Спосіб підвищення імуногенності вакцини бцж

Спосіб підвищення імуногенності вакцини БЦЖ (Bacillus Galrnette-Geunne), за допомогою підшкірного введення тваринам вакцини БЦЖ з імуномодуляторами, який відрізняється тим що в якості імуномодуляторів використовують синтетичний «муностимулятор (СІС 0 95 см*) та біологічний імуностимулятор (БІС 0,95 см*), а введення їх здійснюють одночасно з вакциною БЦЖ (0,1 смэ) в КІЛЬКОСТІ 2,0 см 3 дворазово з інтервалом 14 днів Винахід відноситься до імунологи і може бути використаний для підвищення протективних властивостей протитуберкульозних вакцин у тварин в практичній роботі лабораторій ветеринарної медицини і науково-дослідних інститутах Існує спосіб застосування вакцини БЦЖ для профілактики туберкульозу молодняка великої рогатої худоби Спосіб включає введення телятам дні ще дві ін'єкції З інтервалом в сутки Левомізопь використовують у вигляді 3%-ного стерильного розчину по тій же схемі Недоліком даного способу є те що імуномодулятори вводяться 4 рази і досягається незначне збільшення строку проживания у лабораторних тварин, а туберкульозні зміни в паренхіматозних органах залишаються у всіх дослідних тварин при застосуванні вакцини БЦЖ з нуклеінатом натрію Строки проживання морських свинок становлять 88.6+3 7 днів, у групі і БЦЖ і левомізопем - 93,5+2,0 днів в контролі (БЦЖ без імуномодуляторів) - 84,6+4,0 днів В основу винаходу, що передбачається, ггаставлено завдання - розробити спосіб профілактики туберкульозу тварин введенням таких імуномодуляторів, які б забезпечили підвищення імуногенних властивостей БЦЖ та підвищення за хисного ефекту Поставлене завдання вирішується за допомогою використання для підвищення імуної енних властивостей вакцини ЬЦЖ двох імуномодуляторів синтетичного імуносіимулятора (СІС) та біологічного імуностимулятора (БІС), які вводять и комплексі з вакциною БЦЖ з одномоментним введенням препаратів тваринам в дозах БЦЖ - 0 1 см 3 СІС та БІС по 0,95 с м ^ Повторне введення препараті» здійснюють через 14 днів у ВІЦІ вщ 2 тижнів до 2 МІСЯЦІВ вакцини внутрішньошкірно в область ши» в кількості 0 3 см 3 (10 мг сухого препарату розводять 3,0 см 3 фізіологічного розчину) Через 1,5-2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцина ції телят досліджують вн/трішньошкірною туберкуліновою пробою Телятам, не реагуючим на туберкулін після першого введення вакцини, її вводять повторно в пй же дозі (Петров Р В , Хаитов Р М Всесоюзный съезд иммунологов Тезисы докладов г Догомыс - 1989, т 1 , стр 169) Однак захист від захворювання туберкульозом великої рогатої худоби, що обумовлений застосуванням вакцини БЦЖ, діє короткий строк і харакіеризується недостатньо високою напруженістю захисту, часто спостерігаються прориви імунітету Відомий також спосіб застосування для профілактики туберкульозу вакцини БЦЖ разом з імуномодуляторами, найбільш близький до заявляемого по технічній суп (прототип) В якості імуномодуляторів застосовують нуклеінзт натрію (натрієва сіль РНК) і левомізопь (Пар А Левомизоль как иммуномодулятор , Будапешт 1980, стр 38) Спосіб включає в себе внутрішньошкірне введення вакцини БЦЖ з нуклеінатом натрію у вигляді 5% стерильного розчину у дозі 5 0 мг/кг живої маси по схемі перших дві ін'єкції - чррез день, три СІС є продукт ЖИТТЄДІЯЛЬНОСТІ мікобак терій (низькомолекулярні білки), який адсорбований на гідроокис алюмінію, БІС-сенсибілюована до мікобактерій, законсервована еритроцитарна суспензія крові великої рогатої худоби Введення в організм СІС збуджує посилення в макрофагальній системі генерації активних кис CD CO О ІП CO 5Г невих радикалів та залучення до імунної ВІДПОВІДІ антитокгичниу антитіл Концентрація білків в рот чині рівна ? 