Стабілізований препарат, що містить антитіло проти ngf

Реферат: Винахід належить до фармацевтичного препарату, який включає антитіло людини, яке специфічно зв'язується з фактором росту нервів людини (hNGF). Препарат містить також, принаймні одну неіонну поверхнево-активну речовину, принаймні один цукор і ацетат. Фармацевтичний препарат за винаходом демонструє більшу стабільність антитіла після збереження протягом декількох місяців. UA 111825 C2 (12) UA 111825 C2 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ Даний винахід стосується галузі препаратів терапевтичних антитіл. Конкретніше, даний винахід стосується галузі фармацевтичних препаратів, які включають антитіло людини, яке специфічно зв'язується з фактором росту нервів (NGF) людини. ПЕРЕДУМОВИ СТВОРЕННЯ ВИНАХОДУ Терапевтичні макромолекули (наприклад, антитіла) повинні приготовлятися у вигляді лікарського препарату способом, який не тільки робить молекули відповідними для введення пацієнтам, але також зберігає їх стабільність під час зберігання. Наприклад, терапевтичні антитіла в рідкому розчині схильні до деградації, агрегації і/або небажаних хімічних модифікацій крім випадків, коли розчин приготований належним чином. Стабільність антитіла в рідкому препараті залежить не тільки від типів наповнювачів, які використовуються в препараті, але також від кількостей і пропорцій наповнювачів відносно один одного. Крім того, при приготуванні рідкого препарату антитіла повинні враховуватися інші фактори крім стабільності. Приклади таких додаткових факторів, які враховуються включають в'язкість розчину і концентрацію антитіла, яку може вміщати конкретний препарат. Таким чином, при приготуванні терапевтичного антитіла у вигляді лікарського препарату необхідно дуже потурбуватися про отримання препарату, який залишається стабільним, містить відповідну концентрацію антитіла і має відповідну в'язкість, а також інші властивості, які роблять можливим зручне введення препарату пацієнтам. Антитіла проти фактора росту нервів людини (hNGF) є одним прикладом терапевтично релевантних макромолекул, для яких потрібне належне приготування. Антитіла проти NGF клінічно застосовні для лікування і/або попередження таких захворювань, як остеоартрит, ішіалгії і інших станів, таких як біль запального походження, невропатичний біль і раковий біль. Хоча антитіла проти NGF відомі, в даній галузі техніки зберігається потреба в нових фармацевтичних препаратах, які включають антитіла проти hNGF, які є в достатній мірі стабільними, а також підходять для введення пацієнтам. КОРОТКИЙ ВИКЛАД СУТІ ВИНАХОДУ Даний винахід задовольняє вищезазначену потребу внаслідок забезпечення фармацевтичних препаратів, які включають антитіло людини, яке специфічно зв'язується з фактором росту нервів людини (hNGF). Препарати даного винаходу можуть включати наповнювачі крім антитіла проти hNGF. Наприклад, в деяких варіантах здійснення препарат може включати (i) антитіло людини, яке специфічно зв'язується з hNGF; (ii) неіонну поверхневоактивну речовину і (iii) принаймні один вуглевод. Неіонна поверхнево-активна речовина може вибиратися з групи, яка складається з полісорбату 20, полісорбату 80, поліоксіетиленсорбітанмоноолеату і поліетиленгліколю. В одному варіанті здійснення неіонною поверхнево-активною речовиною є полісорбат 20. Вуглеводом може бути цукор, такий як, наприклад, сахароза, глюкоза, маніт, сорбіт, лактоза або трегалоза. В одному варіанті здійснення цукром є сахароза. В одному варіанті здійснення фармацевтичний препарат включає (i) приблизно 0,1-100 мг/мл антитіла людини, яке специфічно зв'язується з hNGF; (ii) приблизно 0,01-1,0% полісорбату 20 і (iii) приблизно 1-20% сахарози. В одному варіанті здійснення фармацевтичний препарат включає (i) приблизно 0,2-75 мг/мл антитіла людини, яке специфічно зв'язується з hNGF; (ii) приблизно 0,02-0,5% полісорбату 20 і (iii) приблизно 5-10% сахарози. В одному варіанті здійснення фармацевтичний препарат включає (i) приблизно 0,6-60 мг/мл антитіла людини, яке специфічно зв'язується з hNGF; (ii) приблизно 0,05% полісорбату 20 і (iii) приблизно 8% сахарози. У деяких варіантах здійснення фармацевтичний препарат, крім того, включає від приблизно 1,0 мМ до приблизно 50 мМ ацетату. В одному варіанті здійснення фармацевтичний препарат включає (i) приблизно 1-100 мг/мл антитіла людини, яке специфічно зв'язується з hNGF; (ii) приблизно 0,01-1,0% полісорбату 20 і (iii) приблизно 1-20% сахарози. У деяких варіантах здійснення фармацевтичний препарат, крім того, включає від приблизно 1,0 мМ до приблизно 50 мМ ацетату. В одному варіанті здійснення фармацевтичний препарат включає (i) приблизно 5-75 мг/мл антитіла людини, яке специфічно зв’язується з hNGF; (ii) приблизно 0,02-0,5% полісорбату 20; (iii) приблизно 5-10% сахарози і (iv) приблизно 5-20 мМ ацетату. В одному варіанті здійснення фармацевтичний препарат включає (i) приблизно 6-60 мг/мл антитіла людини, яке специфічно зв’язується з hNGF; (ii) приблизно 0,05% полісорбату 20; (iii) приблизно 8% сахарози і (iv) приблизно 10 мМ ацетату. 1 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 У деяких варіантах здійснення препарат може також містити принаймні одну амінокислоту, наприклад гістидин або аргінін. У деяких здійсненнях концентрація гістидину або аргініну може коливатися від приблизно 25 мМ до приблизно 100 мМ. Стосовно деяких варіантів здійснення даного винаходу препарат готують в буфері, який здатний до збереження pH в діапазоні від приблизно 4,5 до приблизно 5,6, наприклад, в ацетатному буфері. У деяких варіантах здійснення даного винаходу фармацевтичний препарат демонструє в'язкість, яка складає менше ніж приблизно 15 сантипуаз, або менше ніж приблизно 12 сантипуаз, або менше ніж приблизно 9 сантипуаз. Антитілом, яке міститься в фармацевтичних препаратах даного винаходу, може бути будьяке антитіло або гібридний білок або пастка, яке(ий, а) специфічно зв'язується з hNGF. Антитілами, які приводяться як приклад, які можуть міститися в препаратах даного винаходу, є антитіла, які включають варіабельну область важкого ланцюга (HCVR) і варіабельну область легкого ланцюга (LCVR), причому HCVR включає ділянку 1, яка визначає комплементарність важкого ланцюга (HCDR1), яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 6, HCDR2, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 8, і HCDR3, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 10; а LCVR включає ділянку 1, яка визначає комплементарність легкого ланцюга (LCDR1), яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 14, LCDR2, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 16, і LCDR3, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 18. У деяких варіантах здійснення антитілом, яке міститься в препаратах даного винаходу, є антитіло, яке включає HCVR, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 20, і LCVR, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 22. У деяких варіантах здійснення антитілом, яке міститься в препаратах даного винаходу, є антитіло, яке включає HCVR, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 4, і LCVR, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 12. У деяких варіантах здійснення фармацевтичні препарати можуть вводитися внутрішньовенно або підшкірно пацієнту, який цього потребує. Відповідно, в деяких варіантах здійснення фармацевтичний препарат, який тут описується, може використовуватися для приготування лікарського засобу для лікування, попередження і/або зменшення інтенсивності будь-якого захворювання або розладу, пов'язаного з активністю NGF або активацією NGF. Які приводяться як приклад, не обмежуючі захворювання і розлади, лікування і/або попередження яких може здійснюватися за допомогою введення фармацевтичних препаратів даного винаходу, включають біль внаслідок будь-якого стану, який супроводжується нейрогенним, невропатичним або ноцицептивним болем. У деяких варіантах здійснення, які стосуються невропатичного болю, згадану невралгію трійникового нерва, постгерпетичну невралгію, фантомний біль в ампутованій кінцівці, фіброміалгію, симпатичну рефлекторну дистрофію і нейрогенні больові стани піддають лікуванню. В інших варіантах здійснення раковий біль, зокрема, пов'язаний з раком кістки біль, пов'язаний з остеоартритом або ревматоїдним артритом біль, поперековий біль, післяопераційний біль в місці розрізу, біль в місці перелому або розриву, біль при остеопоротичному переломі, остеопороз, суглобовий біль при подагрі, діабетичну нефропатію, ішіалгію, болі, пов'язані з кризами серпоподібних клітин, мігрень і інші невропатичні і/або ноцицептивні болі піддають лікуванню препаратами, які описуються тут. Препарати антитіл даного винаходу можуть міститися в будь-якому відповідному контейнері, застосовному для зберігання фармацевтичних препаратів. Приклади таких відповідних контейнерів включають, наприклад, скляні або пластмасові флакони, шприци і картриджи. Контейнер може бути прозорим або непрозорим (наприклад, янтарно-жовтого кольору). У деяких варіантах здійснення флакони або шприци покривають силіконом, наприклад, діоксидом кремнію. У деяких варіантах здійснення вільний простір у флаконах заповнюють інертним газом з витісненням будь-якого присутнього кисню, який може впливати шкідливим чином на стабільність антитіла. Такий інертний газ може вибиратися з азоту або аргону. Стосовно деяких аспектів даного винаходу фармацевтичні препарати залишаються відносно стабільними після зберігання протягом декількох днів, місяців або років при конкретній температурі. Наприклад, в деяких варіантах здійснення даного винаходу, які приводяться як приклад, високий відсоток антитіла (наприклад, 90%, 95%, 96% або більше) залишається в нативній формі після зберігання протягом принаймні 3, 6, 9 або більше місяців. Відсоткоий вміст нативної форми антитіла можна визначити, наприклад, за допомогою ексклюзійної HPLC, або за допомогою будь-якого іншого способу, відомого в даній галузі техніки. Температура зберігання, при якій зберігається стабільність антитіла, може складати, наприклад, -80 °C, -40 °C, -30 °C, 20 °C, 0 °C, 5 °C, 25 °C, 37 °C, 45 °C або вище. 2 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Інші варіанти здійснення даного винаходу стануть очевидними завдяки аналізу наступного докладного опису. ДОКЛАДНИЙ ОПИС ДАНОГО ВИНАХОДУ Перш ніж даний винахід буде описаний, потрібно зрозуміти, що цей винахід не обмежується описаними конкретними способами і експериментальними умовами, оскільки такі способи і умови можуть варіюватися. Також повинно бути зрозуміло, що термінологія, яка використовується тут, призначена лише для опису конкретних варіантів здійснення і, як передбачається, не є такою, яка обмежує, оскільки об'єм даного винаходу буде обмежуватися лише прикладеною формулою винаходу. Крім випадків, оговорених особливо, всі технічні і наукові терміни, які використовуються тут, мають значення, однакове з тим, в якому їх звичайно розуміє фахівець з середнім рівнем компетентності в галузі техніки, до якої належить цей винахід. Використований тут термін «приблизно», при використанні застосовно до конкретного викладеного чисельного значення, означає, що значення може відрізнятися від викладеного значення не більше ніж на 1%. Наприклад, як тут використовується, вираз «приблизно 100» включає 99 і 101 і всі значення між ними (наприклад, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4 і т.