4-хлор -n-(2′-карбокси-4′-бромфеніл) антранілова кислота, що проявляє протизапальну, аналгетичну, діуретичну та протигрибкову активність

4-Хлор-N-[-(2'-карбокси-4'бромфеніл)антранілова кислота формули: Винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема, до синтезу 4-хлор-N-(2'карбокси-4'-бромфеніл)-антранілової кислоти, яка проявляє протизапальну, анальгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. Пошук нових засобів з широким спектром фармакологічної дії є актуальною проблемою сучасної медицини. Відомий цілий ряд лікарських засобів синтетичного походження, кожен з яких має свою домінуючу дію: фурацилін (протигрибкова дія), натрію диклофенак (протизапальна дія), анальгін (анальгетична дія), гіпотіазид (діуретична дія) (Машковский М.Д. Лекарственные средства. -Μ.: ΟΟΟ "Издательство Новая Волна", 2006. - С.852, 170, 159, 499). До недоліків зазначених засобів можна віднести, зокрема, наявність у тій чи іншій мірі негативної побічної дії. У комплексному лікуванні виникає необхідність призначення хворому одночасно декілька лікарських засобів з моноспрямованою фармацевтичною дією, внаслідок чого загальна побічна дія підсилюється. За прототип обрана - 3,5-динітро-2-N-(3'хлорфеніл)антранілова кислота, яка проявляє протизапальну, анальгетичну та діуретичну активність (Деклараційний патент на винахід №65875А (Україна) МПК: С07С229/58, А61К31/195. Заявлено 17.06.2003. Опубліковано 15.04.2004. Бюлетень №4). Сполука за прототипом має широкий спектр дії, проте ступінь фармацевтичної активності та N H (19) UA (11) 87876 COOH , що проявляє протизапальну, аналгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. C2 Cl Br (13) COOH 3 87876 спектр дії може бути реально підвищений та розширений. В основу винаходу поставлене завдання по створенню нової хімічної сполуки, що проявляє підвищену протизапальну, анальгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. Поставлене завдання вирішується шляхом синтезу нової індивідуальної хімічної сполуки 4-хлорN-(2'-карбокси-4'-бромфеніл)антранілової кислоти формули: яка проявляє протизапальну, анальгетичну, діуретичну та протигрибкову активність. Речовина, яка заявляється, утворена взаємодією 2,4-дихлорбензойної кислоти та 2-аміно-5бромантранілової кислоти у присутності калію карбонату та міді оксиду при нагріванні реакційної суміші до 180-220°С без розчинників. 4-хлор-N-(2'-карбокси-4'бромфеніл)антранілова кислота - порошок блакитно-зеленого кольору, погано розчинний у воді, гексані, добре розчинний в етанолі, діоксані, ДМСО, ДМФА. Будова сполуки підтверджена за допомогою елементного аналізу та ІЧспектроскопії, а індивідуальність - методом тонкошарової хроматографії. Винахід ілюструється наступними прикладами: Приклад 1 Суміш 1,91г (0,01моль) 2,4-дихлорбензойної кислоти, 2,16г (0,01моль) 2-аміно-5бромантранілової кислоти, 2,76г (0,02моль) безводного калію карбонату, 0,010г (0,0005моль) міді оксиду нагрівають при температурі 180-200°С про 4 тягом 2 годин. Після охолодження до реакційної маси додають 15мл 50% водного етанолу із активованим вугіллям, кип'ятять 15 хвилин та швидко фільтрують крізь складчастий фільтр. Фільтрат підкислюють кислотою хлористоводневою до рН~3. Осад, який випав, відфільтровують, промивають водою та сушать. Вихід 3,33г (90%), Тпл. 239-240°С, М.м. 370,57 Бруто-формула: C14H9BrClNO4 Розраховано: С, % 45,38; N, % 3,78 Знайдено: С, % 45,38; N, % 3,84 ІЧ-спектр у KВr, см-1: 3310,1684,1596,1570,1236,542. Rf: 0,64 (ацетон-гексан 1:1); Rf: 0,65 (ацетондіоксан 1:1). Приклад 2 Вивчення протизапальної активності заявленої сполуки проводилося на моделі каррагенінового набряку у мишей (Яковлева Л.В., Зупанец И.А. Использование модели каррагенинового отека у мышей при поиске противовоспалительных средств // Деп. в УкрНИИНТИ 07.07.87. - №1908. Ук.87). В якості критеріїв фармакологічної активності вибрано ізоефективна доза (DE50), при якій фармакологічний ефект набуває 50% випадків у експериментальній групі тварин; рівень гострої токсичності (DL50); терапевтичний індекс ТІ (показник відношення DL50/DE50); відносний терапевтичній індекс. Результати вивчення протизапальної активності та токсичності 4-хлор-N-(2'-карбокси-4'бромфеніл)антранілової кислоти (сполука 1) у порівнянні з 3,5-динітро-2-N-(3'хлорфеніл)антраніловою кислотою (прототип) та натрію диклофенаком наведені в таблиці 1. Таблиця 1 Протизапальна активність та токсичність сполуки 1 у порівнянні з прототипом та натрію диклофенаком Сполука Сполука 1 Прототип Натрію диклофенак DE50, мг/кг 7,2 10,4 8,0 DL50, мг/кг >4500 >2700 360 