6,9-діаміно-2-етоксіакридинію 3,5-динітро-n-(3′-хлорфеніл)антранілат, що виявляє антимікробну, протигрибкову,протизапальну, анальгетичну, діуретичну активність та потенціюючу дію у відношенні до бензилпеніцилін

6,9-діамшо-2-етоксіакридинію 3,5-динггро-г\І(З'-хлорфеніл)антранілат формули який виявляє антимікробну, протигрибкову, протизапальну, анальгетичну, діуретичну активність, потенціює дію бензилпеніциліну натрієвої солі у суббактерюстатичній КІЛЬКОСТІ головною дією етакридину лактату є антимікробна, фурациліну - протигрибкова, вольтарену - протизапальна, анальгіну - анальгетична, ппатіазиду діуретична Запропонована сполука 6,9-діамшо-2етоксиакридинію 3,5-динггро-М-(3'хлорфеніл)антранілат перевищує антимікробну активність етакридииу лактат та прототип у відношенні тест-мікроорганізмів, а також проявляє протигрибкову, протизапальну, анальгетичну та діуретичну дію сильніше ніж препарати (фурацилін, вольтарен, анальгін, ппотіазид) та прототип, який фунпстатичного, анальгетичного та діуретичного ефекту не проявляє В основу винаходу поставлене завдання по створенню нової хімічної сполуки, що проявляє високу антимікробну, протигрибкову, протизапальну, анальгетичну, діуретичну активність та потенціюючу дію у відношенні до бензилпеніціліну натрієвої СОЛІ Речовина, яка заявляється, утворена взаємодією 6,9-діамшо-2-етоксиакридина та 3,5-динітрог\|-(3'-хлорфеніл)антраніловоі кислоти у етанольному середовищі 6,9-діамшо-2-етоксиакридиній 3,5-динггро-г\І(З'-хлорфеніл)антранілат жовтого кольору, розчинний у воді (1 80), етанолі, ДМСО, ДМФА Будова сполуки підтверджена за допомогою елемен 00 00 со о ю 50388 тного аналізу та ІЧ-спектроскопм, а індивідуальність - методом тонкошарової хроматографії Винахід ілюструється наступним прикладом Приклад №1 2,53г (0,01 моль) 6,9-діамшо-2етоксиакридину розчиняють при нагріванні у 15мл етанолу (розчин №1), 3,38г (0,01 моль) 3,5-динітро|\|-(3'-хлорфеніл)антранілову кислоту розчиняють у Юмл етанолу (розчин №2) Потім розчин №1 та №2 змішують Осад, випав відфільтровують, промивають водою та сушать Вихід 5,54Г (94%), Т пл 264 - 266°С, М м 590, 978 Бруто-формула C28H23CIN6O7 Розраховано С, % 56,91, N, % 14,22, Н, % 3,92 Знайдено С, % 56,99, N, % 14,32, Н, % 3,86 ІЧ-спектр у КВг, см 1 3376, 3232, 3000, 2784, 1632, 1612, 1588, 1520, 1512, 1496, 1416, 1320, 1232, 1168, 1144, 1116, 1080, 1048, 928, 832, 800, 768, 744, 720, 568 Rf 0,46 (етанол-хлороформ-гексан 2 1 1 ) Приклад №2 Визначення антимікробної активності проводилося за методом двократних серійних розведень у рідких поживних середовищах (Навашин С И , Фомина И П Рациональная антибиотикотерапия М Медицина, 1982 - С 40 - 42) Для культивування бактерій використовувався амінопептид, попередньо розведений у два рази дистильованою водою, рН 7,2 Мікробне навантаження склало 105-106 мікробних тіл в 1мл середовища Для випробування використовувалися 8 штамів мікроорганізмів Результати вивчення антимікробної активності та токсичності 6,9-діамшр-2етоксиакридинію 3,5-динітро-г\І-(3'хлорфеніл)антранілату (сполука №1), 6,9-діамшо2-етоксиакридинію 2-г\І-(3'-нггрофеніл)антранілату - прототипу та етакридину лактату описані у таблиці 1 Таблиця 1 ю ю "о "о ел ел "ел "ел о со