д.). Хоча при здійсненні на практиці або перевірці даного винаходу можуть використовуватися будь-які способи і матеріали, схожі з тими, які тут описані, або еквівалентні ним, тепер будуть описані переважні способи і матеріали. ФАРМАЦЕВТИЧНІ ПРЕПАРАТИ Як тут використовується, вираз «фармацевтичний препарат» означає комбінацію принаймні одного активного інгредієнта (наприклад, невеликої молекули, макромолекули, сполуки і т.д., яка здатна викликати біологічний ефект у людини або тварини, яка не є людиною) і принаймні одного неактивного інгредієнта, який, після об'єднання з активним інгредієнтом і/або одним або більше додаткових неактивних інгредієнтів, підходить для терапевтичного введення людині або тварині, яка не є людиною. Використовуваний тут термін «препарат» означає «фармацевтичний препарат» крім випадків, обумовлених особливо. Даним винаходом забезпечуються фармацевтичні препарати, які включають принаймні один терапевтичний поліпептид. Стосовно деяких варіантів здійснення даного винаходу терапевтичним поліпептидом є антитіло, яке специфічно зв'язується з фактором росту нервів людини (hNGF), або його антигензв’язуючий фрагмент. Конкретніше, даний винахід включає фармацевтичні препарати, які включають (i) антитіло людини, яке специфічно зв'язується з hNGF; (ii) неіонну поверхнево-активну речовину і (iii) принаймні один вуглевод. Конкретні компоненти і препарати, які приводяться як приклад, включені в даний винахід, описуються детальніше нижче. У деяких варіантах здійснення даного винаходу «поверхнево-активною речовиною» може бути неіонна поверхнево-активна речовина, вибрана з групи, яка складається з полісорбату 20, полісорбату 80, поліоксіетиленсорбітанмоноолеату і поліетиленгліколю. У деяких варіантах здійснення фармацевтичні препарати даного винаходу можуть бути текучими препаратами. Як тут використовується, вираз «текучий препарат» означає суміш з принаймні двох компонентів, яка знаходиться перевжно в текучому стані при температурі від приблизно 5 °C до приблизно 45 °C. Текучі препарати включають, серед іншого, рідкі препарати. Текучі препарати можуть бути з низькою, середньою або високою в'язкістю залежно від їх конкретних складових частин. АНТИТІЛА, ЯКІ СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЮТЬСЯ З hNGF Фармацевтичні препарати даного винаходу можуть включати антитіло людини, або його антигензв’язуючий фрагмент, яке(ий) специфічно зв'язується з hNGF. Використовуваний тут термін «hNGF» означає фактор росту нервів людини, який має амінокислотну послідовність, представлену в SEQ ID NO: 2, яка кодується послідовністю нуклеїнової кислоти, представленою в SEQ ID NO: 1. Використовуваний тут термін «антитіло», як звичайно мається на увазі, стосується молекул імуноглобулінів, які включають чотири поліпептидні ланцюги, два важкі (Н) ланцюги і два легкі (L) ланцюги, з’єднані за допомогою дисульфідних зв'язків, а також їх мультимерів (наприклад, IgM); однак у визначення терміну «антитіло» також включені молекули імуноглобулінів, які складаються тільки з важких ланцюгів (тобто в яких відсутні легкі ланцюги). Кожен важкий ланцюг включає варіабельну область важкого ланцюга (тут скорочено HCVR або V H) і константну область важкого ланцюга. Константна область важкого ланцюга включає три домени: CH1, CH2 і CH3. Кожен легкий ланцюг включає варіабельну область легкого ланцюга (тут скорочено LCVR або VL) і константну область легкого ланцюга. Константна область легкого ланцюга включає один домен (CL1). VH- і VL-області можна далі поділити на ділянки гіперваріабельності, які називаються визначальними комплементарність ділянками (CDR), 3 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 розподілені серед областей, які є більш консервативними, які називаються каркасними областями (FR). Кожна VH і VL складається з трьох CDR і чотирьох FR, розташованих від амінокінця до карбоксильного кінця в наступному порядку: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Крім випадків, обумовлених особливо, термін «антитіло», який використовується тут, як буде матися на увазі, охоплює повні молекули антитіл, а також їх антигензв’язуючі фрагменти. Використовуваний тут термін «антигензв’язуюча частина» антитіла, «антигензв’язуючий фрагмент» антитіла і т.п. включають будь-який, який зустрічається в природі, який ферментативно отримується, синтетичний або створений за допомогою методів генетичної інженерії поліпептид або глікопротеїн, який специфічно зв'язується з антигеном з утворенням комплексу. Використовуваний тут термін «антигензв’язуюча частина» антитіла або «фрагмент антитіла» стосуються одного або більше фрагментів антитіла, які зберігають здатність до специфічного зв’язування з hNGF. Використовуваний тут термін «виділене антитіло», як мається на увазі, стосується антитіла по суті без інших антитіл, які характеризуються відмінною специфічністю у відношенні антигенів (наприклад, виділене антитіло, яке специфічно зв'язується з hNGF, є антитілом по суті без антитіл, які специфічно зв'язуються з антигенами, відмінними від hNGF). Термін «специфічно зв'язується» або т.п. означає, що антитіло або його антигензв’язуючий фрагмент утворить комплекс з антигеном, який є відносно стабільним в фізіологічних умовах. Специфічне зв’язування може характеризуватися константною дисоціацією, яка складає -6 принаймні приблизно 110 M або менше. Способи визначення того, чи зв'язуються дві молекули специфічно, добре відомі в даній галузі техніки і включають, наприклад, рівноважний діаліз, поверхневий плазмонний резонанс і т.п. Однак виділене антитіло, яке специфічно зв'язується з hNGF, може мати перехресну реактивність з іншими антигенами, такими як молекули NGF інших видів. У контексті даного винаходу поліспецифічні (наприклад, біспецифічні) антитіла, які зв'язуються з hNGF, а також з одним або більше додаткових антигенів, як вважається, «специфічно зв'язуються» з hNGF. Крім того, виділене антитіло може по суті не містити інший клітинний матеріал і/або інші хімічні речовини. Які приводяться як приклад антитіла, які можуть бути включені в фармацевтичні препарати даного винаходу, викладені в заявці US 20090041717. Стосовно деяких варіантів здійснення даного винаходу антитіло проти hNGF, або його антигензв’язуючий фрагмент, включає визначальну комплементарність ділянку 1 важкого ланцюга (HCDR1), який має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 6, HCDR2, який має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 8, і HCDR3, який має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 10. Стосовно деяких варіантів здійснення даного винаходу антитіло проти hNGF, або його антигензв’язуючий фрагмент, включає визначальну комплементарність ділянку 1 легкого ланцюга (LCDR1), яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 14, LCDR2, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 16, і LCDR3, яка має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 18. У деяких варіантах здійснення антитіло проти hNGF, або його антигензв’язуючий фрагмент, включає домени HCDR1-HCDR2-HCDR3/LCDR1-LCDR2-LCDR3, які вибрані, відповідно, з групи, яка складається з SEQ ID NO: 6-8-10/SEQ ID NO: 14-16-18. У деяких варіантах здійснення антитіло проти hNGF, або його антигензв’язуючий фрагмент, включає варіабельну область важкого ланцюга (HCVR), яка має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з SEQ ID NO: 4 і 20. У деяких варіантах здійснення антитіло проти hNGF, або його антигензв’язуючий фрагмент, включає варіабельну область легкого ланцюга (LCVR), яка має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з SEQ ID NO: 12 і 22. У деяких варіантах здійснення антитіло проти hNGF, або його антигензв’язуючий фрагмент, включає пару амінокислотних послідовностей HCVR/LCVR, які вибрані з групи, яка складається з SEQ ID NO: 4/12 і 20/22. Антитіло, яке не обмежує, яке приводиться як приклад, яке використовується тут в прикладах, називають «мАт1». Це антитіло також згадується в US 20090041717 і включає, як описується тут, пару амінокислотних послідовностей HCVR/LCVR, яке має SEQ ID NO: 20/22, і домени HCDR1-HCDR2-HCDR3/LCDR1-LCDR2-LCDR3, представлені SEQ ID NO: 6-8-10/SEQ ID NO: 14-16-18. Кількість антитіла, або його антигензв’язуючого фрагмента, яка міститься в фармацевтичних препаратах даного винаходу, може варіювати залежно від конкретних бажаних властивостей препаратів, а також від конкретних обставин і цілей, з якими препарати мають намір використати. У деяких варіантах здійснення фармацевтичні препарати можуть містити від приблизно 0,01 мг/мл до приблизно 500 мг/мл антитіла; від приблизно 1 мг/мл до приблизно 500 4 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 мг/мл антитіла; від приблизно 5 мг/мл до приблизно 400 мг/мл антитіла; від приблизно 5 мг/мл до приблизно 200 мг/мл антитіла; від приблизно 25 мг/мл до приблизно 180 мг/мл антитіла; від приблизно 25 мг/мл до приблизно 150 мг/мл антитіла або від приблизно 50 мг/мл до приблизно 180 мг/мл антитіла. У деяких варіантах здійснення фармацевтичні препарати можуть містити від приблизно 0,1 мг/мл до приблизно 100 мг/мл антитіла, від приблизно 0,2 мг/мл до приблизно 75 мг/мл антитіла, від приблизно 0,6 мг/мл до приблизно 60 мг/мл антитіла. Наприклад, препарати даного винаходу можуть містити приблизно 0,1 мг/мл, приблизно 0,2 мг/мл, приблизно 0,6 мг/мл, приблизно 1 мг/мл, приблизно 2 мг/мл, приблизно 5 мг/мл, приблизно 10 мг/мл, приблизно 15 мг/мл, приблизно 20 мг/мл, приблизно 25 мг/мл, приблизно 30 мг/мл, приблизно 35 мг/мл, приблизно 40 мг/мл, приблизно 45 мг/мл, приблизно 50 мг/мл, приблизно 55 мг/мл, приблизно 60 мг/мл, приблизно 65 мг/мл, приблизно 70 мг/мл, приблизно 75 мг/мл, приблизно 80 мг/мл, приблизно 85 мг/мл, приблизно 86 мг/мл, приблизно 87 мг/мл, приблизно 88 мг/мл, приблизно 89 мг/мл, приблизно 90 мг/мл, приблизно 95 мг/мл, приблизно 100 мг/мл, приблизно 105 мг/мл, приблизно 110 мг/мл, приблизно 115 мг/мл, приблизно 120 мг/мл, приблизно 125 мг/мл, приблизно 130 мг/мл, приблизно 131 мг/мл, приблизно 132 мг/мл, приблизно 133 мг/мл, приблизно 134 мг/мл, приблизно 135 мг/мл, приблизно 140 мг/мл, приблизно 145 мг/мл, приблизно 150 мг/мл, приблизно 155 мг/мл, приблизно 160 мг/мл, приблизно 165 мг/мл; приблизно 170 мг/мл, приблизно 175 мг/мл; приблизно 180 мг/мл, приблизно 185 мг/мл; приблизно 190 мг/мл, приблизно 195 мг/мл або приблизно 200 мг/мл антитіла або його антигензв’язуючого фрагмента, яке(ий) специфічно зв'язується з hNGF. НАПОВНЮВАЧІ і pH Фармацевтичні препарати даного винаходу включають один або більше наповнювачів. Використовуваний тут термін «наповнювач» означає будь-який нетерапевтичний агент, який додається до препарату для забезпечення бажаної консистенції, в'язкості або ефекту стабілізації. У деяких