Застосування тетра-m-гідрофосфатів диренію (ііі) як речовин з антипроліферативною активністю відносно клітин коренів кукурудзи

Застосування тетра-μ-гідрофосфатів диренію (III) загальної формули M2 [Re2(HPO4) 4·2L], де М = Cs +, К+, NH4+, Na+; L = Н3РO4 , Н2О, як речовин з антипроліферативною активністю відносно клітин коренів кукурудзи. UA (21) a200510236 (22) 31.10.2005 (24) 10.08.2007 (46) 10.08.2007, Бюл. № 12, 2007 р. (72) Штеменко Олександр Васильович, Штеменко Наталія Іванівна, Сорочан Ольга Олександрівна, Голіченко Олександр Анатолійович, Столяренко Вікторія Григоровна, Берзеніна Оксана Валеріївна (73) УКРАЇНСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ ХІМІКОТЕХНОЛОГІЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, ДНІПРОПЕТРОВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ (56) CN 1435419, A, 13.08.2003 Столяренко В.Г., Штеменко А.В. Тетрафосфаты дирения (III). Синтез и поведение в растворах // Вопр. химии и хим. технологии. - 2003. - № 6. С.43-46 Столяренко В.Г., Курячая Е.В., Штеменко А.В. Дифосфа ты дирения (III). Синтез и спектрофотомет C2 2 (19) 1 3 80036 органов брюшной полости. - «Преса Украины», Киев. - 1998. - С.256] (прототип). До недоліків прототипу слід віднести низьку антипроліферативну активність відносно клітин коренів кукурудзи у концентрації 10-7 Μ та зникнення ефекту при концентраціях 10-8, 10-9М. В основу винаходу поставлено задачу застосування речовин загальної формули (1), що проявляють антипроліферативну активність відносно коренів кукурудзи. Поставлена задача досягається тетра-mгідрофосфатами диренію(ІІІ) загальної формули M2 [Re2(HPO4) 4·2L], де M=Cs +, K+, NH/, Na+; L=H3PO4, H2O, що проявляють антипроліферативну активність відносно клітин коренів кукурудзи. Запропоновані сполуки загальної формули (1) одержані шляхом взаємодії (N(Bu)4)2[Re2X8] (де X=СI- , Вr) з фосфорною кислотою при температурі 110-130°С в інертній атмосфері протягом 4-6 годин. Приводимо приклади конкретного виконання винаходу. Приклад 1. Синтез тетра-mгідрофосфатодиренату(lll) амонію загальної формули (NН4)1Re2(НРО4)4 ·2L], де L=H 3PO 4, Н2 О. 1г (0,9ммоль) (NBu4)2[Re2Cl8] і 0,4г (3ммоль) (NH4)2HPO4 розчиняють в 20мл 6М фосфорної кислоти протягом 6 годин при температурі 130°С в інертній атмосфері (Аr). З отриманого темносинього реакційного розчину через 12 годин кристалізується речовина темно-зеленого кольору, що відповідає формулі (NH4)2[Re2(HPO4)4 ·2H3PO4] з виходом до 3,5%. Осад відфільтровують, промивають спиртом, діетиловим ефіром, сушать у вакуумному ексикаторі над концентрованою сірчаною кислотою. Маточний розчин розбавляють водою (10мл), після чого відбувається миттєве осадження кристалічної речовини блакитного кольору, що відповідає формулі (NH4)2[Re2(HPO4)4·2H2O]. Осад відфільтровують, промивають спиртом, діетиловим ефіром, сушать у вакуумному ексикаторі над концентрованою сірчаною кислотою. Вихід M2 [Re2(HPO4) 4·2H2O] (M=Cs +, K+, NH4+,Na+) складає »50-60%. Приклад 2. Синтез диакватетра-mгідрофосфатодиренату(ІІІ) амонію формули (NH4)2[Re2(HPO4)4 ·2H2O]. Значно збільшити вихід амонію диакватетра-mгідрофосфату диренію(ІІІ) (NH4)2[Re2(HPO4) 4·2H2O] можна, якщо проводити синтез в органічних розчинниках: 0,9г (0,8ммоль) (NBu4)2[Re2Cl8] розчиняють в 20мл моногліму (этиленглікольмонометиловий ефір) при нагріванні до 70°С в інертній атмосфері (Аr). До отриманого розчину додають 3мл фосфорної кислоти та витримують протягом 6 годин при температурі 130°С. Розчин охолоджують до кімнатної температури та додають 5мл 6М водного розчину гідрофосфата амонію, в результаті чого відбувається осадження кристалічної речовини блакитного кольору, що відповідає загальній формулі (NH4)2[Re2(HPO4)4 ·2H2O]. Осад відфільтровують, промивають спиртом, діетиловим ефіром, сушать у вакуумному ексикаторі над концентрованою сір 4 чаною кислотою. Вихід (NH4)2[Re2(HPO4)4·2H2O] складає 98%. Приклад 3. Синтез дифосфатотетра-mгідрофосфатодиренату(lll) калію загальної