Спосіб корекції мітохондріальної дисфункції при церебральній ішемії в експерименті

Реферат: Спосіб корекції мітохондріальної дисфункції при церебральній ішемії у експерименті шляхом призначення нейропротективного засобу. Призначають цереброкурин внутрішньочеревно раз на добу в дозі 0,02 мл/100 г ваги тварини протягом 21 дня. UA 104516 U (12) UA 104516 U UA 104516 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі медицини, а саме, клінічної фармакології, неврології, експериментальної медицини. Захворювання головного мозку займають третє місце серед захворювань населення промислово розвинених країн по поширеності і смертності. Вони приводять не тільки до зменшення тривалості життя населення, але і обмежують соціальну активність людини через розвиток когнітивного дефіциту, зниження здатності індивідуума до мислення, навчання, адекватного сприйняття інформації і прийняття рішень. При захворюванні мозку деструктивного і дегенеративного ґенезу відбувається порушення дихального ланцюга мітохондрій, енергетичного обміну, іонного гомеостазу клітки з підвищеним вмістом іонів кальцію, розвиток глутаматної ексайтотоксичності і пошкоджуючої дії нітрозуючого і оксидативного стресу, ініціація нейроапоптозу і загибель клітини. Активація нейроапоптозу, на думку багатьох дослідників, є першопричиною розвитку стійких порушень когнитивно-мнестичних функцій ЦНС. Існують переконливі докази того, що центральна роль в продукції АФК і подальшого розвитку апоптозу і некрозу належить мітохондріям. Вивчення можливостей корекції таких порушень має для практичної медицини велике значення і все вищевикладене є обґрунтуванням для пошуку високоефективних способів, здатних запобігати негативним процесам мітохондріальної дисфункції в клітині. Найближчим аналогом до корисної моделі є використання для корекції мітохондріальної дисфункції енерготропних препаратів - коензиму Q10, карнітину, вітамінів групи В, похідних янтарної кислоти та інших (Беленичев И.Ф. и др. Рациональная нейропротекция. - Донецк: Издй Дом Заславского, 2008.-264 с.). Спільною суттєвою ознакою найближчого аналога та корисної моделі є призначення нейропротективного засобу. Але при мітохондріальній дисфункції, що вже сформувалася, і "запуску" апоптичних процесів ці препарати малоефективні, оскільки не здатні брати участь в регуляції тих тонких ланок енергетичного метаболізму, інтермедіатами яких вони є. Крім того, раціональні основи для їх застосування погано розроблені, часто недостатньо використовуються ефективні підходи або переоцінюються неефективні, ліки застосовуються хаотично, без достатніх знань про їх можливості і особливості, без планування стратегії лікування з позицій доцільності. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалення способу корекції мітохондріальної дисфункції при церебральній ішемії в експерименті шляхом призначення засобу - цереброкурину, який безпосередньо впливає на механізми розвитку зазначеної патології, що забезпечить підвищення ефективності терапії. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб корекції мітохондріальної дисфункції при церебральній ішемії у експерименті, який полягає у призначенні нейропротективного засобу, згідно з корисною моделлю, призначають цереброкурин внутрішньочеревно раз на добу в дозі 0,02 мл/100 г ваги тварини протягом 21 дня. Корисну модель виконують наступним чином. Досліди проводили на 40 білих безпородних щурах обох статей, масою 160-180 г, отриманих з розплідника Інституту фармакології і токсикології АМН України. Церебральну ішемію моделювали шляхом необоротної двосторонньої оклюзії сонних артерій у білих безпородних щурів під тіопенталовим наркозом (40 мг/кг). Цереброкурин вводили внутрішньочеревно раз на добу в дозі 0,02 мл/100 г ваги впродовж 21 доби з моменту оклюзії сонних артерій. Коензим Q10 вводили за такою ж схемою в дозі 50 міг/кг. На 21-у добу тварин виводили з експерименту під тіопентал-натрієвим наркозом (40 мг/кг). Оцінку ефективності корекції мітохондріальної дисфункції проводили, беручи до уваги зниження деструкції мітохондрій нейронів гіпокампу. Для трансмісійного електронно-мікроскопічного дослідження тканину головного мозку (СА1 зона гіпокампу) фіксували 3 % розчином глутаральдегіда у буфері, рН 7,4 впродовж 2 годин при 40 С; потім дофіксували 1 % розчином чотириокису осмію у буфері впродовж 1,5 годин і зневоднювали в розчинах спиртів зростаючої концентрації (70 % спирт був насичений ураніл-ацетатом). Зразки тканини заливали в епоксидну смолу Епон-812, розведену ацетоном в 3, 2 і 1,5 раз відповідно, кожного разу залишаючи препарати для просочення смолою на ніч при кімнатній температурі. Останнім етапом було приміщення препаратів в нерозведену смолу при 37 °C впродовж ночі і подальша полімеризація епону при 60 °C до твердого скловидного стану. Серійні ультратонкі зрізи готували на ультрамікротомі LKB-III і забарвлювали свинцем за Рейнольдсом. Отримані препарати переглядали і фотографували в електронному мікроскопі. Механізм дії цереброкурину принципово відрізняється від дії інших препаратів стосовно корекції мітохондріальної дисфункції. Цереброкурин містить пептиди, що несуть в собі програму 1 UA 104516 U 5 аналізу стану і будування ЦНС. Таким чином, кінцевий ефект відрізняється через якісно відмінного механізму дії. Захисні ефекти цереброкурину на тканину мозку включають його оптимізуючу дію на енергетичний метаболізм мозку і гомеостаз кальцію, стимуляцію внутріклітинного синтезу білка, уповільнення процесів глутамат-кальцієвого каскаду і перекисного окислення ліпідів. Також препарат володіє вираженими нейротрофічними ефектами. Результати порівняння впливу Цереброкурину та Коензиму Q 10 наведені в таблиці. Таблиця Вплив Цереброкурину і Коензиму Q10 на стан мітохондрій СА1 - гіпокампу головного мозку тварин з церебральною ішемією на 21-у добу експерименту Група тварин Ложнооперовані (інтакт) (n=10) Церебральна ішемія (контроль) (n=10) Церебральна ішемія+ Коензим Q10 50 мг/кг (n=10) Церебральна ішемія + Цереброкурин 0,02мл/100г(n=10) 10 15 20 25 Кількість пошкоджених мітохондрій (абсолютне значення) 7,1±0,51 Процентна доля пошкоджених мітохондрій, % 8,5 % 87,9±3,7 97,4 % 80,1±5,1 (-8,8 %) 94,1 % 1 67,2 % 61,3±3,7* (-30,2 %) Примітка: * - p