варіантах здійснення фармацевтичний препарат даного винаходу включає буфер, відповідний для збереження pH в діапазоні від приблизно 4,5 до приблизно 5,6. Буфер який приводиться як приклад, відповідний для застосування в препаратах даного винаходу, включає, наприклад, ацетатний буфер. В одному варіанті здійснення ацетатний буфер готують в концентрації, яка складає 10 мМ. Кількість ацетату, який міститься в фармацевтичних препаратах даного винаходу, може варіюватися від приблизно 1 мМ до приблизно 50 мМ, від приблизно 2 мМ до приблизно 20 мМ, від приблизно 3 мМ до приблизно 12 мМ або становити приблизно 10 мМ. Фармацевтичні препарати даного винаходу можуть також включати один або більше вуглеводів, наприклад, один або більше цукрів. Цукром може бути редукуючий цукор або нередукуючий цукор. «Редукуючі цукор» включають, наприклад, цукор з кетонною або альдегідною групою і містять реакційноздатну напівацетальну групу, яка дозволяє цукру функціонувати як поновлюючому агенту. Конкретні приклади редукуючих цукрів включають фруктозу, глюкозу, гліцеральдегід, лактозу, арабінозу, манозу, ксилозу, рибозу, рамнозу, галактозу і мальтозу. Нередукуючі цукри можуть включати аномірний вуглець, який є ацетальним і по суті не реагує з амінокислотами або поліпептидами з ініціацією реакції Майяра. Конкретні приклади нередукуючих цукрів включають сахарозу, трегалозу, сорбозу, сукралозу, сорбіт, мелецитозу і рафінозу. Цукрові кислоти включають, наприклад, цукрові кислоти, глюконат і інші цукри з множиною оксигруп і їх солі. Кількість цукру, який міститься в фармацевтичних препаратах даного винаходу, може варіюватися залежно від конкретних обставин і намічених цілей, з якими препарати використовуються. У деяких варіантах здійснення препарати можуть містити від приблизно 0,1% до приблизно 20% цукру, від приблизно 0,5% до приблизно 20% цукру, від приблизно 1% до приблизно 20% цукру, від приблизно 2% до приблизно 15% цукру, від приблизно 3% до приблизно 10% цукру, від приблизно 4% до приблизно 10% цукру або від приблизно 5% до приблизно 10% цукру. Наприклад, фармацевтичні препарати даного винаходу можуть містити приблизно 0,5%, приблизно 1,0%, приблизно 1,5%, приблизно 2,0%, приблизно 2,5%, приблизно 3,0%, приблизно 3,5%, приблизно 4,0%, приблизно 4,5%, приблизно 5,0%, приблизно 5,5%, приблизно 6,0%, приблизно 6,5%, приблизно 7,0%, приблизно 7,5%, приблизно 8,0%, приблизно 8,5%, приблизно 9,0%, приблизно 9,5%, приблизно 10,0%, приблизно 10,5%, приблизно 11,0%, приблизно 11,5%, приблизно 12,0%, приблизно 12,5%, приблизно 13,0%, приблизно 13,5%, приблизно 14,0%, приблизно 14,5%, приблизно 15,0%, приблизно 15,5%, приблизно 16,0%, 16,5%, приблизно 17,0%, приблизно 17,5%, приблизно 18,0%, приблизно 18,5%, приблизно 19,0%, приблизно 19,5% або приблизно 20,0% цукру (наприклад, сахарози). 5 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 Фармацевтичні препарати даного винаходу можуть також включати одну або більше поверхнево-активних речовин. Використовуваний тут термін «поверхнево-активна речовина» означає речовину, яка зменшує поверхневе натягнення рідини, в якій її розчиняють, і/або зменшує міжфазове натягнення між маслом і водою. Поверхнево-активні речовини можуть бути іонними або неіонними. Неіонні поверхнево-активні речовини, які приводяться як приклад, які можуть бути включені в препарати даного винаходу, включають, наприклад, алкілполіетиленоксид, алкілполіглюкозиди (наприклад, октилглюкозид і децилмальтозид), жирні спирти, такі як цетиловий спирт і олеїловий спирт, кокамід МЕА, кокамід ДЕА і кокамід ТЕА. Конкретні неіонні поверхнево-активні речовини, які можуть бути включені в препарати даного винаходу, включають, наприклад, полісорбати, такі як полісорбат 20, полісорбат 28, полісорбат 40, полісорбат 60, полісорбат 65, полісорбат 80, полісорбат 81 і полісорбат 85; полоксамери, такі як полоксамер 188, полоксамер 407; поліетилен-поліпропіленгліколь або поліетиленгліколь (ПЕГ). Полісобат 20 також відомий як TWEEN 20, сорбітмонолаурат і поліоксіетиленсорбітанмонолаурат. Кількість поверхнево-активної речовини, яка міститься в фармацевтичних препаратах даного винаходу, може варіюватися залежно від конкретних бажаних властивостей препаратів, а також від конкретних обставин і цілей, з якими препарати мають намір використати. У деяких варіантах здійснення препарати можуть містити від приблизно 0,01% до приблизно 10% поверхнево-активної речовини, від приблизно 0,05% до приблизно 5% поверхнево-активної речовини або від приблизно 0,1% до приблизно 1% поверхнево-активної речовини. Наприклад, препарати даного винаходу можуть містити приблизно 0,01%, приблизно 0,02%, приблизно 0,03%, приблизно 0,04%, приблизно 0,05%, приблизно 0,06%, приблизно 0,07%, приблизно 0,08%, приблизно 0,09%, приблизно 0,10%, приблизно 0,11%, приблизно 0,12%, приблизно 0,13%, приблизно 0,14%, приблизно 0,15%, приблизно 0,16%, приблизно 0,17%, приблизно 0,18%, приблизно 0,19%; приблизно 0,20%, приблизно 0,21%, приблизно 0,22%, приблизно 0,23%, приблизно 0,24%, приблизно 0,25%, приблизно 0,26%, приблизно 0,27%, приблизно 0,28%, приблизно 0,29% або приблизно 0,30% поверхнево-активної речовини (наприклад, полісорбату 20). Фармацевтичні препарати даного винаходу можуть мати pH в діапазоні від приблизно 4,0 до приблизно 6,0. Наприклад, препарати даного винаходу можуть мати pH, який дорівнює приблизно 4,2, приблизно 4,4, приблизно 4,6, приблизно 4,8, приблизно 5,0, приблизно 5,2, приблизно 5,4, приблизно 5,6, приблизно 5,8 або приблизно 6,0. ПРЕПАРАТИ, ЯКІ ПРИВОДЯТЬСЯ ЯК ПРИКЛАД Стосовно одного аспекту даного винаходу фармацевтичний препарат включає (i) антитіло людини, яке специфічно зв'язується з hNGF (наприклад, мАт1); (ii) ацетат і (iii) цукор (наприклад, сахарозу). Конкретні, які не обмежують, які приводяться як приклад варіанти здійснення, які охоплюються цим аспектом даного винаходу, викладені в таблиці 1. Таблиця 1 Фармацевтичні препарати,які приводяться як приклад, які включають мАт1, ацетат і сахарозу мАт1 (мг/мл) ацетат (мМ) сахароза (%) 40 5 10 2 5 0 10 2 10 0 10 2 15 0 10 2 5 10 4 5 0 10 4 10 0 10 4 15 0 10 4 5 10 6 5 0 10 6 10 0 10 6 15 0 10 6 5 10 8 5 0 10 8 10 0 10 8 15 0 10 8 Стосовно іншого аспекту даного винаходу фармацевтичний препарат включає (i) антитіло людини, яке специфічно зв'язується з hNGF (наприклад, мАт1), (ii) ацетат, (iii) цукор (наприклад, сахарозу) і (iv) поверхнево-активна речовина (наприклад, полісорбат 20). Конкретні, не обмежуючі, які приводяться як приклад варіанти здійснення, охоплювані цим аспектом даного винаходу, викладені в таблицях 2A і 2B. 45 Таблиця 2A Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, сахарозу і полісорбат 20 мАт1 (мг/мл) ацетат (мМ) сахароза (%) полісорбат 20 (%) 5 10 2 50 10 2 100 10 2 150 10 2 5 10 4 50 10 4 100 10 4 150 10 4 5 10 8 50 10 8 100 10 8 150 10 8 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 Таблиця 2B 6 UA 111825 C2 Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, сахарозу і полісорбат 20 мАт1 (мг/мл) ацетат (мМ) сахароза (%) полісорбат 20 (%) 5 5 10 2 50 10 2 100 10 2 150 10 2 5 10 4 50 10 4 100 10 4 150 10 4 5 10 8 50 10 8 100 10 8 150 10 8 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Стосовно іншого аспекту даного винаходу фармацевтичний препарат включає (i) антитіло людини, яке специфічно зв'язується з hNGF (наприклад, мАт1), (ii) ацетат, (iii) цукор (наприклад, сахарозу); (iv) поверхнево-активну речовину (наприклад, полісорбат 20), (v) першу амінокислоту (наприклад, гістидин) і (v) другу амінокислоту (наприклад, аргінін). Конкретні, не обмежуючі, які приводяться як приклад варіанти здійснення, охоплювані цим аспектом даного винаходу, викладені в таблицях 3A, 3B, 3C, 3D, 3E і 3F. Таблиця 3A Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін мАт1 (мг/мл) ацетат (мМ) гістидин (мМ) сахароза (%) полісорбат 20 (%) аргінін (мМ) 5 10 10 2 50 10 10 2 100 10 10 2 150 10 10 2 5 10 10 4 50 10 10 4 100 10 10 4 150 10 10 4 5 10 10 8 50 10 10 8 100 10 10 8 150 10 10 8 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 Таблиця 3B Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін мАт1 (мг/мл) ацетат (мМ) гістидин (мМ) сахароза (%) полісорбат 20 (%) аргінін (мМ) 5 10 10 2 50 10 10 2 100 10 10 2 150 10 10 2 5 10 10 4 50 10 10 4 100 10 10 4 150 10 10 4 5 10 10 8 50 10 10 8 100 10 10 8 150 10 10 8 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 10 Таблиця 3C Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін мАт1 (мг/мл) ацетат (мМ) гістидин (мМ) сахароза (%) полісорбат 20 (%) аргінін (мМ) 5 10 25 2 50 10 25 2 100 10 25 2 150 10 25 2 5 10 25 4 50 10 25 4 100 10 25 4 150 10 25 4 5 10 25 8 50 10 25 8 100 10 25 8 150 10 25 8 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 Таблиця 3D Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін мАт1 (мг/мл) ацетат (мМ) гістидин (мМ) сахароза (%) полісорбат 20 (%) аргінін (мМ) 5 10 25 2 50 10 25 2 100 10 25 2 150 10 25 2 5 10 25 4 50 10 25 4 100 10 25 4 150 10 25 4 5 10 25 8 50 10 25 8 100 10 25 8 150 10 25 8 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 Таблиця 3Е Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін мАт1 (мг/мл) 5 50 100 150 5 50 7 100 150 5 50 100 150 UA 111825 C2 Ацетат (мМ) Гістидин (мМ) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мМ) 10 25 2 10 25 2 10 25 2 10 25 2 10 25 5 10 25 5 10 25 5 10 25 5 10 25 10 10 25 10 10 25 10 10 25 10 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 Таблиця 3F Фармацевтичні препарати, як приклад, які включають мАт1, ацетат, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін мАт1 (мг/мл) Ацетат (мМ) Гістидин (мМ) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мМ) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 5 10 25 2 50 10 25 2 100 10 25 2 150 10 25 2 5 10 25 5 50 10 25 5 100 10 25 5 150 10 25 5 5 10 25 10 50 10 25 10 100 10 25 10 150 10 25 10 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 Стосовно деяких аспектів даного винаходу препарат антитіла може включати антитіло проти hNGF у концентрації, яка складає приблизно 20 мг/мл, у приблизно 10 мМ ацетатному буфері, плюс приблизно 1,0% поліетиленгліколю 3350 (ПЕГ 3350) і приблизно 20% сахарози при pН, який дорівнює приблизно 5,0. В одному варіанті здійснення препарат антитіла вводять внутрішньовенно. В одному варіанті здійснення препарат антитіла вводять підшкірно. Додаткові, не обмежуючі приклади фармацевтичних препаратів, охоплюваних даним винаходом, викладені тут в іншому місці, у тому числі демонстраційних прикладах, представлених нижче. СТАБІЛЬНІСТЬ І В'ЯЗКІСТЬ ФАРМАЦЕВТИЧНИХ ПРЕПАРАТІВ Фармацевтичні препарати даного винаходу типово демонструють високі рівні стабільності. Термін «стабільні», використовуваний тут відповідно до фармацевтичних препаратів, означає, що в антитілах у фармацевтичних препаратах залишається задовільний ступінь структури і/або функції і/або біологічної активності після збереження протягом заданого проміжку часу. Препарат може бути стабільним, навіть якщо в антитілі, яке міститься в ньому, не зберігаються 100% його