формули K2[Re2(HPO4) 4·2L], де L=H 3PO 4, H2O. Тетра-m-гідрофосфати диренію(III) з катіоном калію у зовнішній сфері отримують аналогічно синтезу описаному у прикладах 1, 2, тільки замість гідрофосфату амонію використовують гідрофосфат калію K2НРО4 . Приклад 4. Синтез дифоефатотетра-mгідрофосфатодиренату(III) калію загальної формули Cs 2[Re2(HPO4)4·2L], де L=Н3РО 4, Н2 О. Тетра-m-гідрофосфати диренію(III) з катіоном цезію у зовнішній сфері отримують аналогічно синтезу описаному у прикладі 1, 2, тільки замість гідро-фосфату амонію використовують гідрофосфат цезію Cs 2HPO4. Приклад 5. Синтез дифосфатотетра-mгідрофосфатодиренату(III) калію загальної формули Na2[Re2(HPO4)4·2L], де L=Н3РО4 , Н2О. Тетра-m-гідрофосфати диренію(III) з катіоном натрію у зовнішній сфері отримують аналогічно синтезу описаному у прикладі 1, 2, тільки замість гідро-фосфату амонію використовують гідрофосфат натрію Na2HPO4. Дослідження на антипроліферативну активність тетра-m-гідрофосфатів диренію(III) (1) були проведені на коренях проростків кукурудзи за методом, описаним Івановим В.Б. [Иванов В.Б., Чельцов П.А.,Щелоков Р.Н. Подавление роста комплексами платины (II) в зависимости от их строения // Доклады Академии наук СССР. - 1976. - Том 229, №2. - с.484-487]. Даний метод запропонований для початкового скринінгу речовин, які можуть бути запропоновані для відбору потенційних анти ракових препаратів, оскільки показана висока ступінь кореляції між антипроліферативною активністю на коренях кукурудзи та антиканцерогенною активністю різноманітних речовин. Насіння пророщували на фильтровальному папері, зволоженому дистильованою водою, при кімнатній температурі. Трьохденні проростки поміщали у фарфорові стакани з дистильованою водою та розчинами вивчаємих сполук ренію. Довжину коренів вимірювали один раз на добу протягом трьох діб. Розчини вивчаємих комплексів готували у концентраціях 10-5; 10-6; 10-7; 10-8; 10-9; 10-10моль/л. Ступінь інгібування росту коренів у різний час після початку обробки обчислювали за формулою: l=[(DI k-Dli)/Dl k] x100 де DIk - приріст контрольних коренів, Dli - приріст коренів, які росли у розчинах вивчаємих сполук. Сполука даного винаходу (NH4)2[Re2(HPO4)4 ·2H2O] інгібує in vi vo проліферацію клітин коренів кукурудзи у всьому діапазоні вивчених концентрацій (Таблиця). Відома антипроліферативна активність цис-платину та її відсутність у транс-платину. Відповідні дані також наведено у таблиці. Порівняння цих даних свідчить про суттєву антипроліферативну активність сполуки ренію у діапазоні низьких концентрацій, при яких у цис-платину ефект відсутній. Оскільки саме низькі концентрації лікарських речовин є фізіологічними, 5 80036 (NH4)2[Re2(HPO4)4 ·2H2O] є перспективною сполукою для подальших досліджень її антиканцероген 6 них властивостей. Таблиця Ступінь інгібування росту бічних коренів (І, %) сполуками ренію та платини Концентрація сполук, моль/л 10-5 10-6 10-7 10-8 10-9 10-10 Цис-[Pt(NH3)2Cl2] 98,34±5,55 90,46±6,18 48,34±4,42 (NH4)2[Re2(HPO4)4 ·2H2O] 304,15±10,34 197,25±7,39 250,45±10,22 278,56±9,88 100,46±8,42 576,34±20,18 Формули сполук Отже, речовина, що пропонується, як це видно з таблиці, проявляє анти-проліферативну активність відносно коренів кукурудзи і вже при концентрації 10-5 перевищує прототип в 3 рази; в 10-6 - в 2 рази; в 10-7 - 5 разів. При низьких концентраціях у прототипу взагалі відсутня активність. Саме низькі концентрації сполук є фізіологічними. Отже, тетра-m-гідрофосфати перевищують наба Комп’ютерна в ерстка О. Гапоненко гато прототип за антипроліферативними властивостями. Існує тісна кореляція між антипроліферативною активністю сполуки відносно клітин коренів кукурудзи та антиканцерогенною активністю. Отже, показані нами властивості цих сполук свідчать про їх потенційну антиканцерогенну активність, що робить їх предметом подальших преклінічних досліджень з подальшим використанням в медицині. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601