Спосіб бездеградаційної експрес-діагностики вірусної інфекції у рослин

Спосіб бездеградаційної експрес-діагностики вірусної інфекції у рослин шляхом вимірів Винахід належить до фізюлопі рослин та може бути використаний в сільському господарстві для бездеградаційної експрес діаі поетики стресового стану рослин, викликаного вірусною інфекцією В теперішній час бездеградаційних об'єктивних експрес-методів ранньої діагностики вірусних захворювань рослин не існує Відомий метод ранньої діагностики вірусної інфекції рослин на основі визначення титру вірусів в рослинній тканині [Гнутова Р В Серология и иммунология вирусов растений - М Наука, 1993 301 с I Проте такий спосіб потребує порушення ЦІЛІСНОСТІ рослинного організму Крім того, для його застосування необхідно використання дорогих реактивів, він трудомісткий та екологічно небезпечний Недоліки перерахованих способів усуває спосіб діагностування стресів рослин на основі вимірів вмісту хлорофілу за допомогою спектральною параметру, що являє собою відношення амплітуд максимумів першої похідної від величини спектра відбиття в області червоного краю l?/h, вибраний нами як прототип (Шадчина Т М , Кочубей С М Аэродистанционное измерение содержания хлорофилла и азота в посевах озимой пшеницы // Физиолоіия и биохимия культ растений - 199? - Т 24 - С 187-191) Цей спосіб є бездеградаційним та об'єктивним по відношенню до визначення стресового стану рослин, однак він не дозволяє визначити тип стресу, тобто є неспецифічним методом тестування стресів вмісту хлорофілу в листках за допомогою спектрального параметру, являючого собою величину відношення амплітуд максимумів першої похідної від значення спектру відбиття в області червоного краю І?/Іі який відрізняється тим, що додатково досліджують динаміку змін вищевказаного параметру в часі і. при виявленні характерного для вірусної інфекції короткочасного підвищення КІЛЬКОСТІ хлорофілу в листках з послідуючим його зниженням, діагностують біотичний стрес рослин, викличний фгтовірусною інфекцією Завданням цього винаходу є розробка способу діагностики стресових станів рослин, який би відрізнявся більшою специфічністю по відношенню до фітовірусної інфекції Спосіб бездеградаційної діагностики стресів рослин вірусної етнологи, що базується на візуальній ОЦІНЦІ забарвлення листя, є суб'єктивним та дозволяє діагностувати вірусну інфекцію на досить ранніх етапах розвитку патологічного процесу Поставлене завдання досягасться тим, що спосіб тестування фітовірусної інфекції полягає в вимірюванні вмісту хлорофілу за допомогою спектрального параметру, що являє собою величину відношення амплітуд максимумів першої похідної від значення спектру відбиття в області червоною краю Іг/Іі Він відрізняється тим, що з метою підвищення специфічності до тестування фітовірусної інфекції, досліджують динаміку його змін в часі, і при виявленні характерного для вірусної інфекції короткочасного підвищення КІЛЬКОСТІ хлорофілу в листках з послідуючим його зниженням діагностують стрес вірусної етіології Пропонується спосіб, що демонструється такими прикладами застосування Приклад 1. Визначаємо вміст хлорофілу в листках рослин тютюну Потім розподіляємо рослини на дві групи, з яких одну групу рослин інфікуємо вірусом тютюнової мозаїки (Tobacco mosaic Tobamovirus), а іншу залишаємо як контроль Кожні чотири дні вимірюємо