Спосіб отримання мазі для лікування захворювань, які викликані внутрішньоклітинними інфекційними агентами

Спосіб отримання мазі для лікування захво 37377 далі змішують з ефірним розчином фосфотидилетаноламіну, шестикратно обробляють ультразвуком, після чого відганяють ефір в роторному вакуумному випарювачі з утворенням ліпосом, які далі змішують з розплавленим медичним солідолом і емульгують до отримання однорідної маси. Спільне застосування папаверину з дібазолом стимулює вироблення інтерферону клітинами організму, активує клітини крові, а також, за рахунок ліпосом як носіїв, глибоко проникає в тканини, сприяє підсиленню регенерації тканин, відвертанню рецидивів і скороченню термінів лікування. В експерименті для вибору оптимальної кількості компонентів мазі, отриманої запропонованим способом, вивчені їхні всмоктування, регенераційна спроможність і імуностимулююча дія. Всмоктування мазі вивчали на 5 кролях породи Шиншилла вагою 2,-2.5 кг, у яких на боку виголили дільницю 1х1 см і наносили 1 г мазі, дільницю накривали поліетиленовим пакетом і закліювали лейкопластирем. Через 3 години пакет знімали і шкіру очищали. Біопсійною голкою брали клітинний матеріал з глибоких шарів підшкіряної тканини, лічили макрофаги і визначали інтенсивність флуоресценції цитоплазми. Спроможність ліпосом проникати в глибокі шари тканин і фагоцитуватися макрофагами корелює зі ступенем флуоресценції цитоплазм макрофагів. Далі готували препарат з біопсійного матеріалу і вимірювали ступінь флуоресценції клітин в контролі без ліпосом і з ліпосомами. Співвідношення флуоресценції макрофагів в контролі (мазь на вазеліново-ланолиновій основі) до флуоресценції макрофагів після застосування досліджуваної мазі є показником всмоктування. Як видно з наведених в таблиці 1 даних, найбільш оптимальна концентрація папаверину і дибазолу в мазі на 100 г - 5-30 мл 2%. Введення по 1 мл 2% розчину папаверину і дибазолу на 100 г мазі послаблює всмоктування мазі, а введення по 35 мл недоцільне, бо стабільність мазі знижується, що виражається в розділенні на шари емульсії і погіршенню всмоктуванні мазі. Спроможність до регенерації вивчали на 30 білих щурах вагою 100-120 г, у яких за допомогою розігрітої монети викликали опік 2 ступіні. Тварин поділили на 2 групи. Перша - дослідницька (15 шт.), друга - контрольна (15 шт.). Дослідницьким тваринам прикладали мазь протягом 30 днів з інтервалом 3 доби. Щодня реєстрували рубцювання і епітелізацію опікової рани до дня, коли признаки опіку зникали. Коефіцієнтом регенерації вважали співвідношення терміну загоєння опікової рани у лікованих тварин у порівнянні з контрольними. Формула розрахунку коефіцієнту регенерації: X = 100 X = 100 17 ×100 = 64 ,6% . 48 Вплив мазі на клітини крові (макрофаги, лімфи) визначали за фагоцитозом макрофагами стафілококів in vitro, кількості активних Т-лімфоцитів і реакції бластної трансформації лімфоцитів (РБТЛ). Як видно з таблиці 2, порівняльні дані мазі, що пропонується, з прототипом показали, що активність до регенерації мазі перевищує в 30 разів прототип, по всмоктуванню - в 7-8 разів, стимулює лімфоцити в РБТЛ в 4 рази сильніше прототипу, в 5 разів активніше стимулює лімфоцити і фагоцитоз макрофагів. Спосіб приготування мазі. 5-30 мл 2% водного розчину папаверину гідрохлориду і 5-30 мл 2% водного розчину дибазолу гідрохлориду змішують з 50 мл 10% ефірного розчину фосфотіділетаноламіну (5 г на 100 г мазі за технологією емульсійних мазей), шестикратно обробляють ультразвуком, відганяють ефір в роторному вакуумному випарникові, в результаті чого утворюються ліпосоми, що містять розчин папаверину і дибазолу, їх після цього змішують з 40-90 г расплавленої до 37-43°С (менш 37°С солідол не плавиться, а більш 43°С ліпосоми руйнуються) жирової основи - солідолу медичного, емульгують до одержання однорідної маси з застосуванням високошвидкісної лопатної мішалки і розливають по флаконах, охолоджують. Приклад № 1. 