Терапевтичний індекс (ТІ) >625,0 >259,6 45,0 Як видно за даними таблиці 1, сполука 1 має виражену протизапальну активність, за широтою терапевтичного ефекту перевищує натрію диклофенак у 13,88 рази, а прототип у 2,4 рази. Приклад 3 Вивчення аналгетичної активності 4-хлор-N(2'-карбокси-4'-бромфеніл)антранілової кислоти (сполука 1) проводилося за методом «оцтових корчей» у білих лабораторних щурів масою 150180г. Корчі були викликані внутрішньочеревним введенням 0,75% оцтової кислоти у дозі 1мл на 100г маси тіла тварини. Підрахунок кількості кор Відносний ТІ по вольтарену 13,88 5,7 1 чей проводили через 15 хвилин після введення розчину оцтової кислоти протягом 30 хвилин. В якості критеріїв фармакологічної активності вибрано ізоефективна доза (DE50), при якій аналгетичний ефект набуває 50% випадків у експериментальній групі тварин; рівень гострої токсичності (DL50); терапевтичний індекс (ТІ); відносний терапевтичній індекс. Результати вивчення аналгетичної активності та токсичності сполуки 1 у порівнянні з прототипом та анальгіном наведені в таблиці 2. 5 87876 6 Таблиця 2 Аналгетична активність та токсичність сполуки 1 у порівнянні з прототипом та анальгіном Сполука Сполука 1 Прототип Анальгін DE50, мг/кг 7,5 14,1 55 DL50, мг/кг >4500 >2700 1197 Як видно за даними таблиці 2, сполука 1 за широтою терапевтичної дії перевищує анальгін в 27,57 рази, а прототип у 3,14 рази. Приклад 4 Вивчення діуретичної активності проводили за методою Е.Б.Берхіна (Методы изучения действия новых химических соединений на функцию почек / Хим. -фармац. журн. -1977. -Т.11, №5. -С.3-11.) на білих щурах лінії Вістар масою 120-160г. Кожна серія складалася з 7 тварин. Кожну з досліджених сполук вводили у дозі 50мг/кг у водному розчині із розрахунку 3мл води на кожні 100г ваги тварини. Сечу збирали кожну годину протягом 4 годин. В якості критерію фармакологічної активності вибрано об'єм сечі дослідних тварин, яка розрахована у відсотках у порівнянні з контролем. Результати вивчення діуретичної дії сполуки 1, прототипу та гіпотіазиду наведені у таблиці 3. Таблиця 3 Діуретична активність сполуки 1 у порівнянні з прототипом та гіпотіазидом Сполука Сполука 1 Прототип Гіпотіазид Діуретична активність, в % к контролю 362 не виявляє 212 DL50, мг/кг >4500 >2700 320 Як видно за даними таблиці 3, сполука 1 за діуретичною дією перевищує гіпотіазид у 1,7 рази. Прототип даних фармакологічних властивостей в умовах експерименту не виявив. Приклад 5. Визначення протигрибкової активності проводилось у дослідах in vitro за відомою методикою (Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Под ред. М.О.Бригера, -3-е изд. перераб. и доп. -М.: Медицина, 1982. - 462с). Для вирощування грибів використовувалось середовище Сабуро (рН=6,5-6,7). Навантаження складало 500-600 репродуктивних тілець штамів Комп’ютерна верстка Т. Чепелева Терапевтичний індекс (ТІ) 600,00 191,49 21,76 Відносний ТІ по анальгіну 27,57 8,78 1 Candida albicans в 1мл середовища. Протигрибкову дію оцінювали за мінімальною мікостатичною концентрацією (ММК), вираженою в мкг/мл. Результати вивчення протигрибкової активності та токсичності 4-хлор-N-(2'-карбокси-4'бромфеніл)антранілової кислоти (сполука 1) у порівнянні з 3,5-динітро-2-N-(3'хлорфеніл)антраніловою кислотою (прототип) та фурациліном наведені в таблиці 4. Таблиця 4 Протигрибкова активність та токсичність сполуки 1, прототипу та фурациліну Сполука Сполука 1 Прототип Фурацилін Штам Candida albicans, DL50, мг/кг ММК (мкг/мл) 25,0 >4500 не виявляє >2700 64,0 82,5 Як видно за результатами дослідження, наведеними у таблиці 4, сполука 1 інгібує ріст Candida albicans у концентрації у 2,56 рази меншій ніж фурацилін. Прототип не проявляє протигрибкову дію у відношенні Candida albicans. В результаті експерименту встановлено також, що заявлена сполука є менш токсичною, ніж наведений препарат порівняння та прототип. Таким чином заявлена сполука 4-хлор-N-(2'карбокси-4'-бромфеніл)- антранілова кислота проявляє широкий спектр фармакологічної дії: протизапальну, аналгетичну, діуретичну та протигрибкову. За окремими видами активності вона перевищує дію натрію диклофінаку, анальгіну, гіпотіазиду та фурациліну. Крім того, собівартість одержання заявленої сполуки нижча за собівартість сполуки за прототипом. Заявлена сполука може знайти застосування у медичній практиці при створенні лікарських засобів у різних лікарських формах для лікування інфекційних та запальних процесів різної етіології, а також середньої сили/больових синдромів. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601