Спосіб моделювання увеїту, ускладненого субатрофією очного яблука

Спосіб моделювання увеїту, ускладненого субатрофією очного яблука, що включає введення хімічної сполуки в тканини та середовища ока експериментальної тварини, який відрізняється тим, що проводять пункцію передньої камери ока кроля і вводять в неї та одночасно з цим в склисте тіло 0,2мл 40 % розчину аргініну глутамату. (19) (21) u200704345 (22) 19.04.2007 (24) 10.07.2007 (46) 10.07.2007, Бюл. № 10, 2007 р. (72) Панченко Микола Володимирович, Кудіна Тетяна Олександрівна, Панченко Олена Миколаївна (73) ХАРКІВСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ 3 24841 cataract: a new model of cataractogenesis //Invest. Ophthalmol. Vis. Scien. -1993. -Vol.34, №13. P.3483-3488]. Одначе, всі зазначені моделі не дозволяють отримати увеїт, ускладнений субатрофією очного яблука. R.L. Myerowitz, R. Klaw, B.L. Johnson запропонована модель ендогенного ендофтальміту, що призводив до розвитку субатро фії очного яблука. Ендогенний ендофтальміт викликався у щурів віком 5 днів шляхом внутрішньоносового або внутрішньочеревного введення Haemophilus influenzae тип b, що призводило до розвитку клінічних ознак сепсису. Починаючи з 12 доби серед щурів, що дожили до цього, у 50% розвився метастатичний бактеріальний ендофтальміт, який переходив в панофтальміт і призвів до субатрофії очного яблука [Myerowitz R.L ., Klaw R., Johnson B.L. Experimental endogenous endophthalmitis caused by Haemophilus influenzae type b //Infect. Immun. 1976. -Vol.14, №4. -P.1043-1051]. Бездітко П.А., Панченко М.В., Дурас І.Г. (2002) запропонували модель увеїту, ускладненого набряком центральних відділів сітківки. Автори викликали даний увеїт шляхом введення аналога простагландина латанопроста в передню камеру ока. В очах розвивалась клінічна картина переднього увеїту, який супроводжувався набряком центральних відділів сітківки, клінічно і гістологічно подібного до такого у людей [Патент України №45856А, G09В23/28, G09В23/34 від 15.04.2002. Спосіб моделювання увеїту //П.А. Бездітко, М.В. Панченко, І.Г. Дурас. Офіційний бюл. "Промислова власність". -2002. - №4 (книга 1). -С.4.117]. Таким чином, введенням латанопроста в передню камеру ока можна викликати увеїт, ускладнений набряком центральних відділів сітківки. Цей спосіб моделювання увеїту вибраний нами за прототип, як найбільш близький по технічній суті та отриманому результату. В основу корисної моделі покладено задачу розширення арсеналу моделей увеїтів, зокрема моделювання увеїту, ускладненого субатрофією очного яблука. Задачу, яку покладено в основу корисної моделі, вирішують тим, що у відомому способі моделювання увеїту, ускладненого субатрофією очного яблука, що включає введення хімічної сполуки в тканини та середовища ока експериментальної тварини, згідно з корисною моделлю, проводять пункцію передньої камери ока кроля і вводять в неї та одночасно з цим в склисте тіло 0,2мл 40% розчину аргініну глутамату (глутаргіна). Аргінін є ендогеним донатором ендотеліального релаксуючого фактора - оксиду азоту, що відіграє важливу роль у біохімічних процесах в організмі. Проведеними клінічними дослідженнями встановлено, що при увеїтах спостерігається підвищення вмісту стабільних метаболітів оксиду азоту [Панченко Н.В., Бездетко П.А., Жуков В.И. и др. Изучение метаболизма оксида азота при осложненных формах увеитов //Офтальмол. журн. 2003. -№3. -С.38-40]. 4 Окрім того, гіперпродукція оксиду азоту, що приймає участь в регуляції кровотоку в судинному тракті ока [Архипова М.М., Ванин А.