структури і/або функції і/або біологічної активності після збереження протягом заданого проміжку часу. У деяких випадках збереження приблизно 80%, приблизно 85%, приблизно 90%, приблизно 95%, приблизно 96%, приблизно 97%, приблизно 98% або приблизно 99% структури і/або функції і/або біологічної активності антитіла після збереження протягом заданого проміжку часу може розглядатися як «стабільний препарат». Стабільність можна виміряти, серед іншого, за допомогою визначення відсотка нативної форми антитіла, яке залишається в препараті після збереження протягом заданого проміжку часу при конкретній температурі. Відсоток нативної форми антитіла можна визначити за допомогою, серед іншого, ексклюзійної хроматографії (наприклад, ексклюзійної рідинної хроматографії високого розділення [ексклюзійної HPLC]). «Задовільний ступінь стабільності», як цей вираз використовується тут, означає, що принаймні 90% нативної форми антитіла можна виявити в препараті після збереження протягом заданого проміжку часу при конкретній температурі. У деяких варіантах здійснення принаймні приблизно 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% або 100% нативної форми антитіла можна виявити в препараті після збереження протягом заданого проміжку часу при конкретній температурі. Заданий проміжок часу, після якого визначають стабільність, може складати принаймні 1 місяць, принаймні 2 місяці, принаймні 3 місяці, принаймні 4 місяці, принаймні 5 місяців, принаймні 6 місяців, принаймні 7 місяців, принаймні 8 місяців, принаймні 9 місяців, принаймні 10 місяців, принаймні 11 місяців, принаймні 12 місяців, принаймні 18 місяців, принаймні 24 місяця або більше. Температура, при якій фармацевтичний препарат можна зберігати при оцінці стабільності, може бути будь-якою температурою в діапазоні від приблизно -80 °C до приблизно 45 °C, наприклад, збереження при приблизно -30 °C, приблизно -20 °C, приблизно 0 °C, приблизно 5 °C, приблизно 25 °C, приблизно 37 °C або приблизно 45 °C. Наприклад, фармацевтичний препарат може вважатися стабільним, якщо після збереження протягом 3 місяців при 5 °C більше ніж приблизно 90%, 95%, 96% або 97% нативної форми антитіла виявляється за допомогою ексклюзійної HPLC. Фармацевтичний препарат може також вважатися стабільним, якщо після збереження протягом 6 місяців при 5 °C більше ніж приблизно 90%, 95%, 96% або 97% нативної форми антитіла виявляється за допомогою ексклюзійної HPLC. Фармацевтичний препарат може також вважатися стабільним, якщо після збереження протягом 9 місяців при 5 °C більше ніж приблизно 90%, 95%, 96% або 97% нативної форми антитіла виявляється за допомогою 8 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ексклюзійної HPLC. Фармацевтичний препарат може також вважатися стабільним, якщо після збереження протягом 3 місяців при 25 °C більше ніж приблизно 90%, 95%, 96% або 97% нативної форми антитіла виявляється за допомогою ексклюзійної HPLC. Фармацевтичний препарат може також вважатися стабільним, якщо після збереження протягом 6 місяців при 25C більше ніж приблизно 90%, 95%, 96% або 97% нативної форми антитіла виявляється за допомогою ексклюзійної HPLC. Фармацевтичний препарат може також вважатися стабільним, якщо після збереження протягом 9 місяців при 25C більше ніж приблизно 90%, 95%, 96% або 97% нативної форми антитіла виявляється за допомогою ексклюзійної HPLC. Для оцінки стабільності препаратів даного винаходу можуть використовуватися інші способи, такі як диференціальна скануюча калориметрія (DSC) для визначення термостійкості, регульоване перемішування для визначення механічної стійкості і визначення оптичної щільності при приблизно 350 нм або приблизно 405 нм для визначення каламутностей розчинів. Наприклад, препарат даного винаходу може вважатися стабільним, якщо після збереження протягом 6 або більше місяців при приблизно 5C - приблизно 25C зміна ОП405 препарату складає менше ніж приблизно 0,05 (наприклад, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01 або менше) у порівнянні з ОП405 препарату в t=0. Стабільність можна також оцінити за допомогою виміру біологічної активності і/або афінності зв'язування антитіла зі своєю мішенню. Наприклад, препарат даного винаходу може розглядатися як стабільний, якщо після збереження при, наприклад, 5 °C, 25 °C, 37 °C, 45 °C і т.д. протягом заданого проміжку часу (наприклад, 1-12 або 18 місяців) антитіло проти hNGF, яке міститься в препараті, зв'язується з hNGF з афінністю, яка складає принаймні 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% або більше від афінності зв'язування антитіла до зазначеного збереження. Додаткові способи оцінки стабільності антитіла в препараті демонструються в розділі «Приклади», представленому нижче. У деяких варіантах здійснення фармацевтичні препарати даного винаходу в текучій формі демонструють низькі-середні рівні в'язкості. «В'язкість», як тут використовується, може бути «кінематичною в'язкістю» або «абсолютною в'язкістю». «Кінематична в'язкість» є показником опору рідини течії під дією гравітації. Коли дві рідини рівного о’бєму поміщають в ідентичні капілярні віскозиметри, і допускають їхнє протікання під дією гравітації, протікання через капіляр грузлої рідини довше, ніж таке менш грузлої рідини. Наприклад, якщо повне протікання однієї рідини займає 200 секунд, а таке іншої рідини - 400 секунд, друга рідина є в два рази більш в'язкою, ніж перша рідина по шкалі кінематичної в'язкості. «Абсолютна в'язкість», іноді називана динамічною в'язкістю або просто в'язкістю, є здобутком кінематичної в'язкості на щільність рідини (Абсолютна в'язкість = кінематична в'язкість  щільність). Кінематичну в'язкість 2 вимірюють у L /T, де L являє собою довжину, а T - час. Звичайно кінематичну в'язкість 2 представляють у сантистоксах (сСт). Одиницею кінематичної в'язкості в системі СІ є мм /сек, який дорівнює 1 сСт. Абсолютну в'язкість представляють в одиницях - сантипуазах (сП). Одиницею абсолютної в'язкості в системі СІ є міліпаскаль-секунда (мПа-сек), де 1 сП = 1 мПасек. Як тут використовується відповідно до текучого препарату даного винаходу, при низькому рівні в'язкості буде демонструватися абсолютна в'язкість, яка складає менше ніж приблизно 20 сантипуаз (сП). Наприклад, вважається, що текучий препарат даного винаходу має «низьку в'язкість», якщо після вимірювання з використанням стандартних методів вимірювання в'язкості препарат демонструє абсолютну в'язкість, яка складає приблизно 19 сП, приблизно 18 сП, приблизно 17 сП, приблизно 16 сП, приблизно 15 сП, приблизно 14 сП, приблизно 13 сП, приблизно 12 сП, приблизно 11 сП, приблизно 10 сП, приблизно 9 сП, приблизно 8 сП, приблизно 7 сП, приблизно 6 сП, приблизно 5 сП, приблизно 4 сП або менше. Як тут використовується стосовно до текучого препарату даного винаходу, при середньому рівні в'язкості буде демонструватися абсолютна в'язкість між приблизно 30 сП і приблизно 20 сП. Наприклад, вважається, що текучий препарат даного винаходу має «середню в'язкість», якщо після вимірювання з використанням стандартних методів вимірювання в'язкості препарат демонструє абсолютну в'язкість, яка складає приблизно 30 сП, приблизно 29 сП, приблизно 28 сП, приблизно 27 сП, приблизно 26 сП, приблизно 25 сП, приблизно 24 сП, приблизно 23 сП, приблизно 22 сП, приблизно 21 сП або приблизно 20 сП. Як продемонстровано в прикладі 5 нижче, автори даного винаходу зненацька визначили, що текучі препарати з низьким-середнім рівнем в'язкості, які містять високі концентрації антитіла проти hNGF (наприклад, аж до принаймні 125-150 мг/мл), можна отримати шляхом приготування антитіла з використанням 25 мМ гістидину і 25 мМ-100 мМ аргініну. Крім того, надалі визначили, що в'язкість препарату можна зменшити в навіть більшому ступені за допомогою зниження вмісту сахарози. 9 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 КОНТЕЙНЕРИ ДЛЯ ФАРМАЦЕВТИЧНИХ ПРЕПАРАТІВ І СПОСОБИ ВВЕДЕННЯ Фармацевтичні препарати даного винаходу можуть міститися в будь-якому контейнері, який підходить для збереження лікарських засобів і інших терапевтичних композицій. Наприклад, фармацевтичні препарати можуть міститися в герметизованому і стерилізованому пластмасовому або скляному контейнері заданого об’єму, такому як флакон, ампула, шприц, картридж або пляшечка. Для втримання препаратів даного винаходу можуть використовуватися різні типи флаконів, у тому числі, наприклад, прозорі і непрозорі (наприклад, бурштиновожовтого кольору) скляні або пластмасові флакони. Так само будь-який тип шприца може використовуватися для втримання і/або введення фармацевтичних препаратів даного винаходу. Фармацевтичні препарати в контейнері можна обробляти, використовуючи будь-який відомий у даній галузі техніки спосіб видалення кисню для збільшення стабільності антитіла, у випадку потреби. Кисень у вільному просторі (газовому просторі над рідиною в закритому контейнері) можна замінити інертним газом, таким як азот або аргон. Фармацевтичні препарати даного винаходу можуть міститися в шприцах зі звичайним вмістом вольфраму або в шприцах з низьким вмістом вольфраму. Як буде зрозуміло фахівцям із середнім рівнем компетентності в даній галузі техніки, процес виготовлення скляних шприців звичайно включає використання гарячого вольфрамового стрижня, функцією якого є продавлювання отвору в склі, для створення тим самим отвору, з якого рідини можна витягти і витиснути зі шприца. Цей процес приводить до відкладання малих кількостей вольфраму на внутрішній поверхні шприца. Для зменшення кількості вольфраму в шприці можуть використовуватися наступні стадії промивань і інших обробок. Використовуваний тут термін «зі звичайним вмістом вольфраму» означає, що шприц містить більше ніж 500 частин на мільярд (част/млрд) вольфраму. Термін «з низьким вмістом вольфраму» означає, що шприц містить менше ніж 500 част/млрд вольфраму. Наприклад, шприц з низьким вмістом вольфраму, стосовно даного винаходу, може містити менше ніж приблизно 490, 480, 470, 460, 450, 440, 430, 420, 410, 390, 350, 300, 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 або менше част/млрд вольфраму. Використовувані в шприцах гумові ущільнювальні манжетки на поршні і гумові пробки, використовувані для закриття отворів флаконів, можуть бути покриті шаром для запобігання забруднення лікарського вмісту шприца або флакона і/або для збереження його стабільності. Таким чином, стосовно деяких варіантів здійснення фармацевтичні препарати даного винаходу можуть міститися в шприці, який включає покриту шаром манжетку на поршні, або у флаконі, який герметизований за допомогою покритої шаром гумової пробки. Наприклад, манжетка або пробка можуть бути покриті тонким шаром фторовуглеводню. Приклади покритих шаром пробок і/або манжеток, які підходять для використання разом із флаконами і шприцами, які містять фармацевтичні препарати даного винаходу, згадуються, наприклад, у патентах США з № 4997423, 5908686, 6286699, 6645635 і 7226554. Конкретні, які приводяться як приклад, покриті шаром гумові пробки і манжетки, які можуть використовуватися стосовно даного винаходу, є в продажі під товарним знаком «FluroTec» від West Pharmaceutical Services, Inc. (Lionville, PA). Стосовно деяких варіантів здійснення даного винаходу фармацевтичні препарати можуть міститися в шприці з низьким вмістом вольфраму, який містить покриту шаром фторовуглеводню манжетку. Однак, як продемонстровано в розділі «Приклади» нижче, антитіло проти NGF даного винаходу, очевидно, є стабільним у кожній з перевірених комбінацій шприца і манжетки. Фармацевтичні препарати можуть вводитися пацієнту парентеральним шляхом, наприклад, за допомогою ін'єкції (наприклад, підшкірної, внутрішньовенної, внутрішньом'язової, внутрішньоочеревинної і т.