6-нітро-n-(2′-карбокси-4′-хлорфеніл)антранілова кислота, що проявляє протизапальну, анальгетичну, діуретичну та протигрибкову активність

6-Нітро-N-(2'-карбокси-4'-хлорфеніл)антранілова кислота формули: Винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема, до синтезу 4-нітро-N-(2'карбокси-4'-хлорфеніл)-антранілової кислоти, яка проявляє протизапальну, аналгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. Пошук нових засобів з широким спектром фармакологічної дії є актуальною проблемою сучасної медицини. Відомий цілий ряд лікарських засобів синтетичного походження, кожен з яких має свою домінуючу дію: фурацилін (протигрибкова дія), натрію диклофенак (протизапальна дія), анальгін (анальгетична дія), гіпотіазид (діуретична дія) [Машковский М.Д. Лекарственные средства. -М.: 000 "Издательство Новая Волна", 2007. - С. 852, 170, 159, 499]. До недоліків зазначених засобів можна віднести, зокрема, наявність у тій чи іншій мірі негативної побічної дії. У комплексному лікуванні виникає необхідність призначення хворому одночасно декілька лікарських засобів з моноспрямованою фармацевтичною дією, внаслідок чого загальна побічна дія підсилюється. За прототип обрана - 3,5-динітро-2-N-(3'хлорфеніл)антранілова кислота, яка проявляє протизапальну та аналгетичну активність [Деклараційний патент на винахід №65875 А (Україна) МПК: С 07 С 229/58, А 61 К 31/195. Заявлено 17.06.2003. Опубліковано 15.04.2004. Бюлетень №4]. Сполука за прототипом має широкий спектр дії, проте ступінь фармацевтичної активності та спектр дії може бути реально підвищений та розширений. В основу винаходу поставлене завдання по створенню нової хімічної сполуки, що проявляє підвищену протизапальну, анальгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. Поставлене завдання вирішується шляхом синтезу нової індивідуальної хімічної сполуки 6нітро-N-(2'-карбокси-4'-хлорфеніл)антранілової кислоти формули: O2N COOH Cl N (19) UA (11) 86163 (13) C2 H COOH , що проявляє протизапальну, анальгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. 3 O2N 86163 COOH Cl N H COOH , яка проявляє протизапальну, анальгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. Речовина, яка заявляється, утворена взаємодією б-нітро-2-хлорбензойної кислоти та 2-аміно-5хлорантранілової кислоти у присутності калію карбонату та міді оксиду при нагріванні реакційної суміші до 180-220°С без розчинника. 6-нітро-N-(2'-карбокси-4'-хлорфеніл)антранілова кислота - порошок жовто-зеленого кольору, погано розчинний у воді, гексані, добре розчинний в етанолі, діоксані, ДМСО, ДМФА. Будова сполуки підтверджена за допомогою елементного аналізу та ІЧ-спектроскопії, а індивідуальність - методом тонкошарової хроматографії. Винахід ілюструється наступними прикладами: Приклад 1. Суміш 2,01г (0,01моль) 6-нітро-2хлорбензойної кислоти, 1,71г (0,01моль) 2-аміно-5хлорантранілової кислоти, 2,76г (0,02моль) безводного калію карбонату, 0,010г (0,0005моль) міді оксиду нагрівають при температурі 180-200°С протягом 2 годин. З метою очищення після охолодження до реакційної маси додають 15мл 50% водного етанолу із активованим вугіллям, кип'ятять 15 хвилин та швидко фільтрують крізь складчастий фільтр. Фільтрат підкислюють кислотою 4 хлористоводневою до рН~3. Осад, який випав, відфільтровують, промивають водою та сушать. Вихід 3,03г (90%), Тпл. 237-240Т, М.м. 336,679 Бруто-формула: С14H9ClN2О6 Розраховано: С, % 49,94; N, % 8,32 Знайдено: С, % 49,98; N, % 8,30 ІЧ-спектр у КВr, см-1: 3298, 1688, 1602, 1586, 1530, 1328, 1236, 756. Rf: 0,30 (ацетон-гексан 1:1); Rf: 0,80 (ацетондіоксан-гексан 1:1:1,5). Приклад 2. Вивчення протизапальної активності заявленої сполуки проводилося на моделі каррагенінового набряку у мишей [Яковлева Л.В., Зупанец И.А. Использование модели каррагенинового отека у мышей при поиске противовоспалительных средств // Деп. в УкрНИИНТИ 07.07.87. - №1908. - Ук. 87]. В якості критеріїв фармакологічної активності вибрано ізоефективна доза (DE50), при якій фармакологічний ефект набуває 50% випадків у експериментальній групі тварин; рівень гострої токсичності (DL50); терапевтичний індекс ТІ (показник DL50 DE50 ); відносний терапевтичній відношення індекс. Результати вивчення протизапальної активності та токсичності 6-нітро-N-(2'-карбокси-4'хлорфеніл)антранілової кислоти (сполука 1) у порівнянні з 3,5-динітро-2-N-(3'хлорфеніл)антраніловою кислотою (прототип) та натрію диклофенаком наведені в таблиці 1. Таблиця 1 Протизапальна активність та токсичність сполуки 1 у порівнянні з прототипом та натрію диклофенаком Сполука Сполука 1 Прототип Натрію диклофенак DE50, мг/кг