со" со" Антимікробна (бактеріостатична та бактерицидна) активність і токсичність сполуки №1, прототипу та етакридину лактату МПК , , _ (МКГ/МЛ) Сполука МБК DI_50, МГ/КГ 1 2 3 4 5 6 7 8 2,8 2,8 №1 7,8 31,2 10,0 12,5 >4800 2,8 2,8 3,9 3,9 3,9 Прототип 4300 — 3,9 3,9 3,9 Етакридину лактат 31,2 15,6 31,2 62,5 125 250 125 250 21* * - Штами мікроорганізмів 1 Staphylococcus aureus, шт АТСС 25923, 5 Salmonella choleraesuis, 2 Echenchia cofi, nrr ATCC 7241, 6 Sa]monella thyphimunum, 3 Bacillus subtihs, шт ATCC 25922, 4 Pseudomonas aerugrnosa, шт ATCC 27853, 5 Salmonella choleraesuis, 6 Salmonella thyphimunum, 7 Salmonella thyphisms, 8 Salmonella dublm Як видно за даними таблиці 1, сполука №1 активніше етакридину лактату у відношенні до стафілококу та сінної палички у 11,14 рази, у відношенні до кишкової палички у 6,24 рази, у відношенні до палички сине-зеленого гною у 16,44 рази та у відношенні до мікроорганізмів роду Salmonella у 8 - 20 разів Сполука №1 проявляє також бактерицидний ефект у відношенні золотистого стафілококу, сінної, кишкової, синьогнійної паличок (МБК = 2,5 - 3,8) Сполука №1 також перевищує подібні характеристики прототипу Приклад №3 Визначення протигрибкової активності проводилось за відомою методикою (Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Под ред М О Бригера, - 3-е изд перераб и доп - М Медицина, 1982 -462с) Для вирощування грибів використовувалось середовище Сабуро (рН = 6,5 - 6,7) Навантаження складало 500 - 600 репродуктивних тілець штаму Candida albicans в 1мл середовища Протигрибкову дію оцінювали за мінімальною мікостатичною концентрацією (ММК), яка була виражена в мкг/мл Результати вивчення протигрибкової активності та токсичності токсичності 6,9-діамшо-2етоксиакридинію 3,5-динггро-М-(3'хорфеніл)антранілату (сполука №1) та фурациліну наведені в таблиці 2 Таблиця 2 Протигрибкова активність та токсичність сполуки №1, прототипу та фурациліну Сполука Сполука №1 Прототип Фурацилін ММК (мкг/мл) ЗО Протигрибкову активність не виявляє 64 DLso (внутрішньо очеревинно) мг/кг 1020 970 82,5 Як видно за даними таблиці 2, сполука №1 ш 50388 пбує ріст Candida albicans в концентрації у 2,1 рази меншій ніж фурацилін Крім того, сполука №1 у 12,36 рази менш токсична ніж препарат порівняння Прототип подібну дію не проявляє зовсім Приклад №4 Вивчення протизапальної активності проводилося на моделі каррагеншового набряку (Яковлева Л В , Зупанец И А Использование модели каррагенинового отека у мышей при поиске противовоспалительных средств // Деп в УкрНИИНТИ 07 07 87 -№1908 - Ук 87) Результати вивчення протизапальної активності та токсичності 6,9-діаміно-2-еюксиакридгашо 3,5-динітро-г\І-(3'-хлорфеніл)антранілату (сполука №1), прототипу та вольтарену наведені в таблиці З проводили за методою Е Б Берхіна (Методы изучения действия новых химических соединений на функцию почек / Хим - фармац журн - 1977 - Т 11, №5 - С 3 - 11) на білих щурах лінії Вістар масою 120 - 160г Кожна серія складала з 7 тварин Сполуки вводили у дозі 50мг/кг у водному розчині із розрахунку Змл води на кожні 100г ваги тварини Сечу збирали кожну годину протягом 4 годин Результати вивчення діуретичної дії сполуки №1, прототипу та ппотіазиду приведені у таблиці 