д.), або з використанням черезшкірного введення, введення через слизові оболонки, інтраназального, легеневого і/або орального введення. Численні пристрої для доставки у вигляді ручок і/або автоінжекторів багаторазового використання можуть використовуватися для підшкірної доставки фармацевтичних препаратів даного винаходу. ™ Приклади включають, але без обмеження, AUTOPEN (Owen Mumford, Inc., Woodstock, ™ Об'єднане Королівство), ручку DISETRONIC (Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Швейцарія), ™ ™ ™ ручку HUMALOG MIX 75/25 , ручку HUMALOG , ручку HUMALIN 70/30 (Eli Lilly and Co., ™ ™ Indianapolis, IN), NOVOPEN I, II і III (Novo Nordisk, Copenhagen, Данія), NOVOPEN JUNIOR ™ ™ (Novo Nordisk, Copenhagen, Данія), ручку BD (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OPTIPEN , ™ ™ ™ OPTIPEN PRO , OPTIPEN STARLET і OPTICLIK (Sanofi-Aventis, Frankfurt, Німеччина), не говорячи вже про інші. Приклади пристроїв для доставки у вигляді одноразових ручок і/або автоінжекторів, застосовуваних для підшкірної доставки фармацевтичної композиції даного ™ ™ винаходу, включають, але без обмеження, ручку SOLOSTAR (Sanofi-Aventis), FLEXPEN (Novo ™ Nordisk) і KWIKPEN (Eli Lilly), автоінжектор SURECLICK™ (Amgen, Thousand Oaks, CA), 10 UA 111825 C2 ™ 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ™ PUSHCLICK (Scandinavian Health, Ltd. (SHL) Group), PENLET (Haselmeier, Stuttgart, ™ Німеччина), EPIPEN (Dey, L.P.) і ручку HUMIRA (Abbott Labs, Abbott Park, IL), не говорячи вже про інші. Також тут передбачається використання мікроінфузійного пристрою для доставки фармацевтичних препаратів даного винаходу. Використовуваний тут термін «мікроінфузійний пристрій» означає пристрій для підшкірної доставки, призначений для повільного введення великих об’ємів (наприклад, аж до приблизно 2,5 мл або більше) терапевтичні препарати протягом тривалого періоду часу (наприклад, приблизно 10, 15, 20, 25, 30 або більше хвилин). Див., наприклад, патенти США з № 6629949 і 6659982 і Meehan et al., J. Controlled Release 46: 107-116 (1996). Мікроінфузійні пристрої, зокрема, застосовні для доставки великих доз терапевтичних білків, які містяться у високій концентрації (наприклад, приблизно 100, 125, 150, 175, 200 або більше мг/мл) і/або в’язких розчинів. ТЕРАПЕВТИЧНІ ЗАСТОСУВАННЯ ФАРМАЦЕВТИЧНИХ ПРЕПАРАТІВ Фармацевтичні препарати даного винаходу застосовні, серед іншого, для лікування, попередження і/або зменшення інтенсивності будь-якого захворювання або розладу, пов'язаного з активністю NGF. Які приводяться як приклад, не обмежуючі захворювання і розлади, лікування і/або попередження яких може здійснюватися за допомогою введення фармацевтичних препаратів даного винаходу, включають біль внаслідок будь-якого стану, який супроводжується нейрогенним, невропатичним або ноцицептивним болем. У деяких варіантах здійснення, які мають відношення до невропатичного болю, згадану невралгію трійникового нерва, постгерпетичну невралгію, фантомний біль в ампутованій кінцівці, фіброміалгію, симпатичну рефлекторну дистрофію і нейрогенні больові стани піддають лікуванню. В інших варіантах здійснення раковий біль, зокрема, пов'язаний з раком кісти біль, пов'язаний з остеоартритом або ревматоїдним артритом біль, поперековий біль, післяопераційний біль у місці розрізу, біль у місці перелому або розриву, біль при остеопоротичному переломі, остеопороз, суглобовий біль при подагрі, діабетичну нефропатію, ішіалгію, болі, пов'язані з кризами серпоподібних клітин, мігрень і інші невропатичні і/або ноцицептивні болі переважно піддають лікуванню. Таким чином, даний винахід включає способи лікування, попередження і/або зменшення інтенсивності будь-якого захворювання або розладу, зв'язаного з активністю NGF або активацією NGF (у тому числі кожного з вищезгаданих, які приводяться як приклад захворювань, розладів і станів) за допомогою використання фармацевтичних препаратів даного винаходу. Терапевтичні способи даного винаходу включають введення суб'єкту будь-якого препарату, який включає антитіло проти hNGF, розкритого тут. Суб'єктом, якому вводять фармацевтичний препарат, може бути, наприклад, будь-яка людина або тварина, яка не є людиною, яка має потребу в такому лікуванні, попередженні і/або зменшенні інтенсивності, або той, кому б принесло користь іншим способом інгібування або ослаблення активності NGF і/або NGF-опосередкованої активності. Наприклад, суб'єктом може бути індивідуум, у якого діагностовано кожне з вищезгаданих захворювань або розладів, або який, як думають, підданий ризику ураження ним. Даний винахід включає, крім того, застосування кожного з фармацевтичних препаратів, розкритих тут, для виробництва лікарського засобу для лікування, попередження і/або зменшення інтенсивності будь-якого захворювання або розладу, зв'язаного з активністю NGF або активацією NGF (у тому числі кожного з вищезгаданих, які приводяться як приклад захворювань, розладів і станів). ПРИКЛАДИ Наступні приклади пропонуються для забезпечення фахівців із середнім рівнем компетентності в даній галузі техніки повним розкриттям і описом того, як приготувати і застосовувати способи і композиції даного винаходу, і, як мається на увазі, не обмежують об’єм того, що автори даного винаходу розглядають як винахід. Були прикладені зусилля для забезпечення точності у відношенні використовуваних чисел (наприклад, кількостей, температури і т.д.), але варто враховувати деякі експериментальні помилки і девіації. Крім випадків, обговорених особливо, частини є ваговими частинами, молекулярна маса є середньою молекулярною масою, температура представлена в градусах Цельсію, а тиск біля або близько атмосферного. Приклад 1. Стабільність повністю людського антитіла проти фактора росту нервів (NGF) людини («мАт1») після збереження при низьких температурах У цьому прикладі були створені різні препарати, які містять антитіло проти NGF людини без наповнювачів. Антитілом, яке приводиться як приклад, використовуваним у цьому і у всіх наступних прикладах, викладених нижче, є антитіло, яке включає варіабельну область важкого ланцюга (HCVR) з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 20 і варіабельну область легкого 11 UA 111825 C2 5 10 ланцюга (LCVR) з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 22. Це антитіло називають тут «мАт1». Як і в попередньому експерименті, стабільність мАт1 у рідкому розчині визначали після різних проміжків часу збереження в замороженому стані при -30 °C і -80 °C. Концентрація мАт1, використовувана в цьому прикладі, складала 130 мг/мл. У різні моменти часу стабільність мАт1 визначали за допомогою ексклюзійної рідинної хроматографії високого розділення (ексклюзійної HPLC) або за допомогою катіонобмінної рідинної хроматографії високого розділення (катіонобмінної HPLC). Стабільність оцінювали на основі відсотка нативної форми мАт1, яка залишається в зразку (за допомогою ексклюзійної HPLC; таблиця 4) і по відсотку кислотного варіанта, відміченому в зразку (за допомогою катіонобмінної HPLC; таблиця 5). Збільшення відсотка кислотного варіанта відповідає дезамідуванням антитіла і тому вважається небажаним явищем стосовно фармацевтичних препаратів даного винаходу. Таблиця 4 % нативної форми мАт1, який залишається (ексклюзійна HPLC) Час (місяці) 0 1 3 6 9 12 Температура збереження -80C 96,6 96,6 96,6 96,6 96,5 96,7 -30C 96,6 95,2 94,6 94,2 93,1 93,3 Таблиця 5 % кислотного варіанта (катіонобмінна HPLC) Час (місяці) 0 1 3 6 9 12 Температура збереження -80 °C 14,3 14,7 14,9 14,1 14,9 14,6 -30 °C 14,3 14,6 14,5 12,8 14,5 14,6 15 20 Ці результати показують, що мАт1 може залишатися стабільним у концентрації, яка складає 130 мг/мл, протягом принаймні 12 місяців при збереженні при -80C. Приклад 2. Стабільність препаратів мАт1, які містять мінімальну кількість наповнювачів. Шість різних препаратів, які містять мАт1, готували в концентрації, яка складає 40 мг/мл, з мінімальною кількістю наповнювачів (як продемонстровано в таблиці 6, див. також приклад 2) і зберігали при - 20 °C або -30 °C протягом різних періодів часу. Усі препарати містять 10 мМ ацетату, p 5,0. У таблиці 7 (-30C) і таблиці 8 (-20C) представлений відсоток нативної форми мАт, який залишається в різних препаратах з мінімальною кількістю наповнювачів, що визначаеться за допомогою ексклюзійної HPLC. 25 Таблиця 6 Препарати мАт1, які містять мінімальну кількість наповнювачів Препарат 1 2 3 4 5 6 30 Наповнювач 0,5% поліетиленгліколю 3350 1,0% поліетиленгліколю 3350 1% Сахароза 2% Сахароза 4% Сахароза немає мАт1 (мг/мл) 40 40 40 40 40 40 Як відзначено вище, стабільність препаратів перевіряли за допомогою ексклюзійної HPLC після збереження протягом різних проміжків часу при -30C і -20C. Результати, представлені у вигляді відсотка нативної форми мАт1,який залишається, приведені в таблиці 7 (у випадку збереження при -30C) і 8 (-20C). 12 UA 111825 C2 Таблиця 7 % нативної форми мАт1, який залишається (ексклюзійна HPLC) після збереження при -30C Час (місяці) 0 1 3 6 9 12 18 24 # препарату (див. таблицю 6) 1 2 98,3 98,1 98,0 98,1 97,8 97,9 98,2 98,4 98,2 98,3 98,2 98,4 97,7 98,2 97,9 98,1 3 98,0 98,0 98,0 98,5 98,5 98,4 98,1 98,3 4 97,9 98,0 98,0 98,4 98,5 98,4 98,1 98,5 5 98,1 98,0 97,9 98,4 98,8 98,5 98,4 98,5 6 98,0 97,0 96,0 95,9 95,1 95,7 94,5 94,5 Таблиця 8 % нативної форми мАт1, який залишається (ексклюзійна HPLC) після збереження при -20C Час (місяці) 0 1 3 6 9 12 18 24 5 10 # препарату (див. таблицю 6) 1 2 98,3 98,1 97,8 98,1 97,8 97,9 97,7 98,3 97,8 98,1 97,7 98,2 96,4 97,7 96,6 97,9 3 98,0 98,2 98,1 98,3 98,3 98,3 97,9 98,1 4 97,9 98,1 98,2 98,4 98,3 98,3 98,1 98,2 5 98,1 98,2 98,0 98,5 98,3 98,5 98,3 98,3 6 98,0 95,8 93,0 92,6 90,7 92,9 86,7 88,6 Як показано в цьому прикладі, стабільність мАт1 зберігається в значній мірі в препаратах 1, 2, 3, 4 і 5 після збереження протягом декількох місяців при -20C і -30C. Ці результати вказують на те, що стабільність мАт1 при -30C можна збільшити за допомогою додавання принаймні 1,0% сахарози або принаймні 0,5% поліетиленгліколю 3350. Ці результати, крім того, вказують на те, що стабільність мАт1 при -20C можна збільшити за допомогою додавання принаймні 1,0% сахарози або принаймні 1,0% поліетиленгліколю 3350. Приклад 3. Стабілізований препарат мАт1 Для використання в представлених нижче прикладах 4 і 5 був приготовлений стабілізований препарат, який містить різні концентрації мАт1. Цей препарат, названий «препаратом A», представлений у таблиці 9. Таблиця 9 Стабілізований препарат «А» мАт1 Компонент мАт1 Ацетат Полісорбат 20 Сахароза pH 15 20 Препарат A 6-100 мг/мл 10 мМ 0,05% 8% 5,0 ο Приклад 4. Стабільність препарату A після збереження при 5 C Стабільність препарату A (див. приклад 3), який містить 6, 20 або 100 мг/мл мАт1, перевіряли після збереження протягом декількох місяців при 5 °C у прозорих скляних флаконах. Стабільність оцінювали за наступними параметрами: (a) зовнішньому вигляду; (b) каламутності (ОП 405 нм); (с) pН; (d) відсотку мАт1, який витягується, у цілому, визначеному за допомогою HPLC із зворотною фазою; (e) відсотку нативної форми мАт1, який витягується (визначеного за допомогою ексклюзійної HPLC); (f) відсотку основного піка витягу мАт1 (визначеного за допомогою катіонобмінної HPLC) і (g) відсотку кислотного варіанта, який витягується, мАт1 (визначеного за допомогою катіонобмінної HPLC). Результати оцінки стабільності препарату A, який містить 6, 20 і 100 мг/мл мАт1, підсумовані в таблицях 10, 11 і 12, відповідно. 