DL50, мг/кг 7,0 10,4 8,0 >5000 >2700 360 Як видно за даними таблиці 1, сполука 1 має виражену протизапальну активність, за широтою терапевтичного ефекту перевищує натрію диклофенак у 15,87 рази, а прототип у 2,8 рази. Приклад 3. Вивчення анальгетичної активності 6-нітро-N-(2'-карбокси-4'-хлорфеніл)антранілової кислоти (сполука 1) проводилося за методом «оцтових корчей» у білих лабораторних щурів масою 150-180г. Корчі були викликані внутрішньочеревним введенням 0,75% оцтової кислоти у дозі 1мл на 100г маси тіла тварини. Підрахунок кількості Терапевтичний індекс(ТІ) >714,29 >259,6 45,0 Відносний ТІ по вольтарену 15,87 5,7 1 корчей проводили через 15 хвилин після введення розчину оцтової кислоти протягом 30 хвилин. В якості критеріїв фармакологічної активності вибрано ізоефективна доза (DE50), при якій анальгетичний ефект набуває 50% випадків у експериментальній групі тварин; рівень гострої токсичності (DL50); терапевтичний індекс (ТІ); відносний терапевтичній індекс. Результати вивчення анальгетичної активності та токсичності сполуки 1 у порівнянні з прототипом та анальгіном наведені в таблиці 2. Таблиця 2 Анальгетична активність та токсичність сполуки 1 у порівнянні з прототипом та анальгіном Сполука Сполука 1 Прототип Анальгін DE50, мг/кг DL50, мг/кг 7,0 14,1 55 >5000 >2700 1197 Терапевтичний індекс(ТІ) 714,29 191,49 21,76 Відносний ТІ по анальгіну 32,83 8,78 1 5 86163 Як видно за даними таблиці 2, сполука 1 за широтою терапевтичної дії перевищує анальгін в 32,83 рази, а прототип у 3,74 рази. Приклад 4. Вивчення діуретичної активності проводили за методою Е.Б.Берхіна [Методы изучения действия новых химических соединений на функцию почек / Хим. - фармац. журн. -1977. -Т. 11, №5. -С. 3-11.] на білих щурах лінії Вістар масою 120-160г. Кожна серія складалася з 7 тварин. 6 Кожну з досліджених сполук вводили у дозі 50мг/кг у водному розчині із розрахунку 3 мл води на кожні 100г ваги тварини. Сечу збирали кожну годину протягом 4 годин. В якості критерію фармакологічної активності вибрано об'єм сечі дослідних тварин, яка розрахована у відсотках у порівнянні з контролем. Результати вивчення діуретичної дії сполуки 1, прототипу та гіпотіазиду наведені у таблиці 3. Таблиця 3 Діуретична активність сполуки 1 у порівнянні з прототипом та гіпотіазидом Сполука Сполука 1 Прототип Гіпотіазид Діуретична активність, в % к контролю 382 не виявляє 212 Як видно за даними таблиці 3, сполука 1 за діуретичною дією перевищує гіпотіазид у 1,8 рази. Прототип даних фармакологічних властивостей в умовах експерименту не виявив. Приклад 5. Визначення протигрибкової активності проводилось у дослідах in vitro за відомою методикою [Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Под ред. М.О.Бригера, -3-е изд. перераб. и доп. -М.: Медицина, 1982. -462с.]. Дня вирощування грибів використовувалось середовище Сабуро (рН=6,5-6,7). Навантаження DL50, мг/кг >5000 >2700 320 складало 500-600 репродуктивних тілець штамів Candida albicans в 1мл середовища. Протигрибкову дію оцінювали за мінімальною мікостатичною концентрацією (ММК), вираженою в мкг/мл. Результати вивчення протигрибкової активності та токсичності 6-нітро-N-(2'-карбокси-4'хлорфеніл)антранілової кислоти (сполука 1) у порівнянні з 3,5-динітро-2-N-(3'-хлорфеніл)антаніловою кислотою (прототип) та фурациліном наведені в таблиці 4. Таблиця 4 Протигрибкова активність та токсичність сполуки 1, прототипу та фурациліну Сполука Сполука 1 Прототип Фурацилін Штам Candida albicans, ММК (мкг/мл) 20,0 не виявляє 64,0 Як видно за результатами дослідження, наведеними у таблиці 4, сполука 1 інгібує ріст Candida albicans у концентрації у 3,2 рази меншій ніж фурацилін. Прототип не проявляє протигрибкову дію у відношенні Candida albicans. В результаті експерименту встановлено також, що заявлена сполука є менш токсичною, ніж наведений препарат порівняння та прототип. Таким чином заявлена сполука 6-нітро-N-(2'карбокси-4"'-хлорфеніл)- антранілова кислота проявляє широкий спектр фармакологічної дії: проти Комп’ютерна верстка В. Клюкін DL50, мг/кг >5000 >2700 82,5 запальну, аналгетичну, діуретичну та протигрибкову. За окремими видами активності вона перевищує дію натрію диклофінаку, анальгіну, гіпотіазиду та фурациліну. Крім того, собівартість одержання заявленої сполуки нижча за собівартість сполуки за прототипом. Заявлена сполука може знайти застосування у медичній практиці при створенні лікарських засобів у різних лікарських формах для лікування інфекційних та запальних процесів різної етіології, а також середньої сили больових синдромів. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601