0 мі/гм ч Висока концентрація білків адсорбованих на адюпант (гідроокис алюмінію) визиваг активну імунну аідповФЬ імунокомпегент них клітин до антигену Введення в оріанпм ЫС збуджує активацію процесів аглютинації та пррципітацч що о свою чергу підвищує інтенсивність та довготу імунних ВІДПОВІДАЙ При інтенсивному збудженні імунохом петєнтних клгтмн за допомогою імуномодупяторів СІС та БІС в процесі формування кооперативної дії ^ вакциною БЦЖ і СІС та БІС які підвищують захист властивості органпму гварим до туберку льотної інфекції З МРТОЮ порівняння способів профілактики туберкульозу з використанням різних імуномодуляторів ироврдрнии досл'д на морських свинках з левомічолом нуклеінатом натрію та СІС і БІС Результати порівняльного аналізу наведені в таблице 1 Результати дослщш що представлені в таб лиці 1 свідчать про те що при використанні СІС і БІС імуномоцулягорів разом з вакциною БЦЖ дворазово через 14 днів 90% тварин були здоровими лабораторними методами туберкульо чу у них не установлено В той же час при використанні нуклеінату натрію І левомполю рачом з ЬЦЖ у 50% та 40% тварин установлено туберкульоз При використанні однієї вакцини БЦЖ із ім/момодуляторів туберкульоз установлено у 50% тварин В таблиц? 2 приведені результати порівняль ного випробовування різних способів профілактики туберкульозу у морських свинок за допомогою імуномодуляторів У груп» де не було вакцини в усіх твзрин спостерігали генерапізовану форму туберкульозу Винахід ілюструється слідуючими прикладами Приклад 1 Дослід проводили на морських свинках КЛІНІЧНО здорових масою 300-350 г Для роботи брали 90 тварин яких розподіляли на 9 груп по 10 голів в кожній (таблиця 3) 1 група Усіх морських свинок заражали культурою збудника туберкупьозу шт Вале в дозі 0 00001 мг/см в область паха 2 група Усіх тварин через 2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцинації БЦЖ (0 1 мг/см3 підшкірно) заражали таким же чином як і морських свинок першої групи 3 група Морських свинок імунізували БЦЖ разом з СІС та БІС в доз* 1,9 мг/см3, дворазово з інтервалом 10 днів а через 2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакциня цій тварин заражали (як у першій групі) 4 група Морських свинок імунізували БЦЖ т разом з СІС та БЮ в дозі 1 9 мг/см3 дворазово з інтервалом 11 днів, а через ? МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцинацій тварин заражали (як у першій групі) 5 група Морських свинок імунізували БЦЖ раюм ч СІС та БК" в дозі 1 9 мг/см3 дворазово з інтервалом 1? днів а через 2 місяці після вакцинацій тварин заражали (як у першій групі) 0 група Морських свинок імунізували БЦЖ разом і СІС та БІС в дозі 1 9 мг/см3 дворазово з інтервалом 13 днів а через 2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцина цій тварин заражали (як у першій групі) 7 група Морських свинок імунізували БЦЖ разом з СІС та Б'С в дозі 1 9 мг/см3 дворазово з інтервалом 14 днів а через 2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцинацій тварин заражали (як у першій групі) 8 група Морських свинок імунізували БЦЖ разом і СІС та БІС в дозі 1 9 мг/см3 дворазово з інтервалом 16 днів