням у кожній посудині з церіодафніями проводять заміну контрольної та дослідної води на відповідну свіжоприготовану, під час заміни води підраховують кількість живих вихідних церіодафній та новонароджених особин, після підрахунку новонароджених особин видаляють, біотестування закінчують після того, як у контролі 60 % вихідних самок дадуть по три послідовних помети, тривалість біотестування становить (7±1) діб, вірогідність різниці між дослідом і контролем за показниками виживаності та (або) плодючості встановлюють за критерієм Стьюдента (Stтеор), для цього розраховують фактичний критерій вірогідності різниці (Stфакт) і порівнюють його з теоретичним (Stтeop) на цій підставі роблять висновок про те, що дослідна вода або її розбавлення чинить або не чинить хронічну токсичну дію, у випадку наявності хронічної токсичності рівень хронічної токсичності дослідної води дорівнює мінімальній кратності розбавлення, за якою хронічна токсичність води вже не виявляється. Спосіб визначення рівня хронічної токсичності природної води ґрунтується на встановленні різниці між показниками виживаності та (або) плодючості тест-об'єктів у воді, що аналізується - дослідна, та аналогічними показниками у воді, яка не містить токсичних речовин - контрольна. Критерієм хронічної токсичності є вірогідне зниження показників виживаності та (або) плодючості церіодафній у дослідній воді порівняно з контрольною впродовж трьох послідовних пометів за (7±1) діб. Пропонований спосіб може бути реалізований наступним чином. Для біотестування використовують по десять 3 посудин об'ємом 20 см для контрольної води, дослідної води та її розбавлень. У кожну посудину наливають по 15 см відповідної води і вміщують по 1 екземпляру церіодафній Ceriodaphnia affinis Lilljeborg віком до 24 годин. Як контрольну воду використовують питну воду або штучну прісну воду. Щодоби у кожній посудині з церіодафніями проводять заміну контрольної та дослідної води на відповідну свіжо приготовану і вносять корм. Під час заміни води підраховують кількість живих вихідних церіодафній та новонароджених особин. Після підрахунку новонароджених особин видаляють. Біотестування закінчують після того, як у контролі 60 % вихідних самок дадуть по три послідовних помети. Тривалість біотестування становить (7±1)діб. 67014 4 Вірогідність різниці між дослідною і контрольною водою за показниками виживаності та плодючості встановлюють за критерієм Стьюдента (Stтеор). Для цього розраховують фактичний критерій вірогідності різниці (Stфакт) і порівнюють його з теоретичним (Stтeop). Значення Stфакт знаходять за формулою Stфакт  Xк  Xд , (1) 2 Sк  S2 д де X к , X д - середні арифметичні показників виживаності або плодючості у контрольній та дослідній воді; 2 S к , S 2 - похибки середніх арифметичних у д контрольній та дослідній воді. Значення Stтeop - таблична величина. При довірчій імовірності Р=0,95 і числі ступенів свободи (v=n+n-2=10+10-2=18) воно складає 2, 10 (табл. 1). Якщо Stфакт>Stтeop, то різниця між результатами біотестування у дослідній та контрольній воді вважається вірогідною. Тобто спостерігається вірогідне зменшення кількості живих вихідних церіодафній і/або зменшення кількості новонароджених особин (урозрахунку на одну вихідну самку) у дослідній порівняно з контрольною водою впродовж трьох послідовних пометів за (7±1) діб. На цій підставі роблять висновок про те, що проба води або її розбавлення чинить хронічну токсичну дію. Для кількісної оцінки хронічної токсичності проби води встановлюють найменшу кратність розбавлення води, за якою не виявляється хронічна токсична дія. Рівень хронічної токсичності (РТх) природної води дорівнює мінімальній кратності її розбавлення, за якою хронічна токсичність води не виявляється. РТх виражають в умовних одиницях хронічної токсичності. Одиниця хронічної токсичності води (ОТх) - величина, визначувана через мінімальну кратність розбавлення, за якою хронічна токсичність води вже не виявляється. Якість природної води оцінюють за рівнем її хронічної токсичності відповідно до класифікаційної шкали (табл. 2). Природна вода відповідає нормативним вимогам, якщо вона не чинить хронічної токсичності на церіодафнії. Така вода є чистою за токсикологічним показником і належить до І класу якості. Перевага способу у порівнянні з відомим полягає у тому, що за його допомогою можна здійснити не тільки якісну оцінку природної води (токсична, нетоксична), а також визначити ступінь її небезпеки для водної екосистеми шляхом отримання величини рівня хронічної токсичності, що виражена мінімальною кратністю розбавлення, за якою хронічна токсичність не виявляється, та здійснити оцінку якості природної води за токсикологічним показником відповідно до запропонованої класифікаційної шкали. 5 67014 6 Таблиця 1 Значення критерію Стьюдента Число ступенів свободи Stтeop 11 12 13 14 15 16 17 18 18 20 2,20 2,18 2,16 2,14 2,13 2,12 2,11 2,10 2,09 2,09 Таблиця 2 Класифікація якості природної вод за рівнями хронічної токсичності Клас якості води І II III IV V Комп’ютерна верстка А. Крулевський Ступінь забрудненості чиста слабо забруднена помірно забруднена брудна дуже брудна Підписне Рівень хронічної токсичності, ОТх 1,0 1,1-2,0 2,1-4,0 4,1-8,0 більше 8,0. Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601