25 Таблиця 10 13 UA 111825 C2 Стабільність препарату A, який містить 6 мг/мл мАт1, після збереження при 5οC у скляних флаконах (0-12 місяців) Тривалість збереження при 5C (місяці) Параметр 0 1 2 3 Зовнішній вигляд Задов. Задов. Задов. Задов. Каламутність (ОП 405 нм) 0,00 0,00 0,00 0,00 PH 5,1 5,1 5,1 5,0 % мАт1, який витягується, у 100 96 101 99 цілому % нативної форми мАт1, який витягується (ексклюзійна 98,8 98,6 98,7 98,9 HPLC) % основного піка витягу мАт1 44,8 46,3 46,4 454 (катіонобмінна HPLC) % кислотного варіанта мАт1, який витягується 16,6 16,5 17,4 17,7 (катіонобмінна HPLC) 6 Задов. 0,00 5,0 9 Задов. 0,00 5,1 12 Задов. 0,00 5,1 102 107 107 98,5 98,8 98,7 41,2 46,2 45,0 15,2 15,9 16,5 Таблиця 11 Стабільність препарату A, який містить 20 мг/мл мАт1, після збереження при 5C у скляних флаконах (0-18 місяців) Тривалість збереження при 5C (місяці) Параметр 0 Зовнішній вигляд Задов. Каламутність (ОП 405 нм) 0,00 pH 5,1 % мАт1, який витягується, у 100 цілому % нативної форми мАт1, який витягується (ексклюзійна 99,0 HPLC) % основного піка витягу мАт1 44,0 (катіонобмінна HPLC) % кислотного варіанта мАт1, який витягується 15,8 (катіонобмінна HPLC) 1 Задов. 0,00 5,2 2 Задов. 0,01 5,0 3 Задов. 0,00 5,1 6 Задов. 0,00 5,0 9 Задов. 0,00 5,1 12 Задов. 0,00 5,2 18 Задов. 0,00 5,1 96 99 100 100 104 101 102 98,4 98,5 98,4 98,6 98,2 98,6 98,2 44,0 44,1 43,8 44,3 43,8 44,9 43,6 15,5 15,8 15,5 15,5 15,2 15,9 15,3 Таблиця 12 Стабільність препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, після збереження при 5C у скляних флаконах (0-18 місяців) Тривалість збереження при 5C (місяці) Параметр 0 Зовнішній вигляд Задов. Каламутність (ОП 405 нм) 0,00 pH 5,0 % мАт1, який витягується, у 100 цілому % нативної форми мАт1, який витягується (ексклюзійна 98,2 HPLC) % основного піка витягу мАт1 41,3 (катіонобмінна HPLC) % кислотного варіанта мАт1, який витягується 14,8 (катіонобмінна HPLC) 5 10 1 Задов. 0,00 5,1 2 Задов. 0,00 5,0 3 Задов. 0,00 5,1 6 Задов. 0,00 5,0 9 Задов. 0,00 5,1 12 Задов. 0,00 5,0 18 Задов. 0,00 5,2 98 106 104 103 103 101 104 97,9 97,5 97,8 98,2 97,4 98,1 97,6 40,9 39,2 39,0 39,5 39,7 42,0 40,4 14,9 13,7 14,0 14,0 13,4 13,8 14,0 Результати цього прикладу показують, що препарат A, який містить 6 мг/мл мАт1, залишався стабільним протягом принаймні 12 місяців збереження при 5C у прозорих скляних флаконах, при цьому приблизно 98,7% або більше нативної форми мАт1 залишалося в зразках після збереження протягом 12 місяців у таких умовах. Результати цього приклада, крім того, показують, що препарат A, який містить 20 мг/мл мАт1, залишався стабільним протягом принаймні 18 місяців збереження при 5C у прозорих скляних флаконах, при цьому приблизно 98,2% нативної форми мАт1 залишалося в зразках після збереження протягом 18 місяців у таких умовах. Крім того, препарат A, який містить 100 мг/мл мАт1, залишався стабільним протягом принаймні 18 місяців збереження при 5C у прозорих скляних флаконах, при цьому приблизно 97,6% нативної форми мАт1 залишалося в зразках після збереження протягом 18 місяців у таких умовах. Крім того, відсоток кислотного варіанта не змінювався значно з моменту 14 UA 111825 C2 5 часу = 0 після збереження протягом 12 або 18 місяців у досліджуваних умовах, тим самим підтверджуючи стабільність препаратів. Приклад 5. Ефект концентрацій аргініну, гістидину і сахарози на в'язкість і стабільність препаратів, які містять мАт1. Було приготовлено кілька препаратів, які містять 100 мг/мл, 125 мг/мл і 150 мг/мл мАт1 і різні кількості гістидину, аргініну і сахарози. Для кожного препарату визначали в'язкість і осмоляльність при 25 °C. Результати підсумовані в таблиці 13. Таблиця 13 Ефект аргініну, гістидину і сахарози на в'язкість препаратів, які містять мАт1 (Усі препарати містять 10 мМ ацетат, рН 5,0 і 0,2% полісорбату 20 мАт1 (мг/мл) 100 100 100 100 100 125 125 125 125 125 125 150 150 150 150 150 10 15 20 Гістидин (мМ) 0 0 25 0 0 0 0 25 0 25 0 0 25 25 0 0 Гістидин (мМ) 0 25 0 25 50 0 25 0 50 25 0 0 25 25 75 100 Сахароза ( %) 10 10 10 5 10 5 5 5 5 5 2 5 5 2 5 5 В'язкість (сантиОсмоляльність (міліосмоль) пуаз) -13,5 440 ~9 510 ~9 510 ~7 270 ~7 560 -20 -250 ~11 290 -12 280 ~9 340 ~9 330 -16 150 ~41 300 -19 360 -15 310 -14 450 -11 510 Представлені в таблиці 13 результати вказують на те, що додавання гістидину або аргініну в концентрації, яка складає 25 мМ, до мАт1 (у концентрації, яка складає 100 мг/мл) значно зменшувало в'язкість препарату в порівнянні з препаратом антитіла, який не містить ні гістидин, ні аргінін. Крім того, додавання аргініну в концентрації, яка складає 25 мМ, до мАт1 (у концентрації, яка складає 100 мг/мл), при зменшенні концентрації сахарози з 10% до 5%, приводило до подальшого зменшення в'язкості. Коли концентрацію антитіла мАт1 збільшували до 125 мг/мл, як гістидин, так і аргінін у концентрації, яка складає 25 мМ, приводив до значного зменшення в'язкості при використанні окремо або разом. Крім того, зменшення концентрації сахарози з 5% до 2% з додаванням гістидину й аргініну зменшувало в'язкість препарату в ще більшому ступені. Коли концентрацію мАт1 збільшували до 150 мг/мл, комбінація гістидину й аргініну, кожен у концентрації, яка складає 25 мМ, приводила до значного зменшення в'язкості. Зменшення кількості сахарози з 5% до 2% приводило до подальшого зменшення в'язкості. Ґрунтуючись, принаймні, на вищевикладеному, був приготовлений наступний препарат «В», представлений у таблиці 14. Таблиця 14 Компонент мАт1 Ацетат Полісорбат 20 Сахароза Аргінін pH Препарат В 20- 100 мг/мл 10 мМ 0,05% 8% 25 мМ 5,0 25 30 Приклад 6. Стабільність препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, після виробництва у флаконі і шприцах Препарат A (див. таблицю 9), який містить 100 мг/мл мАт1, був приготовлений у 2-мл скляному флаконі й у двох різних шприцах: стандартному і з низьким вмістом вольфраму. Препарати зберігали при 5, 25 і 37 °C протягом різних проміжків часу. Стабільність мАт1 після збереження визначали за допомогою ексклюзійної HPLC і катіонобмінної HPLC. Результати представлені в таблиці 15. (Збільшення відсотка кислотного варіанта відповідає дезамідуванню 15 UA 111825 C2 антитіла і тому вважається небажаним явищем стосовно фармацевтичних препаратів даного винаходу). Як показано в цій таблиці, препарат A, який містить 100 мг/мл мАт1, збережений при 5C у скляному флаконі або шприці, залишався відносно стабільним протягом принаймні 18 місяців і був небагато менш стабільним при 25C або 37C у пізніше перевірені моменти часу. 5 Таблиця 15 Стабільність препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, у флаконі і шприцах 2-мл скляний флакон Темп. Час Початок 7 днів 37C 14 днів 37C 28 днів 37C 25C 1 місяць 25C 3 місяці 25C 6 місяців 1 місяць 5C 3 місяці 5C 5C 6 місяців 5C 9 місяців 5С 12 місяців 5C 18 місяців 10 15 % нативної форми (ексклюзійна HPLC) 98,2 97,6 97,2 96,7 97,7 97,3 96,9 97,9 97,8 98,2 97,4 98,1 97,6 % кислотного варіанта (катіонобмінна HPLC) 14,4 13,9 14,7 15,7 13,1 14,9 17,4 14,8 13,7 14,0 13,4 13,8 14,0 Стандартний шприц % нативної форми (ексклюзійна HPLC) 98,2 97,6 97,3 96,6 97,5 97,2 97,1 98,1 97,6 98,1 97,6 98,1 97,6 % кислотного варіанта (катіонобмінна HPLC) 14,1 14,0 14,6 15,5 13,5 14,9 16,9 13,7 13,9 13,5 13,1 13,5 14,1 Шприц з низьким вмістом вольфраму % нативної % кислотного форми варіанта (ексклюзійна (катіонобмінна HPLC) HPLC) 98,2 14,3 97,8 13,9 97,3 14,7 96,5 15,5 97,9 13,3 97,1 14,8 96,7 17,4 98,0 14,0 97,7 13,5 98,0 13,7 97,6 13,2 98,2 13,1 97,7 14,0 Приклад 7. Стабільність препарату В, який містить 100 мг/мл мАт1, після виробництва у флаконі і шприцах Препарат B (див. таблицю 14), який містить 100 мг/мл мАт1, був приготовлений у 2-мл скляному флаконі й у двох різних шприцах: стандартному і з низьким вмістом вольфраму. Препарати зберігали при 5, 25 і 37C протягом різних проміжків часу. Стабільність мАт1 після збереження визначали за допомогою ексклюзійної HPLC і катіонобмінної HPLC. Результати представлені в таблиці 16. (Як відзначалося раніше, збільшення відсотка кислотного варіанта відповідає дезамідуванню антитіла і тому вважається небажаним явищем стосовно фармацевтичних препаратів даного винаходу). Як показано в цій таблиці, препарат В, який ο містить 100 мг/мл мАт1, збережений при 5 C у скляному флаконі або шприці, залишався відносно стабільним протягом принаймні 12 місяців і був небагато менш стабільним при 25C або 37C в усі перевірені моменти часу. Таблиця 16 Стабільність препарату В, який містить 100 мг/мл мАт1, у флаконі і шприцах 2-мл скляний флакон Темп. Час Початок 7 днів 37C 37C 14 днів 37C 28 днів 25C 1 місяць 25C 3 місяці 25C 6 місяців 5C 1 місяць 2 місяці 5C 3 місяці 5C 5C 6 місяців 5C 9 місяців 5C 12 місяців 5C 18 місяців % нативної форми (ексклюзійна HPLC) 98,2 97,4 97,0 96,4 97,7 96,7 96,6 98,1 97,8 97,7 97,4 97,8 98,0 97,7 % кислотного варіанта (катіонобмінна HPLC) 14,2 14,3 14,9 16,3 13,6 14,7 15,4 13,6 14,3 14,3 14,4 14,2 15,1 14,3 Стандартний шприц % нативної форми (ексклюзійна HPLC) 98,1 97,4 96,9 96,4 97,8 96,9 96,6 98,0 97,9 97,3 97,5 97,8 98,1 97,7 20 16 % кислотного варіанта (катіонобмінна HPLC) 14,4 14,3 14,8 16,2 13,7 14,7 15,5 13,7 14,3 14,4 14,5 14,1 14,7 39,8 Шприц з низьким вмістом вольфраму % нативної % кислотного форми варіанта (ексклюзійна (катіонобмінна HPLC) HPLC) 98,2 14,3 97,6 14,1 96,9 14,8 96,4 15,9 97,7 13,6 96,8 14,8 96,6 15,6 98,1 13,5 97,9 14,2 97,4 14,2 97,6 14,5 97,7 14,1 98,2 14,7 97,7 14,1 UA 111825 C2 5 10 15 20 25 Приклад 8: Стабільність препаратів мАт1 у попередньо наповнених шприцах Був виконаний ряд експериментів для оцінки стабільності різних препаратів мАт1 у попередньо наповнених шприцах. Для цих експериментів різні голки Люєра і незнімні голки, шприци зі звичайним вмістом вольфраму і з низьким вмістом вольфраму використовувалися в комбінації з різними типами манжеток (покритих шаром і без нього) і гвинтових ковпачків. Стабільність препаратів перевіряли після збереження в попередньо наповнених шприцах при 37 °C, 25 °C і 5 °C протягом різних проміжків часу (у