Спосіб гум кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу

Реферат: Запропонований винахід належить до галузі медицини, а саме нейрохірургії і може бути використаний для проведення кількісного визначення ступеня агрегації клітин крові, що важливо для лікування хворих з запальними, онкологічними та гематологічними патологіями. Спосіб кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу включає в себе нанесення крові пацієнта на чутливий наношар золота, нанесений на предметне скло, та вимірювання зміни кута світлового потоку повного внутрішнього відбиття, яка залежать від ступеня агрегації еритроцитів, що специфічний патології, а в зразок крові, що аналізується, додатково вводиться мембраномодифікуючий препарат. Технічним результатом винаходу є зменшення похибки вимірювання. UA 107395 C2 (12) UA 107395 C2 UA 107395 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Запропонований винахід належить до галузі медицини, а саме нейрохірургії і може бути використаний для проведення кількісного визначення ступеня агрегації клітин крові, що важливо для лікування хворих з запальними, онкологічними та гематологічними патологіями. Для визначення кількісного ступеня агрегації клітин крові, що важливо для лікування хворих з запальними, онкологічними та гематологічними патологіями та необхідно для ранньої та більш точної діагностики запальних та онкологічних процесів у організмі хворих відомі способи, викладені в [1, 2, 3, 4] Відомий класичний спосіб визначення швидкості зсідання еритроцитів (ШЗЕ) у капілярах, розміщених у штативі Панченкова [5]. Загальним недоліком відомих аналогів є недостатня точність вимірювань. Найближчим технічним рішенням, що вибране за прототип, є спосіб кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу [6]. За цим способом на предметне скло з напиленим у вакуумі тонким нанорозмірним шаром золота (приблизно 50 нм), наносять кров пацієнта, далі крізь призму це скло опромінюється монохроматичним світлом (лазерне опромінення) під різними кутами, в залежності від ступеня агрегації еритроцитів формуються поверхневі плазмони різних параметрів, що призводить до формування поверхневого резонансу плазмону із фотонами, що попадають на золотий прошарок під певним кутом, специфічним для певного ступеня агрегації еритроцитів, далі за допомогою фотодіодів реєструють зниження інтенсивності потоку світла під строго певним кутом, що відповідає певним оптичним властивостям зразка крові, котрі залежать від ступеню агрегації еритроцитів, що корелює з певною патологією (запалення різних органів, злоякісні пухлини та метастази, захворювання крові). Цей спосіб (прототип) має ряд переваг в порівнянні з аналогами, а саме: - можливість точного кількісного визначення ступеня агрегації еритроцитів, що тісно пов'язана із видом патології; - значне прискорення визначення ступеня агрегації клітин крові (експрес-метод) у порівнянні з іншими уживаними. Недоліком прототипу є те, що при вимірюваннях може бути значні викиди результатів вимірювання, що впливають на загальну точність способу. Задачею запропонованого винаходу є зменшення похибки вимірювання. Поставлена задача вирішується тим, що пропонується спосіб кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу, який включає в себе нанесення крові пацієнта на чутливий наношар золота, нанесений на предметне скло, та вимірювання зміни кута світлового потоку повного внутрішнього відбиття, яка залежить від ступеня агрегації еритроцитів, що корелює з патологією і відрізняється тим, що в зразок крові, що аналізується, додатково вводиться мембраномодифікуючий препарат. Позитивний ефект запропонованого винаходу пояснюється тим, що нова операція по введенню мембраномодифікуючого препарату в зразок крові, що аналізується, дозволяє більш явно проявити властивості клітин крові, тобто визначити наявність та стадію захворювання. Новизна запропонованого винаходу полягає в новій сукупності відомих та запропонованої нової операції по введенню мембраномодифікуючого фармацевтичного препарату, що раніше не було відомо. Запропонований спосіб реалізується наступним чином. Кров центрифугували при 3000 об./хв. та видаляли плазму. Перед роботою кювету приладу промивали мийним засобом, а потім багаторазово безіонною водою. Потім кювету продували повітрям або азотом для видалення залишків води. Повітря (азот) відкачували насосом. До зразка крові після центрифугування додавали мембраномодифікуючі препарати верапамілу, кетаміну, мовалісу, натрію-АТФ и ФГА от 10 до 100.000 разів. Дослідження протипухлинної активності верапамілу, кетаміну, мовалісу та АТФ-натрію проводили на щурах первинною гліомою. А також застосовували запропонований спосіб при аналізі крові хворих пацієнтів в порівнянні з показниками ППР для здорових людей. Подальші операції по вимірюванню проводили відповідно прототипу. Дослідження показали, що найбільш ефективні результати досягались при введенні в зразки крові мембраномодифікуючих препаратів в мікродозах (при розбавленні від 1000 до 100 000 разів). Новий спосіб забезпечив зменшення похибки вимірювання у 1,5-1,8 разу. Крім того, на щурах було виявлено новий ефект-мікродози мембраномодифікуючих препаратів дозволили подовжити життя хворих з 20 діб до 26 діб. Тобто, виявлені нові ефекти дії мікродоз мембраномодифікуючих препаратів не лише при аналізі крові методом ППР, а і як терапевтичного засобу, який дозволив подовжити життя хворих тварин. 1 UA 107395 C2 5 10 15 20 Враховуючи оригінальність технічного рішення, автори просять дати способу назву ГУМ за початковими літерами прізвищ авторів, а саме: "Спосіб ГУМ кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу" Джерела інформації: 1. Н.Н. Серегина. Исследование схемы оптического сенсора на основе поверхностного плазменного резонанса. Журнал: Врачебное дело, 1994, № 5, с. 12-17. 2. Гридина Н.Я., Ушенин Ю.В., Розуменко В.Д. Особенности показателей периферической крови у пациентов с глиомами различной степени злокачественности, исследованные с помощью метода поверхностного плазмонного резонанса (ППР). Поленовские чтения. СанктПетербург, 2007. 3. Л.О. Лапаева. Спосіб діагностики гістотоксчної гіпоксії при невідкладних станах у людини. Укрпатент. Заявка № 97052288. 31.08.98. Бюл. № 4. 4. В.С. Ерхов, А.И. Агеенко. Способ діагностики злокачественной опухоли. Роспатент. Заявка № 95120436/14. 15.12.95. Бюл. № 23. 5. Н.Я. Гридина, А.М. Гупал, И.В. Сергиенко, А.Л. Тарасов. Анализ показателей скорости оседания эритроцитов при глиомах головного мозга. Журнал: Проблемы управления и информатики, 2007, № 6, с. 127-134. 6. Гридіна Η.Я., Ушенін Ю.В., Нахаба О.О., Рябінська О.О. Спосіб кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу// патент України на корисну модель № 43470 від 25.08.2009, бюл. № 16. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 25 Спосіб кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу, який включає в себе нанесення крові пацієнта на чутливий наношар золота, нанесений на предметне скло, та вимірювання зміни кута світлового потоку повного внутрішнього відбиття, який залежить від ступеня агрегації еритроцитів, що корелює з патологією, який відрізняється тим, що в зразок крові, що аналізується, додатково вводиться мембраномодифікуючий препарат. 30 Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2