Спосіб лікування грипозної інфекції

1. Спосіб лікування грипозної інфекції, який полягає у застосуванні препаратів з механізмом противірусної дії, який відрізняється тим, що до схеми лікування протигрипозним препаратом до 3 50497 період епідемії, але й для зниження вірогідності розвитку резистентності у циркулюючих штамів вірусу грипу. Задача вирішується тим, що у способі лікування грипозної інфекції застосовують препарати з різним механізмом противірусної дії (наприклад, Озельтамівір, Амізон) у комплексі з інгібітором протеолізу - амінокапроновою кислотою, яку використовують інтраназально у вигляді 5 %-го розчину 3-5 разів на день та/або перорально у вигляді 5 % розчину, таблеток чи порошку. Озельтамівір [(3R,4R,5S)-4- ацетиламіно -5аміно-З- (І-зтилпропоксі)-циклогексен-І-карбонової кислоти етиловий етер, фосфат] належить до інгібіторів нейрамінідази. Механізм дії препарату полягає у перешкоджанні виходу дочірнього вірусу з інфікованої клітини та інфікуванні сусідніх клітин, внаслідок чого гальмується процес розповсюдження вірусу в організмі. Інгібітори нейрамінідази зменшують продукцію деяких цитокінів, попереджаючи розвиток місцевої запальної реакції, послаблюючи системні прояви вірусної інфекції. Амізон є похідним ізонікотинової кислоти (ІМметил-4-бензил карбамідопіридинію йодид). На різних моделях доведена його висока ефективність як перорального індуктора ендогенного інтерферону, який має активність подібну до аміксину, та вищу за мефенамову кислоту й ібупрофен. Інгібітори протеолізу, зокрема Амінокапронова кислота (АКК), гальмують підвищення протеолізу, що впливає на зменшення можливості проникнення вірусів до клітин, наслідком чого є зниження врожаю інфекційного вірусу [2]. На моделі експериментального грипу продемонстровано не тільки етіотропну (пряму противірусну), але і позитивну патогенетичну та імуномодулюючу дію АКК. У комбінації з іншими відомими противірусними препаратами ("Амізоном", "Озельтамівіром"), Амінокапронова кислота дозволяє підвищити ефективність лікування причому дози кожного з противірусних препаратів є нижчими за рекомендовані. Зазвичай Амізон підліткам та дорослим для лікування грипу призначають до 2 г на добу. При комплексному застосуванні Амізону з Амінокапроновою кислотою, його доза може бути зменшена учетверо - до 0,5 г на день. При цьому 5 % розчин АКК слід інстилювати в ніс 3-5 разів на день, або закладати в кожну ніздрю поперемінне на 5-10 хвилин ватні турунди, ретельно змочені цим розчином. При більш тяжкому перебігу захворювання Амінокапронову кислоту доцільно також 4 вживати перорально, добовою дозою від 2 до 10 г, в залежності від віку хворого, розділивши добову дозу АКК (порошку, таблеток, 5 % розчину) на 3-5 прийомів. При застосуванні препарату Озельтамівір (Таміфлю) відповідно до інструкції, лікування починають з першого або другого дня від появи симптомів захворювання на грип. Препарат призначають дорослим та дітям від 12 років 2 рази на добу по 75 мг впродовж 5 днів. При комплексному застосуванні Озельтамівіру з Амінокапроновою кислотою, його доза може бути знижена вдвічі до 75 мг препарату один раз на день. Амінокапронова кислота при цьому застосовується інтраназально та/або перорально, як наведено вище. Дози АКК, які використовували при лікуванні грипу, були в кілька разів меншими за її гемостатичну дозу (до 24 г на добу). Доказом підвищення ефективності терапії грипу за допомогою протигрипозних засобів при їх комплексному застосуванні з Амінокапроновою кислотою є експериментальні результати, отримані на лабораторних тваринах при моделюванні в них грипозної інфекції. Доказом підвищення ефективності терапії грипу за допомогою протигрипозних засобів при їх комплексному застосуванні з Амінокапроновою кислотою є експериментальні результати, отримані на лабораторних тваринах при моделюванні