Ф. Новые доноры и ингибиторы оксида азота в лечении экспериментального тромбоза вен конъюнктивы //Тез. докл. VII съезда офтальмологов России. -М., 2000. -4.2. -С.339-340], як одного з найсильніших ендогенних вазоділятаторів [Kazuhiro Sase., Michel T. Expression and regulation of endothelial nitric oxide synthase //TCM. -1997. -Vol.7, №1. -P.28-37; Vanhoutte P.M., Auch-Schwelk W., Biondi M.L. et al. Why are converting enzyme inhibitors vasodilatators? //Br. J. Clin. Pharmacol. -1989. -Vol.28. -P.95-104; Vanhoutte P.M., Boulanger C.M., Illiano S.C. et al. Endothelium - dependent effects of converting enzyme inhibitors //J. Cardiovasc. Pharmacol. -1993. -Vol.22. -P.10-16], призводить до підвищення проникливості стінки судин та набряку тканин, посилення кровотоку зі зниженням або втратою реакції судин на пресорні фактори. Клінічними дослідженнями показана важлива роль порушень гемодинаміки в патогенезі субатрофії внаслідок увеїтів [Панченко Н.В., Дурас И.Г., Кудина Т.А., Вн укова К.А. Гемодинамические нарушения при увеитах, осложненных гипотонией и субатрофией глазного яблока //Тези міжнар. наук. симпозіуму "Дистрофічні захворювання органа зору". -Одеса, 2005. -С.90-91; Панченко Н.В., Кудина Т.А. Клинические и гемодинамические особенности эндогенных увеитов, осложненных субатрофией глазного яблока, у детей //Тези та лекції ІІІ наук.-практ. конф. з міжнар. участю "Актуальні проблеми медико-соціальної реабілітації дітей з інвалідизуючою очною патологією". -Київ: "Макрос",2006. -С.164-165]. Спосіб моделювання увеїту виконується наступним чином: після епібульбарної анестезії 0,5% розчином алкаїну виконували пункцію передньої камери ока і вводили в передню камеру 0,2мл 40% розчину аргініну глутамату (глутаргіна) та одночасно з цим вводили в склисте тіло 0,2мл 40% розчину аргініну глутамату (глутаргіна). Спосіб моделювання увеїту проводили на 14 кролях породи "Шиншила" вагою 2000-3000г. Аргініну глутамат (глутаргін) вводили в передню камеру та склисте тіло правого ока (ліве служило контролем). Перші клінічні ознаки увеїту спостерігалися у більшості кролів вже через 30 хвилин після початку досліду у вигляді помутніння в склистому тілі та ослабленні або відсутності рефлексу з очного дна. Через годину після початку досліду спостерігалася розгорнута клінічна картина експериментального увеїту: відмічалася перикорнеальна ін'єкція очного яблука, часто - з хемозом кон'юнктиви. Зіниця набувала овальної форми, з'являлися поодинокі задні сінехії. Малюнок райдужки був "стушованим". В цей час в багатьох очах з'являвся ексудат білуватого кольору в передній камері або на передній поверхні кришталика. Рефлекс з очного дна був відсутній. Через 3 години після початку досліду увеїт досягав свого "розпалу": посилювалася перикорнеальна ін'єкція очного яблука та хемоз кон'юнктиви. Спостерігався набряк рогівки. В переважній біль 5 24841 шості очей спостерігалося підвищення внутрішньоочного тиску до 30-40мм рт.ст. Увеїт ускладнювався офтальмогіпертензією. З кінця першої доби починалося зменшення виразності запального процесу та зниження внутрішньоочного тиску. На кінець другої - початок третьої доби експерименту виразність запального процесу значно зменшилась, проте зберігалася перикорнеальна ін'єкція очного яблука, опалесценція вологи передньої камери, ексудат в склистому тілі. При цьому офтальмогіпертензія змінювалася на гіпотонію і внутрішньоочний тиск коливався на рівні 11-12мм рт.ст. На 7 добу експерименту запальний процес в судинному тракті та гіпотонія утримувалися, у частини кролів спостерігалася поява новоутворених судин в райдужній оболонці. На 50-55 добу від початку досліду очі були практично спокійні, відмічалася атрофія райдужної оболонки, часткові потьмарення в кришталику, грубі помутніння склистого тіла та зменшення очного яблука в розмірі. Наявність субатрофії очного яблука підтверджувалася ультразвуковим дослідженням - відмічено зменшення переднє-заднього розміру на 45мм. Після виведення кролів з експерименту встановлено зменшення очного яблука. При гістологічному дослідженні енуклейованиз очей виявлені ознаки запального процесу в судинній оболонці. Таким чином, експериментальний увеїт ускладнився субатрофією очного яблука. Таким чином, шляхом пункції передньої камери ока і введення в передню камеру 0,2мл 40% розчину аргініну глутамату (глутаргіна), та одночасно з цим введенням в склисте тіло 0,2мл 40% розчину аргініну глутамату (глутаргіна), можна отримати у кроля увеїт, ускладнений субатрофією очного яблука. Спосіб ілюструється прикладом. Приклад №1. Протокол досліду №9. Кролю породи "Шиншила", сірого кольору вагою 2400г. проведено вимірювання внутрішньоочного тиску (ВОТ). В обох очах ВОТ коливався в межах від 17 до 19мм рт.