5 Таблиця 5 Діуретична активність сполуки №1, прототипу та ппотіазиду Таблиця З Протизапальна активність сполуки №1, прототипу та вольтарену Відносний DE50, DL50, Терапевтичний ТІ по вомг/кг мг/кг індекс (ТІ) льтарену > Сполука 6,25 768 17,07 №1 4800 Прототип 9,0 4300 477,8 10,62 Вольтарен 8,0 360 45 1 Сполука Як видно за даними таблиці 3, сполука №1 має виражену протизапальну дію, по широті терапевтичного ефекту перевищує вольтарен у 17,07 рази, а прототип у 1,6 рази Приклад №5 Вивчення анальгетичної активності 6,9-діамшо-2-етоксиакридинію 3,5-динггро-г\І(З'-хлорфеніл)антранілату (сполука №1) проводилося за методом «оцтових корчей» у білих лабораторних щурів масою 150 - 180г Корчі були викликані внутрішньобрюшиним введенням 0,75% оцтової кислоти у дозі 1мл на 100г маси тіла тварини Підрахунок КІЛЬКОСТІ корчей проводили через 15 хвилин після введення розчину оцтової кислоти протягом ЗО хвилин Результати вивчення анальгетичної активності та токсичності сполуки №1 у порівнянні з прототипом та анальгіном наведені в таблиці 4 Таблиця 4 Анальгетична активність та токсичність сполуки №1, прототипу та анальгіну Сполука Відносний DE50, DL50, Терапевтичний ТІ по мг/кг мг/кг індекс (ТІ) анальгіну Сполука 20,6 >4800 233 10,69 №1 Прототип Анальгетичну активність не виявляє Анальгін 55 1197 21,8 1 Як видно за даними таблиці 4, сполука №1 по ширині терапевтичної дії перевищує анальгін в 10,69 рази Прототип подібну дію не виявляє зовсім Приклад №6 Вивчення діуретичної активності Сполука Сполука №1 Прототип Гіпотіазид Діуретична активність, в % кконтролю 242 Діуретичігу активність не виявляє 200 Як видно за даними таблиці 6, сполука №1 за діуретичною дією перевищує гіпотіазид на 42%, а прототип подібну дію не виявляє Приклад №7 Визначення потенціюючої дії 6,9діамшо-2-етоксиакридинію 3,5-динггро-М-(3'хлорфеніл)антранілату (сполука №1) проводилося у суббактерюстатичній концентрації у якості мікродобавки до бензилпеніциліну натрієвої солі Тестмоделлю були серійні двократні розведення в рідкому живильному середовищі Як розчинник використовувалася вода для ІН'ЄКЦІЙ Результати описаного мікробіологічного дослідження наведені в таблиці 6 Таблиця 6 Потенціююча дія сполуки №1 у відношенні до бензилпеніциліну натрієвої солі Сполука Бензилпеніциліну натрієва сіль (БПН) (БПН) + сполука №1 Штам мікроорганізмів, МПК (мкг/мл) Золотистий Синьогнійна стафілокок паличка 0,9 15,6 0,4 2,5 Як видно за даними таблиці 6, сполука №1 в суббактерюстатичній концентрації підвищує активність антибіотика у відношенні до золотистого стафілококу в 2,25 рази, у відношенні до синьогнійпої палички в 6,29 рази Таким чином 6,9-діамшо-2-етоксиакридинію 3,5-динггро-М-(3'-хлорфеніл)антранілат проявляє комплексну біологічну дію (антимікробну, протигрибкову, протизапальну, анальгетичну, діуретичну), за активністю перевищує етакридину лактат, фурацилін, вольтарен, анальгін, гіпотіазид та виявляє потенціюючу дію у відношенні до бензилпеніциліну натрієвої солі 7 50388 8 Заявлена сполука може знайти застосування у запальних процесів різної етіології, а також середмедичній практиці при лікування інфекційних та ньої сили больових синдромів ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71