Ад’ювант

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии и может быть использовано для повышения иммуностимулирующих свойств ветеринарных препаратов, применяемых для иммунизации сельскохозяйственных животных при инфекционных заболеваниях, с одновременным предупреждением гнойновоспалительных реакций в месте их введения. Целью изобретения является повышение иммуностимулирующих свойств адъюванта и предупреждение местных гнойно-воспалительных реакций. Для этого используют адъювант следующего состава (мас.%): вазелиновое масло — 89,5—89,9, ланолин — 9,9—10,0; новоимаин — 0,1—0,5. Ъ табл. оо ел 47-87 і 361765 Изобретение относится к ветеринарной иммунологии и может быть использовано для повышения иммуностимулирующих свойств ветеринарных препаратов, применяемых для иммунизации сельскохозяйственных животных при инфекционных заболеваниях с одновременным предупреждением гнойновоспалительных реакций в месте их введения. Цель изобретения — повышение иммуностимулирующих свойств адьюванта и предупреждения местных гной но-воспалительных реакций. * Для этого в известный масляный адьювант типа неполного адьюванта Фрейнда, содержащий вазелиновое масло и эмульгатор, дополнительно вводят препарат новоиманин при следующих соотношениях ингредиентов (мас.%): Вазелиновое масло Ланолин Новоиманин 19,5—89,9 9,9—10,0 0,1—0,5 5 '" 15 20 Получение адьюванта с граничными и средней дозами новоиманина. 1. Смешивают 89,9 г вазелинового мас- 25 ла и 10,0 г ланолина, состав хорошо перемешивают, автоклавируют при 0,7 атм в течение 30 мин или стерилизуют прогреванием в кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают до 20°С и добавляют 0,1 г новоиманина и снова тщательно переме- 30 шивают. 2. Смешивают 89,9 г вазелинового масла и 9,9 г ланолина, смесь стерилизуют и добавляют 0,3 г новоиманина. 3. Смешивают 89,6 г вазелинового масла и 9,9 г ланолина, смесь стерилизуют 35 и добавляют 0,5 г новоиманина. Подготовленный к работе адьювант соединяют с равным объемом водной суспензии антигена (вирусосодержащая культуральная жидкость, взвесь бактериальных клеток в физиологическом растворе и др.) и гомогени- 4 0 зируют с помощью гомогенизатора при 5000 об/мин в течение 15 мин. Полученная однородная эмульсия антигена готова к употреблению. 45 Выбор заданного количества новоиманина в составе адьюванта обоснован экспериментально: применение в рецептуре адьюванта новоиманина в количестве 0,1—0,5% обеспечивает повышение иммуностимулирующих свойств препарата и предупреж- 50 дает возникновение гнойно-воспалительных реакций. Специально проведенными экспериментами установлено, что содержание новоиманина манее 0.1% не оказывает статистически достоверного иммуностимулирующего действия, а выше 0.5% существенно не уве- 55 личивает этот эффект по сравнению с рекомендуемыми дозами и экономически нецелесообразно. Для сравнительной оценки иммуностимулирующих свойств предлагаемого адьюванта и адьюванта известного состава были поставлены специальные опыты по получению гипериммунных сывороток к вирусу трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Пример. Получение гипериммунных сывороток к вирусу трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Неполный адьювант Фрейнда получают путем смешивания 10 г ланолина с 90 г вазелинового масла. Смесь стерилизуют в кипящей водяной бане в течение 1 ч, а затем масляную смесь соединяют с равным объемом (по 10 мл) вирусосодержащей жидкости (вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней ТГС). Штамм «Риме», инфекционный титр которого 6 ТЦД 50/1,0, эмульгировали в гомогенизаторе при 5000 об/мин. Полученный препарат использовали для иммунизации кроликов. Предлагаемый адьювант получают смешиванием вазелинового масла, ланолина, и новоиманина в указанных выше соотношениях. Группу кроликов (самки весом 1,5—2,0 кг в количестве 24 голов) разделили на 4 равные группы (по б голов в каждой). Первая группа (контроль) — каждое животное иммунизируют 4-кратно с интервалом в 1 неделю препаратом вакцины из штамма «Риме» (ГДР) против трансмиссивного гастроэнтерита свиней с известным адьювантом в дозе 2 мл на голов> на 1 введение. Препарат вводят внутримышечно в мышцы бедра правой задней конечности. Вторую, третью и четвертую группы животных иммунизируют по той же схеме, тем же вирусом и в тех же дозах, что и животных первой группы. Однако, вместо известного масляного адьюванта используют в тех же количествах предлагаемый адьювант, в который вводят различные дозы новоиманина: второй группе • адьювант с добавлением 0,1 г новоиманина, третьей 0,3 г, четвертой — 0,5 г. У животных опытных и контрольных групп в течение всего срока эксперимента дважды в неделью определяют наличие инфильтратов или абсцессов. Через 7 дней после последней иммунизации животных обескровливают и исследуют тритры сывороточных антител к вирусу ТГС (табл. 1). В случае обнаружения инфильтратов и аебцессов в месте введения отбирают патматериал из очага и проводят патогиетологическое исследование (табл. 2). Анализ серологических изменений в сыворотках крови кроликов опытных и контрольной групп показал, что во второй группе кроликов, иммунизированных масляным адьювантом, содержащем 0,1 г новоиманина, вируснейтрализующие антитела к вирусу 1361765 трансмиссивного гастроэнтерита были выявнекрош в месте введения были ярко выражены и последующие экссудативные пролены в титрах в раза выше, чем в цессы приведены к формированию абсцесса. контрольной группе {1:245,3+19,1 и 1: :117,3+9,8 соответственно), в третьей и четУ всех животных второй—четвертой вертой группах -- в 2,7—3,2 раза выше групп, иммунизированных с применением (1:320+.29,2 и 1:373,3+31,2). предлагаемого адьюванта, гнойно-септичесМатематическая обработка результатов кие осложнения в месте введения отсутсвопо Монцевичуте-Эрингене показывает, что вали. различия средних титров антител у животных, иммунизированных предлагаемым адьюФормула изобретения вантом и известным адьювантом, статисти- 10 чески достоверны- (р