ст. і в середньому ВОТ OD=18,1±0,2мм рт.ст. Першої доби о 15-00 під епібульбарною анестезією (розчином алкаїну 0,5%) на 11-00 виконана пункція передньої камери правого ока (ліве око контроль) і введено в передню камеру 0,2мл 40% розчину аргініну глутамату (глутаргіна), одночасно через розріз склери до судинної оболонки в верхнє-зовнішньому квадранті в 7мм від лімба в склисте тіло введено 0,2мл 40% розчину аргініну глутамату (глутаргіна). О 15-30. 30 хвилин після початку досліду. Відмічається помутніння в склистому тілі і відсутність рефлексу з очного дна. О 16-00. Праве око: виражений хемоз кон'юнктиви у вер хньому та верхнє-зовнішньому відділі, перикорнеальна ін'єкція очного яблука. Зіниця овальної форми, з поодинокими задніми сінехіями. Райдужка зі "стушованим" малюнком. В передній камері - ексудат білуватого кольору на передній 6 поверхні кришталика. Рефлекс з очного дна відсутній. Діагноз: Передній увеїт правого ока. О 18-00. 3 години після початку досліду. Ліве око спокійне. ВОТ OS=19мм рт.ст. Праве око: виражена перикорнеальна ін'єкція очного яблука. Хемоз кон'юнктиви посилився. Рогівка трохи набрякла. Райдужка зі "стушованим" малюнком. Ексудат білого кольору на кришталику зберігається. Рефлекс з очного дна відсутній. ВОТ OD=41мм рт.ст. На другу добу о 12-00. 21 година після початку досліду. Праве око: хемозпочав зменшуватися. Перикорнеальна ін'єкція очного яблука зберігається. Утримується опалесценція вологи передньої камери. Кришталик прозорий. В склистому тілі визначається ексудат білуватого кольору. Деталі очного дна не видно. О 18-00. Друга доба після початку досліду. Ліве око спокійне. ВОТ OS=18мм рт.ст. Праве око: перикорнеальна ін'єкція очного яблука та хемоз кон'юнктиви зберігається. Волога передньої камери опалесцює. Кришталик прозорий. В склистому тілі ексудат зберігається. Деталі очного дна не видно. ВОТ OD=23мм рт.ст. На третю добу о 10-00. 43 години після початку досліду. Ліве око спокійне. ВОТ OS=17мм рт.ст. Праве око "заспокоюється". Кон'юнктива злегка набрякла. Хемозу немає. Легкий набряк рогівки. Передня камера середньої глибини. Легка опалесценція вологи передньої камери утримується. Кришталик прозорий. Склисте тіло стало майже прозорим, але залишається дифузний ексудат. Рефлекс з очного дна ослаблений. ВОТ OD=12мм рт.ст. О 16-00. Чотири доби після початку досліду. Очний статус без динаміки. ВОТ OS=18мм рт.ст, ВОТ OD=12мм рт.ст. О 12-30. 7-ма доба після початку досліду. Ліве око спокійне. ВОТ OS=17мм рт.ст. Праве око: Перикорнеальна ін'єкція в усіх відділах. Волога передньої камери опалесцює. Зіниця овальної форми, в райдужці у верхньовнутрішньому відділі з 11-00 до 13-00 - одиничні новоутворені судини. Рефлекс з очного дна ослаблений. ВОТ OD=12мм рт.ст. 50-та доба від початку досліду. Праве око практично спокійне, очне яблуко зменшено в розмірі. Рогівка прозора, передня камера середньої глибини, волога прозора. Зіниця округлої форми, райдужка більш світлого кольору, ніж на парному оці, атрофічна. В кришталику часткові помутніння. В склистому тілі визначаються грубі помутніння, через які очне дно не видно. ВОТ OD=12мм рт.ст. Клінічно увеїт ускладнився субатрофією очного яблука. 55-та доба від початку досліду. За допомогою апарату SonoMark SM 400М (Oftalmobiometr фірми "Innomed"), а також "Sonoline-SI-450" та "Sonoline Versa-Pro" (фірми "Siemens", Німеччина) встановлено, що переднє-задній розмір правого очного яблука зменшився на 5мм (в порівнянні з дослідженням до початку досліду). Розмір правого ока на 4,7мм менше, ніж лівого. Таким чином, експериментальний увеїт ускладнився субатрофією очного яблука. 7 Комп’ютерна в ерстка Л.Литв иненко 24841 8 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601