діапазоні від 7 днів до 6 місяців, у залежності від досліджуваних умов). У цьому прикладі стабільність наступних препаратів мАт1 у попередньо наповнених шприцах була перевірена: (1) препарату A (див. таблицю 9), який містить 100 мг/мл мАт1, у попередньо наповненому шприці з незнімною голкою #1, описаному в таблиці 17; (2) препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, у попередньо наповненому шприці з незнімною голкою #2, описаному в таблиці 18; (3) препарату A, який містить 20 мг/мл мАт1, у попередньо наповненому шприці з незнімною голкою #1, описаному в таблиці 19; (4) препарату A, який містить 20 мг/мл мАт1, у попередньо наповненому шприці з незнімною голкою #2, описаному в таблиці 20; (5) препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, у попередньо наповненому шприці з незнімною голкою #3, описаному в таблиці 21; і (6) препарату A, який містить 6 мг/мл мАт1, у попередньо наповненому шприці з незнімною голкою #3, описаному в таблиці 22. Шприц #1 являє собою 1-мл шприц BD з низьким вмістом вольфраму з голкою розміром 29G  ½ дюйма Physiolis; шприц #2 являє собою 1-мл шприц Schott з голкою SN CF розміром 29G  ½ дюйма; і шприц #3 являє собою 1-мл стандартний шприц Daikyo Seiko CZ (Crystal Zenith) з голкою розміром 30G  ½ дюйма. Стабільність оцінювали за наступними параметрами: (a) візуальному аналізу; (b) каламутності (ОП405 нм); (с) відсотку витягу за допомогою HPLC із зворотною фазою; (d) відсотку нативної форми мАт1 за допомогою ексклюзійної HPLC; (e) відсотку основного піка мАт1 за допомогою катіонобмінної HPLC і (f) відсотку кислотного варіанта за допомогою катіонобмінної HPLC. Результати репрезентативного експерименту, у якому оцінювалася стабільність препарату А, який містить 100 мг/мл мАт1, у шприці #1, представлені в таблиці 17 нижче. 30 Таблиця 17 Стабільність препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, в попередньо наповненому шприці 1 з голкою, яка не знімається Опис шприца #1: Шприц: Манжетка: Гвинтовий ковпачок: Силіконізація: Темп. 37C 37C 37C 25C 25C 25C 25C 5C 5C 5C 5C 5C 5C 5C Час Початок 7 днів 14 днів 28 днів 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 9 місяців 12 місяців 18 місяців 1-мл шприц BD з низьким вмістом вольфраму з голкою розміром 29G  ½ дюйма Physiolis Hypak FluroTec® 4023/50 BD 260 Напилення % % нативної кислотного % основного піку Візуаль-ний Каламут-ність % форми мАт1 варіанту (катіоноб-мінна аналіз (ОГ405 нм) витягування (ексклюзійна (катіонHPLC) HPLC) обмінна HPLC) Задов. 0,00 100 98,2 40,2 14,2 Задов. 0,00 101 97,8 37,6 13,9 Задов. 0,00 100 97,3 37,0 14,7 Задов. 0,00 96 96,5 34,9 15,5 Задов. 0,00 97 97,9 36,9 13,3 Задов. 0,00 103 97,0 38,6 14,9 Задов. 0,00 100 97,1 35,5 14,8 Задов. 0,00 104 96,7 36,8 17,4 Задов. 0,00 96 98,0 39,0 13,8 Задов. 0,00 103 97,8 39,3 13,6 Задов. 0,00 100 97,7 39,2 13,5 Задов. 0,00 100 98,0 39,2 13,7 Задов. 0,00 100 97,6 39,1 13,2 Задов. 0,00 102 98,2 40,9 13,1 Задов. 0,00 100 97,7 39,6 14,0 Результати репрезентативного експеримента, в якому оцінювалась стабільність препарату А, який містить 100 мг/мл мАт1, в шприці #2, представлені в таблиці 18 ниже. 17 UA 111825 C2 Таблиця 18 Стабільність препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, в попередньо наповненому шприці 2 з голкою, яка не знімається Опис шприца #2: Шприц: Манжетка: Гвинтовий ковпачок: Силіконізація: Темп. 37C 37C 37C 25C 25C 25C 25C 5C 5C 5C 5C 5C 5C 5C 1-мл шприц Schott з голкою SN CF розміром 29G  ½ дюйма West FluroTec® 4023/50 Stelmi 4800 w/RNS Напиленням Час Візуаль-ний аналіз Початок 7 днів 14 днів 28 днів 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 9 місяців 12 місяців 18 місяців Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. Задов. (ОГ405 нм) % нативної форми мАт1 % витягування (ексклюзій-на HPLC) 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 100 102 102 97 98 103 101 103 97 103 101 101 102 100 102 98,3 97,5 97,3 96,6 97,8 97,1 97,1 96,8 97,8 97,8 97,6 98,1 97,6 98,2 97,7 % основного піка (катіонобмінна HPLC) 40,3 37,8 37,4 34,6 36,8 38,8 35,6 37,4 39,8 39,4 39,8 40,0 39,7 41,1 39,4 % кислотного варіанту (катіонобмінна HPLC) 14,2 14,0 14,7 15,4 13,4 14,9 14,8 17,5 13,8 13,9 13,8 13,9 13,4 13,0 13,9 Результати репрезентативного експеримента, в якому оцінювалась стабільність препарату А, який містить 20 мг/мл мАт1, в шприці #1, представлені в таблиці 19 ниже. Таблиця 19 Стабільність препарату A, який містить 20 мг/мл мАт1, в попередньо наповненому шприці 1 з голкою, яка не знімається Опис шприца #1: Шприц: Манжетка: Гвинтовий ковпачок: Силіконізація: Темп. 37C 37C 37C 25C 25C 25C 25C 5C 5C 5C 5C 5C 5C 5C Час Початок 7 днів 14 днів 28 днів 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 9 місяців 12 місяців 18 місяців 1-мл шприц BD з низьким вмістом вольфраму з голкою розміром 29G  ½ дюйма Physiolis Hypak FluroTec® 4023/50 BD 260 Напиленням % нативної % основного % кислотного ВізуальКаламут-ність % витягуформи мАт1 піку (катіонваріанту (катіонний аналіз (ОГ405 нм) вання (ексклюзій-на обмінна обмінна HPLC) HPLC) HPLC) Задов. 0,00 100 98,9 44,5 15,9 Задов. 0,00 100 98,4 42,1 15,7 Задов. 0,00 99 98,3 41,8 16,2 Задов. 0,00 98 97,6 39,2 17,5 Задов. 0,00 96 98,4 41,4 15,3 Задов. 0,00 100 98,1 41,8 16,0 Задов. 0,00 99 98,0 42,7 17,0 Задов. 0,01 99 98,0 42,0 19,4 Задов. 0,00 97 98,2 44,0 15,7 Задов. 0,00 99 98,5 44,5 15,8 Задов. 0,00 100 98,4 44,4 15,8 Задов. 0,00 99 98,6 44,1 15,6 Задов. 0,00 101 98,2 44,0 15,1 Задов. 0,00 101 98,5 45,4 15,9 Задов. 0,00 101 98,2 43,5 15,3 5 Результати репрезентативного експерименту, в якому оцінювалась стабільність препарату А, який містить 20 мг/мл мАт1, в шприці #2, представлені в таблиці 20 ниже. 18 UA 111825 C2 Таблиця 20 Стабільність препарату A, який містить 20 мг/мл мАт1, в попередньо наповненому шприці 2 з голкою, яка не знімається Опис шприца #2: Шприц: Манжетка: Гвинтовий ковпачок: Силіконізація: Темп. 37C 37C 37C 25C 25C 25C 25C 5C 5C 5C 5C 5C 5C 5C Час Початок 7 днів 14 днів 28 днів 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 9 місяців 12 місяців 18 місяців 1-мл шприц Schott з голкою SN CF розміром 29G  ½ дюйма West FluroTec® 4023/50 Stelmi 4800 w/RNS Напиленням % нативної % основного % кислотного Візуаль-ний Каламут-ність % витягуформи мАт1 піку (катіонваріанту (катіонаналіз (ОГ405 нм) вання (ексклю-зійна обмінна обмінна HPLC) HPLC) HPLC) Задов. 0,00 100 98,9 44,5 15,9 Задов. 0,00 101 98,4 42,1 15,6 Задов. 0,00 100 98,2 41,8 16,2 Задов. 0,00 98 97,6 39,3 17,4 Задов. 0,00 97 98,3 41,5 15,2 Задов. 0,00 99 98,2 41,9 16,0 Задов. 0,00 100 98,0 42,7 16,9 Задов. 0,00 99 97,9 42,1 19,5 Задов. 0,00 96 98,4 44,7 15,6 Задов. 0,00 99 98,5 44,3 15,9 Задов. 0,00 99 98,4 44,7 15,7 Задов. 0,00 100 98,7 44,2 15,5 Задов. 0,00 102 98,4 43,8 15,1 Задов. 0,00 102 98,6 45,2 15,9 Задов. 0,00 102 98,3 43,2 15,2 Результати репрезентативного експерименту, в якому оцінювалась стабільність препарату А, який містить 100 мг/мл мАт1, в шприці #3, представлені в таблиці 21 ниже. Таблиця 21 Стабільність препарату A, який містить 100 мг/мл мАт1, в попередньо наповненому шприці 3 з голкою, яка не знімається Опис шприца #3: Шприц: Манжетка: Гвинтовий ковпачок: Силіконізація: Темп. 37C 37C 37C 25C 25C 25C 5C 5C 5C 5C 5C 5C Час Початок 7 днів 14 днів 28 днів 1 місяць 2 місяці 3 місяці 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 9 місяців 12 місяців стандартний 1-мл шприц Daikyo Seiko CZ з голкою розміром 30G  ½ дюйма Daikyo D-21-6-1 з покриттям FluroTec 7028 не застосовується в даному випадку % % нативної кислотного % основного піку Візуаль-ний Каламут-ність % витягуформи мАт1 варіанту (катіон-обмінна аналіз (ОГ405 нм) вання (ексклюзій-на (катіонHPLC) HPLC) обмінна HPLC) Задов. 0,00 100 97,5 38,5 13,6 Задов. 0,00 101 97,5 40,0 14,0 Задов. 0,00 102 97,3 39,5 15,2 Задов. 0,00 101 96,4 38,3 15,7 Задов. 0,00 105 97,8 38,3 13,6 Задов. 0,00 102 97,2 37,4 14,9 Задов. 0,00 102 97,2 37,2 14,6 Задов. 0,00 104 98,2 38,1 13,3 Задов. 0,00 101 97,9 38,1 13,4 Задов. 0,00 101 97,8 38,4 13,1 Задов. 0,00 106 97,8 39,6 13,4 Задов. 0,00 105 97,9 40,8 13,4 Задов. 0,00 112 97,6 38,3 13,5 5 Результати репрезентативного експерименту, в якому оцінювалась стабільність препарату А, який містить 6 мг/мл мАт1, в шприці #3, представлені в таблиці 22 ниже. 19 UA 111825 C2 Таблиця 22 Стабільність препарату A, який містить 6 мг/мл мАт1, в попередньо наповненому шприці 3 з голкою, яка не знімається Опис шприца #3: Шприц: Манжетка: Гвинтовий ковпачок: Силіконізація: Темп. 37C 37C 37C 25C 25C 25C 5C 5C 5C 5C 5C 5C 5 10 15 20 25 Час Початок 7 днів 14 днів 28 днів 1 місяць 2 місяці 3 місяці 1 місяць 2 місяці 3 місяці 6 місяців 9 місяців 12 місяців стандартний 1-мл шприц Daikyo Seiko CZ з голкою розміром 30G  ½ дюйма Daikyo D-21-6-1 з покриттям FluroTec 7028 N не застосовується в даному випадку % нативної % кислот-ного % основного піку Візуаль-ний Каламут-ність % витягуформи мАт1 варіанту (катіон-обмінна аналіз (ОГ405 нм) вання (ексклюзій-на (катіонHPLC) HPLC) обміннаHPLC) Задов. 0,00 100 98,8 45,6 16,8 Задов. 0,00 101 98,7 46,2 17,2 Задов. 0,00 101 98,5 45,8 18,2 Задов. 0,00 101 98,3 44,5 19,8 Задов. 0,00 106 98,8 45,7 17,3 Задов. 0,00 103 98,8 44,3 18,1 Задов. 0,00 101 98,3 42,9 18,6 Задов. 0,00 105 99,0 46,0 16,6 Задов. 0,00 102 98,8 45,6 16,8 Задов. 0,00 101 98,8 45,7 16,3 Задов. 0,00 105 98,5 46,7 16,5 Задов. 0,00 106 98,8 47,8 17,2 Задов. 0,00 115 97,8 47,6 17,5 Результати цього ряду експериментів показують, що різні препарати залишаються відносно стабільними в заздалегідь наповнених шприцах, особливо при зберіганні при температурах, які становлять 25 °C і нижче, протягом одного місяця або довше. Приклад 9: Стабільність препаратів, які містять низькі концентрації мАт1, в скляних флаконах Оцінюється стабільність мАт1 в концентраціях, які становлять 0,2, 0,5, 1 і 2 мг/мл, в скляних флаконах під час досліджень в режимі реального часу і під час прискорених досліджень, результати яких на сьогоднішній день представлені в таблицях 23-27. У випадку цих експериментів стабільність мАт1 досліджується у флаконах з боросилікатного скла типу 1, виготовлених Schott. Препарат мАт1, який використовується в прикладах з 9 по 12, схожий з таким, описаним в таблиці 9, за винятком того, що концентрації антитіла, які використовуються нижче таких, досліджених раніше, і варіюють протягом періодів дослідження. Точні концентрації мАт1, які використовуються в кожному експерименті, відмічені в кожній таблиці, приведеній нижче. Стабільність препаратів перевіряли після зберігання в скляних флаконах при 45 °C, 25 °C і 5 °C протягом різних проміжків часу (в діапазоні від 7 днів до 6 місяців, залежно від умов, які досліджуються). Результати на сьогоднішній день вказують на збільшену деградацію (преципітацію, агрегацію, розщеплення і варіанти, які відрізняються зарядами) препаратів мАт1 в концентрації 0,2 і 0,5 мг/мл після інкубації при 45 °C протягом 7-14 днів. Крім того, відмічалося збільшення агрегації в препаратах мАт1 у всіх концентраціях 2 мг/мл після інкубації при 45 °C протягом 28 днів (> 15 % проти 2 % у випадку препаратів мАт1 в концентрації 6 мг/мл). Преципітація відмічалася, коли препарат мАт1 в концентрації 0,2 мг/мл зберігали при 5 °Cпротягом 6 місяців. Значна деградація/преципітація не відмічалася, коли препарати мАт1 в концентраціях, які становлять 0,5, 1 і 2 мг/мл, зберігали при 5 °C протягом 6 місяців. Таблиця 23 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях в склянних флаконах (інкубація при 45C) % витягненого мАт1 (HPLC із зворотною фазою) Концентрація мАт1 (мг/мл флакон) 0,2 0,5 0 100 100 7 91 97 14 67 94 28 40 82 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0. Час (дні) 20 1,0 100 103 101 100 2,0 100 109 108 106 UA 111825 C2 Таблиця 24 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях в склянних флаконах (інкубація при 25C) % витягненої нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл флакон) 0,2 0,5 0 98,1 98,4 7 98,3 98,6 14 98,1 98,7 28 97,6 98,5 56 92,2 96,6 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0. Час (дні) 1,0 98,6 98,6 98,6 98,6 98,1 2,0 98,5 98,7 98,7 98,7 98,5 Таблиця 25 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях в склянних флаконах (інкубація при 5C) % витягненого мАт1 (HPLC із зворотною фазою) Концентрація мАт1 (мг/мл флакон) 0,2 0,5 0 100 100 1 101 97 2 99 100 3 105 99 6 80 97 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0. Час (місяці) 1,0 100 105 107 105 102 2,0 100 109 110 111 106 Таблиця 26 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях в склянних флаконах (інкубація при 5C) % витягненої нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл флакон) 0,2 0,5 0 98,1 98,4 1 97,7 98,6 2 97,8 98,3 3 98,2 98,7 6 97,6 98,4 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0. Час (місяці) 1,0 98,6 98,7 98,3 98,7 98,6 2,0 98,5 98,8 98,7 98,3 98,5 Таблиця 27 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях в шприцах PFS або склянних флаконах (інкубація при 45οC) А. Склянні флакони % витягненої нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл флакон) 0,2 0,5 0 98,1 98,4 7 90,4 97,2 14 76,1 92,0 28 42,9 51,0 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 Час (дні) 1,0 98,6 98,3 96,1 83,7 2,0 98,5 98,2 97,8 81,7 1,0 98,5 98,2 97,8 96,7 2,0 98,4 98,1 97,8 96,6 5 В. Шприц. % витягненої нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл флакон) 0,2 0,5 0 98,1 98,6 7 97,6 98,1 14 97,9 97,9 28 96,9 96,8 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 Час (дні) 10 Приклад 10: Стабільність препаратів, які містять низькі концентрації мАт1, в шприцах BD і Ompi 21 UA 111825 C2 5 10 15 20 Оцінюється стабільність мАт1 в концентраціях, які становлять 0,2, 0,5, 1 і 2 мг/мл, в шприцах BD і Ompi під час досліджень в режимі реального часу і під час прискорених досліджень. Обидва шприци являють собою шприци об'ємом 1 мл, виготовлені з низьким вмістом вольфраму, і мають тонкостінну, незнімну голку розміром 27G  ½ дюйма. Шприц BD містить 0,8 мг силікону, нанесеного напиленням зверху обідка. Шприц Ompi містить 0,5 мг силікону, який нанесений за допомогою технології з використанням насадок, які опускаються, яка забезпечує більш однорідне покриття по всій довжині циліндра шприца. Стабільність препаратів перевіряли після зберігання в обох зазделегідь наповнених шприцах при 45 °C, 25 °C і 5 °C протягом різних проміжків часу (в діапазоні від 7 днів до 6 місяців, залежно від умов, які досліджуються). Результати, які представлені в таблицях 28-30, вказують на те, що стабільність мАт1 при 45 °C в шприці BD є значно вище, ніж у флаконі з боросилікатного скла типу 1, як визначено за допомогою аналізу з використанням HPLC із зворотною фазою (преципітації) і ексклюзійної HPLC (агрегації і варіантів розщеплення). Стабільність мАт1 при 45 °C в шприці Ompi була вище, ніж у флаконах з боросилікатного скла типу 1, але значно менше, ніж при інкубації в шприці BD. Ці дані наводять на думку, що силікон може блокувати взаємодію препарату зі скляною поверхнею, тим самим збільшуючи стабільність. Оскільки шприц BD містить більше силікону по всьому скляному циліндрі шприца, ніж шприц Ompi, це може пояснювати, чому препарат є більш стабільним в шприці BD, ніж в шприці Ompi. Значна деградація не відмічалася, коли мАт1 зберігали в шприцах BD і Ompi при 5 °C або 25 °C протягом 6 місяців, як визначено за допомогою аналізу з використанням ексклюзійної HPLC і катіонобмінної HPLC. Таблиця 28 Стабільність мАт1 в концентрації 0,6 мг/мл в шприцах BD, шприці Ompi або склянних флаконах (інкубація при 45C) % витягненої нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Флакон з скла типу Шприц BD Шприц Ompi 1 0 98,6 98,6 7 98,2 98,4 14 97,7 98,0 28 66,1 97,1 54 95,6 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 Час (дні) 98,9 98,5 98,5 84,5 24,5 Таблиця 29 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях в шприцах BD і Ompi (інкубація при 5C, ексклюзійна HPLC) % витягненої нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл) Час (місяці) Флакон BD 0,2 0,6 0,2 0,6 0 98,6 98,6 98,4 98,6 1 98,7 99,0 98,5 98,9 2 98,3 98,9 98,7 98,9 3 98,4 98,6 98,4 98,7 6 98,3 98,6 98,3 98,7 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 Ompi 0,2 98,7 98,5 98,6 98,3 98,2 0,6 98,9 98,9 98,9 98,7 98,7 25 Таблиця 30 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях у флаконі, шприцах BD і CZ (інкубація при 45C, HPLC із зворотною фазою) % витягненого мАт1 (HPLC із зворотною фазою) Концентрація мАт1 (мг/мл) Флакон Час (дні) 0,2 0,6 0 100 100 7 92 103 14 88 96 28 39 94 42 56 62 BD CZ 0,2 100 96 96 85 61 55 22 0,6 100 107 99 99 88 0,2 100 99 104 104 94 96 0,6 100 106 100 101 98 UA 111825 C2 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 5 10 15 20 25 Приклад 11: Стабільність препарату, який містить низькі концентрації мАт1, в альтернативних пристроях для зберігання. Проводяться дослідження стабільності мАт1 в інших пристроях для зберігання, які включають шприци West CZ (з циклічного поліолефіну), скляні флакони plus типу 1 Schott (з 100-200-нм шаром SiО2 на внутрішній поверхні флаконів з боросилікатного скла типу 1) і скляні флакони з боросилікатного скла типу 1 Schott із заповненим азотом вільним простором (повітря видалене з вільного простору флакона і замінене газом N2). Результати, представлені в таблицях 31-36, вказують на те, що стабільність препаратів мАт1 в концентраціях 0,2 і 0,6 мг/мл при 45 °C в шприцах CZ була значно вище, ніж в шприцах BD, як визначено за допомогою HPLC із зворотною фазою і ексклюзійною HPLC. Крім того, стабільність препаратів мАт1 в концентраціях 0,2 і 0,6 мг/мл при 45 °C в скляних флаконах plus типу 1 Schott була значно вище, ніж у флаконах типу 1, як визначено за допомогою HPLC із зворотною фазою і ексклюзійною HPLC. Значна деградація, яка визначається за допомогою ексклюзійної HPLC, відмічалася у випадку препарату мАт1 в концентрації 0,2 мг/мл у флаконах з скла типу 1 після інкубації при 25 °C або 5 °C протягом 3 місяців. Значна деградація не відмічалася у випадку препарату мАт1 в концентрації 0,2 мг/мл в скляних флаконах plus типу 1 Schott після інкубації при 25 °C або 5 °C протягом 3 місяців. Стабільність при 45 °C була значно вище у випадку препаратів мАт1 в концентрації 0,2 мг/мл у флаконах з скла типу 1 з верхнім азотним шаром, ніж у флаконах з скла типу 1 з повітряним вільним простором, як визначено за допомогою ексклюзійної HPLC. Видалення кисня з вільного простору мало найвищий стабілізуючий ефект на мАт1 в концентрації 0,2 мг/мл, приготоване з використанням 0,05 % полісорбату 20 (як і в препараті А), хоча збільшена швидкість деградація, проте, відмічалася в порівнянні з препаратом мАт1 в концентрації 0,2 мг/мл без полісорбату 20. Таблиця 31 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях у флаконі, шприцах BD іCZ (інкубація при 45C, ексклюзійна HPLC) % нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл) Флакон BD Час (дні) 0,2 0,6 0,2 0 98,8 98,7 98,5 7 96,5 98,3 97,6 14 82,0 97,2 95,8 28 58,2 64,5 70,6 42 48,8 56 36,4 62 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 CZ 0,6 98,5 98,3 97,2 95,8 93,4 0,2 98,7 97,0 97,1 96,1 93,3 89,6 0,6 98,6 98,3 97,0 96,2 90,3 Таблиця 32 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях у флаконі plus типу 1 (інкубація при 45C, HPLC із зворотною фазою) % витягненого мАт1 (HPLC із зворотною фазою) Концентрація мАт1 (мг/мл) Час (дні) Флакон типу 1 Флакон plus типу 1 0,2 0,6 0,2 0 100 100 100 7 92 103 99 14 88 96 100 28 39 94 101 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 0,6 100 106 99 100 Таблиця 33 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях у флаконі plus типу 1 (інкубація при 45C, ексклюзійна HPLC) % нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл) Час (дні) Флакон типу 1 Флакон plus типу 1 23 UA 111825 C2 0,2 0,6 0 98,8 98,7 7 96,5 98,3 14 82,0 97,2 28 58,2 64,5 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 0,2 98,7 97,3 97,4 70,6 0,6 98,6 98,3 97,2 95,2 Таблиця 34 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях у флаконі plus типу 1 (інкубація при 25C, ексклюзійна HPLC) % нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл) Час (місяці) Флакон типу 1 Флакон plus типу 1 0,2 0,6 0,2 0 98,8 98,7 98,7 1 98,7 98,7 98,6 2 98,2 98,6 98,2 3 92,5 97,2 97,5 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 0,6 98,6 98,8 98,6 97,4 Таблиця 35 Стабільність мАт1 в низьких концентраціях у флаконі plus типу 1 (інкубація при 5C, ексклюзійна HPLC) % нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Концентрація мАт1 (мг/мл) Час (місяці) Флакон типу 1 Флакон plus типу 1 0,2 0,6 0,2 0 98,8 98,7 98,7 1 98,9 98,9 98,5 2 98,7 98,9 98,6 3 96,5 97,7 97,9 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 0,6 98,7 98,7 98,6 97,7 Таблиця 36 Стабільність мАт1 в концентрації 0,2 мг/мл у флаконі типу 1 з верхнім азотним шаром (інкубація при 45C, ексклюзійна HPLC) % нативної форми мАт1 (ексклюзійна HPLC) Час (місяці) Повітряний вільний простір Азотний вільний простір 0 97,5 7 95,2 14 84,6 21 60,9 28 53,9 56 Препарат: 8 % сахарози; 0,05 % полісорбату 20, 10 мМ ацетат, рН 5,0 24 97,1 95,7 96,6 96,7 96,7 92,4 UA 111825 C2 5 10 15 Приклад 12: Ефект вольфраму на стабільність мАт1 у низькій концентрації Проводяться дослідження стабільності мАт1 після внесення не підданого фільтрації екстракту вольфрамового стрижня. Вольфрамові стрижні використовуються в процесі виробництва попередньо наповнених шприців для формування отвору в шприці Люєра. Екстракт вольфрамового стрижня, використовуваного на виробничій лінії BD, готували, використовуючи плацебо мАт1 (таке ж, як препарат А, але без мАт1). Не підданий фільтрації екстракт стрижня містить усі різновиди вольфраму, які можуть залишитися в шприці у вигляді забруднень (розчинні солі вольфраму і нерозчинні оксиди вольфраму). Результати ексклюзійної HPLC, представлені в таблицях 37 і 38, вказують на те, що стабільність при 25 °C препаратів мАт1 у концентрації 0,6 мг/мл, які містять рівні вольфраму 500 част/млрд, була менше, ніж у контрольному флаконі без вольфраму. Шприци з низьким вмістом вольфраму типово містять