вміст хлорофілу у інфікованих та здорових рослин Дані вимірів представлені в таблиці 1 Можна побачити, що в перші ВІСІМ CO со о in со 35033 (2) Дані визначення вмісту хлорофілу показані в таблиці 3 Розгляд динаміки змін фізіологічного параметру у часі показує монотонне зниження вмісту хлорофілу в листках у варіанті з дефіцитом азотного живлення по відношенню до контролю, що відрізняється від динаміки змін хлорофілу в лисгках при фітовірусній інфекції Таким чином, спосіб бездефектної експресдіаіностики вірусної інфекції у рослин, який пропонується, дозволяє 1 Об'єктивно тестувати фітовірусну інфекцію на досить ранніх етапах розвитку патологічного процесу 2 Спосіб може бути використаний для дистанційного тестування фітовірусно» інфекції, що дозволить проводити раннє виявлення патологічних процесів у рослин на великих площах в реальному масштабі часу. днів після зараження рослин вміст хлорофілу в листках у інфікованих рослин вищий, ніж в контрольних Далі він починає знижуватися та після 14-to дня стає суттєво нижчим порівняно з контролем За характером змін вмісту хлорофілу робимо висновок про стрес рослин, викликаний фітовірусною інфекцією Приклад 2. Визначаємо динаміку змін вмісту хлорофілу в листках дурману, здорових і а інфікованих Х-вірусом картоплі Отримані дані записуємо в таблицю 2 Аналізуючи отримані дані, спостерігаємо картину підвищення вмісту хлорофілу в листках інфікованих вірусом рослин з наступним його зниженням, що є свідоцтвом розвитку фітовірусної інфекції Приклад 3. Визначаємо динаміку зміни вмісту хлорофілу в листках рослин тютюну, який вирощувався в умовах оптимального рівня мінерального живлення рослин (1), дефіцигу азоту Таблиця 1 Вміст хлорофілу в листках тютюну Nicotiana debney контрольних та інфікованих ВТМ рослин Вміст хлорофілу (а+Ь) мг/г мг/дм2 Площа поверхні листка, м' х 10' Час після Інфікування Зразок Вага висічки (м.) 4 дослід 28,17±0,92 0,80*0,42 1,94*0,62 контроль 29,25±1,14 0,77±0,17 2,00±0,24 ДОСЛІД 24,00±1,21 0,92±0,08 1,91 ±0,33 0,77±0,05 контроль 26,83±1.05 0,97±0,19 2,16±0,18 0,83±0,04 дослід 20,17*0,88 1,23±0,16 2,17±0,34 0,82±0,04 контроль ?8,0±1,31 0,71 ±0,08 2,12±0,23 0,80±0,03 ДОСЛІД 2,72±0,03 3,13*0,15 0,88±0,05 37,0±2,2 контроль 1,19±0,02 2,56tO,21 0,80±0,03 21,3±1,9 8 14 17 ; ДОСЛІД 21,67±1,25 1.67±0,09 3,17±0,14 0,87±0,01 29,4*1,7 контроль 24 25,17±1,36 1,07±0,19 2,34±0,23 0,81 ±0,02 18,1*2,0 Таблиця 2 Вміст хлорофілу в листках дурмана Datura stramonium дослідних та інфікованих ХВК рослин Час після інфікування Вміст хлорофілу (а+Ь) мг/г мг/дм 2 Вага висічки (мг) ДОСЛІД 37,05*1,31 33,14±1,18 3,55*0,03 5.76*0,04 контроль 7 Зразок 3,55±0,16 5,13*0,76 21 ДОСЛІД 34,28*0,92 4,37*0,02 6,42*0,07 1,05±0,01 контроль 14 34,6*1,24 4,00*0,05 6,21*0,11 1,02*0,02 дослід 33,31*1,19 4,48*0,01 6,48±0,01 1,06*0,01 контроль 35,68*1,36 3,92*0,10 5,87*0,16 0,98*0,02 35033 Таблиця З Вміст хлорофілу в листках озимої пшениці сорту Лютесценс - 7 у фазу виходу в трубку Вміст хлорофілу (а+Ь) мг/г мг/дм* Варіант досліду 1 норма азоту 3,29±0,01 6,27±0,01 1,15±0,02 1 норма азоту + підкормка у фазу виходу в трубку 3.71 ±0,08 8,05±0,06 1,47±0,02 без азоту 2,43±0,01 3,83±0,01 0,74±0,01 2 норми азоту 3,47±0,10 7,76±0,23 1,43*0,03 Тираж 50 екз. Відкрите акціонерне товариство «Патент» УкраТна, 88000, м Ужгород, аул. Гагаріна, 101 (03122)3-72-89 (03122)2-57-03