а через 2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцина цій тварин заражали (як у першій групі) 9 група Морських свинок імунізували БЦЖ разом з СІС та БІС в дозі 1 9 мг/см3 дворазово з інтервалом 21 днів а через 2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцинацій тварин заражали (як у першій групі) В процесі досліду (145 днів) враховували строки загибелі тварин і наявність туберкульозних уражень В таблиці 3 показано вплив інтервалу введення иа протитуберкульозний імунітет у морських свинок, заражених збудником туберкульозу бичачого виду шт Вале Приклад 2 Випробовування способу проводили на 4 групах морських свинок Зараження контрольної і експериментальних груп проводили М bovis шт Vallae в дозі 0 00001 мг/см на одну голову 1 група Десять морських свинок заразили збудником туберкульозу бичачого виду М bovis шт Vallae в дозі 0 00001 мг/см3 на одну голову 2 група Тварин (10 гол) імунізували вакциною БЦЖ в дозі 0 1 мг/см3 підшкірно і заражали через 2 МІСЯЦІ після вакцинації як і тварин 1 групи 3 група Морських свинок (10 гол) імунізували вакциною БЦЖ в дозі 0 1 мг/см3, і одночасно вводили СІС та БІС в дозі 1 9 мг/см3, підшкірно Через 2 МІСЯЦІ тварин заражали 4 група Морських свинок (10 гол) »мунізували вакциною БЦЖ в дозі 0 1 мг/см3, і одночасно вводили СІС та БІС в дозі 1,9 мг/см3 підшкірно, дворазово з інтервалом 14 днів Через 2 місяці вакцинацій тварин заражапи Через 5 МІСЯЦІВ після зараження тварин убивали проводили патологоанатомічні і бактеріологічні дослідження лімфатичних вузлів і паренхіматозних органі В таблиці 4 приведені дані випробовування способів профілактики туберкульозу у морських свинок за допомогою СІС і БІС Таким чином, пролонуємий спосіб профілактики туберкульозу тварин, дозволяє підвищити імуногенні властивості вакцини БЦЖ, тобто підвищити захисний ефект * 35036 Таблиця 1 Туберкульозні зміни Kfrtb-ть гол. % Спосіб тварин, гол. Тривалість життя, дні Нуклеінат натрію (відомий) 15 мг+15мг через 14 днів 10 92 5 50 Левомізол (відомий) 0,5 мг+0,5 мг через 14 днів 10 4 40 БІС 0,95 мг+СІС 0,95 мг дворазово через 14 днів 10 95 Забиті нэ 145 день 1 10 КІЛЬКІСТЬ Таблиця 2 Кількість голів Установлено туберкурцоз 10 Спосіб 10 із ^0 Контрольне зараження Вакцинація БЦЖ + зараження 10 5 із 10 Вакцинація БЦЖ разом з нуклеінатом натрію + зараження 10 5 із 10 Вакцинація БЦЖ разом з левомізолем + зараження 10 4 із 10 Вакцинація БЦЖ + СГС 0.95 мг і БІС 0,95 мг + зараження 10 2 із 10 10 1 із 10 Вакцинація БЦЖ + СІС 0,95 мг і БІС 0,95 мг + повторне введення через 14 днів + зараження Таблиця З П^рше введення СІС+БІС доза, мг Друге введення СІС+БІС доза, мг Термін виживання, дні Наявність туберкульозних змін ГОЛІВ % 100 10 (контрольне зараження) 65 10 2 10 (контрольне зараження) 95 5 50 3 10 10 1,9 1,9 125 2 20 4 10 11 1,9 1,9 125 2 20 5 10 12 1,9 1,9 130 1 10 6 10 13 1.9 1,9 135 1 10 7 10 14 "со ГОЛІВ Інтервал між введеннями СІС+БІС дні 145 1 10 8 10 16 "со "со Група Кількість 1,9 145 1 10 9 10 21 1,9 1,9 142 1 10 1 Таблиця А Група Спосіб КІЛЬКІСТЬ ГОЛІВ 1 Контрольне зараження 2 Вакцина + зараження М bovi's 3 Вакцина + СІС і БІС (1,9 см3) + зараження 4 Вакцина + СІС і БІС (1,9 см3) дворазово з інтервалом 14 днів + Установлено туберкульоз Тираж 50 екз Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м Ужгород, вул. Гагаріна, 101 (03122)3-72-89 (03122)2-57-03 о о о зараження 2 із 10 о 10 із 10 1 ізЮ 5 із 10