Спосіб виготовлення інактивованої вакцини проти сальмонельозів тварин

МП К в А61К.39/102 С'цосіб виготовлення шактивованої вакпици ироїя сальмонсльозів ікариц Передбачуваний нмначід нідносигься до ветеринарної мікробіології і оютехнологп. зокрема до способів виготовлення вакішн проти саяьмонельозш тварин, яка може буї и никориеіана дня шунопрофмакіимі -.ахкорювань сапьмонельочноі етіппоги ІСНУЮТЬ способи одержання концентрованної формо пвакцини проти паратифу гелях вакцини про ги паратифу(ЬальмонельозуУ) поросят, які передбачують культивування виробничих штамів сальмонел в рідкому живильному середовищі, роюяв денні оакіеріаітьноі суспензії по конценграїш 4 мпрдмкркл в і мл фпюітопчним роччином NaCl. внесенням в одержану суспензію au"ioBaHrv га шактивашю одержаної суміші форма ином Даш вакцинні препаряіи f тшчккими за технічним рішенням по ІЯЯВНЯГМОГО обипг™Ве1ерин*фныепрепарагы Сіфавочник Подретт ДФ Оси гне 19Я і) Недоуками вкачаних біопрепаратів є те що їх ^астпсуиання: »ндукур у тварин ім\'нпеі переважно до СОМЇПИЧНИХ(О-) антигенів сядьмонеп нілиовідних серогипін В гоц же час вмомо \\ю на початкових етапах ртвипо/ с»пьмонепьо^»юі шфекіиі іфовіпна рпкь на^ежиль оакіеріалкним структурам які сприяють копонпації -їбулника на ешіеніотшгах, ^окрема антиі-енам адгези, а на ошьш ппніх стад ія х - с уттєвого знач ення наб ув акпь іо ксич ні фак тори збудншив(Данина ЛМ АДГЄІИВНЬІЄ свойства ^теробчісіерийісааьмоя^їїїї и шигечті) - впчбудидспеи опрых кишечных инфектши Авюреф лисе канд мед наук М - 1989 і ) Протовпом може Own "Vi ~ поітисахаридная бркчччоіифошая вакцина" (Сер ия г ^хнич еских до кладов BO' i. J49 8^0. 199? - с 19-40). д е використовую і ь як проіекіивний ангиген очишении Vi-пошсахалшк введення цієї ваюдини пчОораїорним тваринам індукує наро^ж\' у них сировзіочних ангипл і певний прегтективний ефеет Але, застосування даною біопрепарату не забезпечує захисту від хвороботворної ДІЇ збудників, яким ітетиві феномени адгезії і іоксиноуіворешія В основу винаходу, що передбачається, поставлено завдання одержання інактивовчної ВЯКПЇЇНИ тфоти сальмопеш-озш тварин, в якій, як протективш антиніени. використ^влються екзотоксини і адгезини ^будників ПостаРїїена задача вирішується зав л яки том^' ідо вакцина мстить поліргтійнгніш комплекс протективних антніенів (екзотоксинів г^ ІДГЄЗИНІВ) За даними нчрамефями рішення, що заявляється відповідач критерію и су^^ві ознаки" Суть винаходу к ^o^гy9 що до складу вакцини вводять екзотоксини виробничих штямів сальмонел та відокремлені гід бактеріальних юіпин адгезивні антшєни, при чом^' адгезинні антигени відокремлюють шляхом прогрівання суспеіпп бакмаси в фосфатно-сечовинному буфері при 60 С - 20 хвилші і '.оіьопаш яні ш єни шактивук* іь формалиюм ч яг ядмювгип рикорисіоі'.уіоіь і ідро^ксїі,м ачіомшно До складу вактцгни І ^ХОДЯГЇ ІГЖ1. Ї^^^'^ НЄТ'ТИ 1.Препарати сальмонельозних анатоксинів 2. Препарати адгезивних антигенівЗ. Гідрооксид алюмінію 4. Формалін Приклад 1. Культивування виробничих штамів. 2 Для виготовлення вакцини використовують штами сальмонел - збудників захворювань тварин, які мають властивість синтезувати екзотоксини та експресувати адгезивні антигени. Штами висівають в пробірки з бульйоном Хоттінгера і культивують при 37°С впродовж 18-20 годин. Отриманою матричною культурою засівають ємності з бульйоном Хоттінгера, причому окремо культивують штами-продуценти екзотоксинів та штами-продуценти адгезивних антигенів. Вирощування виробничих обмємів бакмаси вакцинних штамів проводять при 37-38° С протягом 16-18 годин. Приклад 2. Одержання сальмонельозного анатоксину. Бакмасу з суспензії виробничих штамів-продуцентів екзотоксинів відділяють за допомогою центрифугування або сепарації, супернатанти об'єднують і до них вносять 0.3 % формаліну(40%). Інактивацію екзотоксинів проводять при 37-38°С протягом 10-15 діб. Приклад 3. Одержання препаратів адгезивних антигенів сальмонел. В бактеріальні суспензії виробничих штамів-продуцентів адгезивних антигенів, що одержані згідно Прикладом 1, вносять фосфатно-сечовинний буфер(рН 7.0-7.2), виходячи з розрахунку 1 л буфера на 10 л бактеріальної суспензії. Отримаїгу суміш витримують 20 хвилин при 60°С, після чого бакмасу відділяють за допомогою центрифугування або сепарації. В супєрнатант вносять 0.3% формаліну і знезаражують при 37-38°С впродовж 5-10 діб. Приклад 4. Виготовлення вакцини. Препарат сальмонельозного анатоксину та інактивовані препарати адгезивних антигенів об'єднують у такому співвідношенні: 35% анатоксину, 35% препарату адгезивних антигенів; в одержану суміш вносять 30% гідрооксиду алюмінію(6%) та формалін(0.1% від кінцевого об"єму продукту) і витримують при 37-38°С протягом 24-48 годин. Приклад 5. Визначення стерильності та нешкідливості. Стерильність вакцини визначають за діючим ГОСТ 28085-89 Нешкідливість визначають загальноприйнятим методом на лабораторних тваринах. Приклад 6. Визначення імуногенності. 20-30 білим мишам масою 18-20 г підшкірно вводять вакцину дворазово з інтервалом між ін"скціями 10-14 діб в об"емі 0.3 мл. Через 14 діб після останнього введення прегтарату / щеплени х тварин заражають штраперітонеально раніше відтитрованною летальною дозою кожного з виробничих штамів. Спостереження за зараженими тваринами ведуть 7-10 діб. Вакцину важають імуної енною в тому разі, коли не менше 70% заражених тварин залишаються живими. : * з Вакцина знайде застосування в тваринницьких господарствах приватного і громадського сектора власності, неблагополучних щодо сальмонельозу телят, поросят, ягнят, хутрових звірів, т.п., а також в господарствах з іншою епізоотичною ситуацією, для проведення профілактичних та оздоровчих заходів при сальмонельозах тварин.