Спосіб селективного виявлення первинних, вторинних та третинних аліфатичних амінів

Спосіб селективного виявлення первинних, вторинних та третинних аліфатичних амінів, що 3 89862 винних, вторинних та третинних аліфатичних амінів, що включає отримання їх четвертинних Nхлорамонієвих основ шляхом обробки проби розчином натрію гіпохлориту в розчині натрію гідрокарбонату, видалення надлишку натрію гіпохлориту, обробку відновником та встановлення наявності аліфатичних амінів за утворенням забарвлених продуктів, винаходом передбачено, що пробу наносять на лінію старту хроматографічної пластини, видалення надлишку натрію гіпохлориту проводять шляхом елюювання у системі розчинників, як відновник використовують 1% розчин nамінодіетиланілінсульфату, а наявність аліфатичних амінів встановлюють за значеннями Rf отриманих забарвлених плям. Згідно з заявленим способом елюювання проводять послідовно у два етапи з використанням систем розчинників хлороформ-метанол (9:1) та гексан-діетиловий етер (2:1) відповідно. Заявлений спосіб ґрунтується на отриманні четвертинних N-хлорамонієвих основ при обробці проби розчином натрію гіпохлориту в розчині натрію гідрокарбонату за наступною схемою: R1 R2 N + NaClO + NaHCO3 R3 + R1 R2 N Cl OH + Na2CO3 R3 де R1=Н або Alk, R2=Н або Alk, R3=Alk Виявлення первинних, вторинних та третинних аліфатичних амінів у заявленому способі проводиться з використанням методу реакційної (деривативної) хроматографії у тонкому шарі сорбенту, який передбачає, у даному випадку, отримання деривату досліджуваної речовини (четвертинної N-хлорамонієвої основи) та встановлення його Rf після елюювання у відповідній системі розчинників та проявлення відповідним проявником (відновником - 1% розчином n-амінодіетиланілінсульфату). Використання як проявника (відновника) 1% розчину n-амінодіетиланілінсульфату дозволяє отримати плями, що не розмиваються з часом. Експериментальним шляхом встановлено, що надлишок розчину натрію гіпохлориту (0,5г/л активного хлору) в 6% розчині натрію гідрокарбонату в умовах проведення заявленого способу не заважає виявленню аліфатичних амінів, оскільки 1% розчином n-амінодіетиланілінсульфату він проявляється на пластинах повільно (протягом 10 хви 4 лин), має блідо-фіолетове забарвлення (на відміну від яскраво-рожевого для цільових речовин) та його плями завжди знаходяться після елюювання на лінії старту хроматографічної пластини. Заявлений спосіб здійснюють наступним чином: на лінії старту двох хроматографічних пластин наносять у точку пробу з вірогідним вмістом будь-якого аліфатичного аміну або суміші амінів, після чого у точки вводять розчин натрію гіпохлориту (0,5г/л активного хлору) у 6% розчині натрію гідрокарбонату з метою отримання відповідних четвертинних N-хлор-амонієвих основ. Після висушування плям пластини елююють в системах розчинників хлороформ - метанол (9:1) та гексан діетиловий етер (2:1) відповідно. Після елюювання пластини обробляють 1% розчином n-амінодіетил-анілінсульфату. При цьому утворюються плями, забарвлені в яскраворожевий колір, для яких встановлюють значення Rf, та ідентифікують первинні, вторинні та третинні аліфатичні аміни за їх стандартними зразками. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. З використанням заявленого способу проводили встановлення наявності аліфатичних аміногруп у ряді лікарських речовин, що містять у своїй структурі аліфатичну аміногрупу. У досліді готували розчини донормілу, димедролу, зопіклону, кодеїну, кокаїну, амфетаміну, метамфетаміну, трамадолу в етанолі з концентрацією 1мг/мл. На лінії старту двох хроматографічних пластин Sorbfil ПТСХ-1А (силікагель СТХ-1А, тип підложки ПЕТФ, зв'язуюча речовина - силіказоль, фракція 12÷15мкм, товщина шару - 100мкм) наносили по 1мкл вищезазначених розчинів речовин. Після висушування проб при кімнатній температурі у точки вводили по 2мкл розчину натрію гіпохлориту (0,5г/л активного хлору) в 6% розчині натрію гідрокарбонату, висушували плями та елюювали пластини в системах розчинників хлороформ - метанол (9:1) та гексан - діетиловий етер (2:1) відповідно. Після елюювання пластини висушували та обробляли 1% розчином n-амінодіетиланілінсульфату. При цьому спостерігали утворення плям, забарвлених в яскраво-рожевий колір, для яких встановлювали значення Rf (табл.). Таблиця. Значення Rf плям четвертинних N-хлорамонієвих основ для досліджених речовин в використаних системах розчинників Речовина донорміл димедрол зопіклон кодеїн кокаїн амфетамін метамфетамін трамадол Значення Rf у системі розчинників хлороформ-метанол (9:1) гексан-діетиловий етер (2:1) 0,84 0,35 0,85 0,64 0,82 0,00 0,87 0,00 0,85 0,43 0,84 0,54 0,82 0,62 0,84 0,19 5 89862 За значеннями Rf для першої системи розчинників встановлено, що всі досліджені сполуки містять аліфатичні аміногрупи (в системі розчинників хлороформ - метанол (9:1) плями четвертинних Nхлорамонієвих основ для будь-яких аліфатичних амінів потрапляють в зону з Rf=0,8-0,9). Значення Rf для другої системи розчинників при порівнянні їх із значеннями Rf для відповідних стандартних зразків дозволили зробити висновок, що в пробах містяться саме зазначені речовини з відповідними їх структурі аліфатичними аміногрупами. Мінімальна кількість аліфатичних амінів у пробі, що може бути визначена за допомогою заявленого способу становить 0,05мкг. Приклад 2. З використанням заявленого способу проводили встановлення наявності аліфатичних аміногруп у ряді органічних речовин, що не містять у своїй структурі аліфатичної аміногрупи. У досліді готували розчини феназепаму, нітразепаму, діазепаму, анестезину, піридину в етанолі з концентрацією 1мг/мл. На лінії старту двох хроматографічних пластин Sorbfil ПТСХ-1А наносили по 1мкл вищезазначених розчинів речовин. Після висушування проб при кімнатній температурі в точки вводили розчин на Комп’ютерна верстка Н. Лиcенко 6 трію гіпохлориту (0,5г/л активного хлору) в 6% розчині натрію гідрокарбонату, висушували плями та елюювали пластини в системах розчинників хлороформ - метанол (9:1) та гексан - діетиловий етер (2:1) відповідно. Після елюювання пластини висушували та обробляли 1% розчином nамінодіетиланілінсульфату. При цьому в обох системах розчинників для всіх речовин спостерігали повільну (протягом 10 хвилин) появу блідофіолетового забарвлення (подібно до натрію гіпохлориту). При цьому значення Rf дорівнюють 0, що дозволяє зробити висновок про відсутність аліфатичних аміногруп у структурі досліджених речовин. Таким чином, заявлений спосіб виявлення первинних, вторинних та третинних аліфатичних амінів є селективним для виявлення зазначеної групи речовин, має високу чутливість та є експресним. Заявлений спосіб з використанням стандартних зразків дає можливість з високою точністю ідентифікувати різні групи аліфатичних амінів. Спосіб може бути застосований для якісного визначення первинних, вторинних та третинних аліфатичних амінів у хімічному, фармацевтичному та хіміко-токсикологічному аналізі, зокрема у роботі контрольно-аналітичних та хімікотоксикологічних лабораторій. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601