5 мл 2% водного розчину папаверину гідрохлориду і 5 мл 2% водного розчину дибазолу гідрохлориду змішують з 50 мл 10% ефірного розчину фосфотидилетаноламіну, шестикратно обробляють ультразвуком, відганяють ефір в роторному вакуумному випарювачі, після цього змішують з 90 г розплавленої до 37°С жирової основи - солідолу медичного, емульгують до отримання однорідної маси з застосуванням високошвидкісної лопатної мішалки і розливають по флаконах, охолоджують. Коефіцієнт всмоктування = 5.7± 0.1%. Коефіцієнт регенерації = 35.9±0.2%. Імуномодулюючий ефект: БТЛ = 50.4±0.3%. Такт = 62,5±0.5%. Фагоцитоз = 22±0.4%. Приклад № 2. Мазь готують за методом, який описаний в прикладі 1, але кількість діючих речовин (папаверину та дібазолу) брали по 15 мл 2% розчину, а солідолу - 70 г, який розплавляли при 40°С та змішували з ліпосомами. Коефіцієнт всмоктування = 5.4±0,1%. Коефіцієнт регенерації = 36.1±0.2%. Імуномодулюючий ефект: БТЛ = 61.2±0.3%. Такт = 69,0±0.5%. Фагоцитоз = 28±0.6%. Приклад № 3 Мазь готують за методом, який описаний в прикладі 1, але кількість діючих речовин (папаверину та дібазолу) брали по 30 мл 2% розчину, а солидолу - 40 г, який розплавляли при 43°С та змішували з ліпосомами. Коефіцієнт всмоктування = 5.4±0.1%. Коефіцієнт регенераціі = 36.9±0.2%. A ×100 , B де: А - терміни загоєння ран у лікованих тварин; В - терміни загоєння ран у нелікованих тварин; Х - коефіцієнт регенерації. Наприклад, у лікованих тварин загоєння ран відбулося на 17 добу, у нелікованих тварин на 48 добу; коефіцієнт регенерації дорівнював 2 37377 Імуномодулюючий ефект: БТЛ = 67.0±0.3%. Такт = 71,0± 0.5%. Фагоцитоз = 2,5± 0.6%. Вивчена ефективність мазі, що пропонується, в порівнянні з прототипом на 46 хворих, у яких при лабораторному дослідженні виявилися: у 10 - хламідіоз, у 14 - герпес, у 15 - мікоплазмоз, у 7 – уреаплазмоз. Хворих поділили на дві групи. В одній дослідній -лікували маззю, що пропонується, в другій - лікували прототипом. Мазі застосовувались в комплексній терапії захворювань, викликаних внутрішньоклітинними паразитами, за наступною схемою: по 0.5 г мазі щодня до зникнення клінічних проявів. Як видно з наведених в таблиці 3 даних, застосування мазі, отриманої за способом, що пропонується для лікування захворювань, викликаних внутрішньоклітинними паразитами, дозволяє скоротити терміни лікування в 4 рази, підвищити резистентність організму в 5 разів у порівнянні з прототипом. подавления кожных высыпаний, вызываемых вирусом герпеса // Roy J.Mankovitz, Eneino Calif. 2. 3аявка № 9602224 PCT (WO), А61К 31/19. Препарат для наружного применения для профилактики и лечения повреждений и язв, связанных с вирусом герпеса / Sintov Amnom, Uran Rino, Agis Industries (1983) Ltd., Whalley Kevin. 3. 3аявка № 90/15597 PCM (WO) А61 К 31/045. Препарат для местного лечения инфекционных болезней, вызываемых вирусами, бактериями и грибами. 4. Патент США № 5294440 А61 К 31/13. Препарат для лечения простого герпеса / Bruce A. Jack, B.Thomas Wihte. Professional Inc. 5. Патент України № 4741966/SU A61K 33/00. Спосіб одержання противірусного засобу / Апікс-Ролан Коммен. 6. 3аявка № 0468122 ЕПВ (ЕР) МКИ 5 A61K 31/785, 31/155. Терапевтический препарат на основе полигексанида для лечения кожных, глазных и генитальных проявлений герпеса. 7. Львов Н.Д., Самойлович Е.О. и др. Комбинированная терапия герпесвирусной инфекции // Вопр. вирусол. - 1992. - № 1. - С.8. 8. Козлова В.И., Максумов С.С., Пухнер А.Ф. Вирусные заболевания гениталий. - Ташкент: Медицина, 1986. - 247 с. Перелік посилань: 1. Патент США № 5215748 А61 К 35/78, 31/05. Препарат для наружного применения и способ Таблиця 1 № п/п 1 2 3 5 6 7 8 9 Характеристики різних варіантів мазей Склад мазі Коефіцієнт Спроможність (по обсягу діючих речовин) всмоктування до змазування 1 мл 2.50±, 2 ++++ 5 мл 5.70±, 2 ++++ 10 мл 8.90±, 4 +++ 15 мл 5.40±, 4 +++ 20 мл 4.70±, 4 ++ 25 мл 5.40±, 4 ++ 30 мл 5.40±, 4 ++ 35 мл 2.90±, 4 + Розділення мазі на шари + ++ ++++ Таблиця 2 Порівняльні характеристики мазі, що пропонується в порівнян з прототипом Препарат Кількість тварин в досліді Мазь що патентується 15 Прототип Імуномодулююча дія Ефект на крові морських свинок (in vitro) БТЛ = 670.5±% Такт = 720±,5% Фагоцитоз = 320±,5% 15 Регенерирующий ефект (на щурах) Коеф. 36.8±0.2% БТЛ = 150.2±% Такт = 120±,2% Фагоцитоз = 60±,1% 1.2±0,1% Таблиця 3 Ефективність мазі,що пропонується, в порівнянні з прототипом Препарат Мазь, що пропонується Прототип Імуномодулюючий ефект Такт,% Фагоцитоз, % Кількість Хворих Терміни лікування (дні) БТЛ,% 46 3-5 68±2 73±1 30±0.2 46 18-22 16±1 15±0.5 8±0.2 3 37377 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 4