грипозної інфекції. Приклад 1. Було проведено порівняльне вивчення протигрипозної ефективності Амізону і Амінокапронової кислоти при сумісному введенні, а також окремо. Досліди проводили на 96 лабораторних мишах середньою вагою 15±2 г. Тварин поділили по 24 миші у кожній групі. Розподіл експериментальних тварин по групах наведений у табл. 1. Спосіб здійснювали наступним чином. Препарати вводили залежно від груп, наведених в таблиці 1, за лікувально-профілактичною схемою: за день, в день та три дні після інфікування. Експериментальну грипозну інфекцію у білих мишей моделювали шляхом інтраназального введення під легким етерним наркозом десятикратних логарифмічних розведень штаму вірусу грипу A/PR/8/34(H1N1), використовуючи 4 миші на кожне розведення. Загибель тварин реєстрували щоденно впродовж 14 діб з моменту зараження. Розрахунок LD50 (50 %-ної летальної дози) у дослідах на мишах проводили за методом Кербера в модифікації Ашмарина [3]. Таблиця 1 Розподіл експериментальних тварин по групах при комплексному застосуванні Амінокапронової кислоти і Амізону Група 1(контроль) 2 3 4 Препарат Фіз. розчин АКК Амізон АКК+Амізон Введення препаратів (перорально) Разова доза на мишу Кратність на день 0,2 мл двічі 10мг/0,2 мл двічі 2 мг / 0,2 мл двічі 10 мг+2мг / 0,2 мл двічі 5 50497 Отримані результати доводять, що при застосуванні комплексу «Амінокапронова кислота перорально в добовій дозі 20 мг/мишу + Амізон перорально в добовій дозі 4 мг/мишу» спостерігалось статистичне значуще зниження рівня загибелі мишей, тоді як застосування кожного з цих препаратів окремо у наведених дозах захищало тварин незначною мірою. Це свідчить про доцільність комплексного застосування Амінокапронової кислоти і Амізону при грипі. 6 Приклад 2. Було проведено порівняльне вивчення протигрипозної ефективності Озельтамівіру і Амінокапронової кислоти, як окремо, так і при їх комбінованому застосуванні. Досліди проводили на 96 лабораторних мишах середньою вагою 15±2 г. Тварин поділили по 24 миші у кожній групі. Розподіл експериментальних тварин по групах наведений у табл.2. Таблиця 2 Розподіл експериментальних тварин по групах при комплексному застосуванні Амінокапронової кислоти та Озельтамівіру Група 1(контроль) 2 3 4 Схема перорального (п/о) та інтраназального (і/н) введення препаратів Препарат Разова доза на мишу Кратність на день Фіз. розчин (і/н.) 0,05 мл двічі Фіз. розчин (п/о) 0,2 мл один раз АКК (і/н.) + 2,5 мг / 0,05 мл + двічі фіз. Розчин (п/о) 0,2мл один раз Озельтамівір (п/о) + 200 мкг / 0,2 мл один раз фіз.розчин і/н) 0,05 мл двічі АКК (і/н) 2,5 мг / 0,05 мл + двічі + Озельтамівір (п/о') 200 мкг / 0,2 мл один раз Спосіб здійснювали наступним чином. Препарати вводили залежно від груп, наведених в таблиці за лікувально-профілактичною схемою: за день, в день та три дні після інфікування. Експериментальну грипозну інфекцію у білих мишей моделювали як наведено в Прикладі 1. Застосування комплексу „Амінокапронова кислота в добовій дозі 5 мг/мишу (інтраназально по 0,05 мл 5 % ного розчину двічі на день) + Озельтамівір в добовій дозі 200мкг/мишу перо рально” приводило до статистично значущої захисної дії порівняльне з дією кожного препарату окремо, що свідчить про доцільність використання цієї комбінації для лікування грипозної інфекції. Результати порівняльного вивчення захисної дії комплексу інгібітору протеолізу Амінокапронової кислоти і Амізону та Амінокапронової кислоти і Озельтамівіру, а також кожного з них окремо наведені в табл. З. Таблиця 3 Порівняння дії противірусних препаратів (амізону, Озельтамівіру) з ефективністю їх комбінованого застосування з амінокапроновою кислотою № групи 1 2 3 4 Озельтамівір lg LD50 Амізон lg LD50 Фіз. розчин (і/н) + фіз. розчин (п/о) АКК (і/н) + фіз. розчин (п/о) Озельтамівір (п/о) + фіз.розчин (і/н) АКК (і/н) + Озельтамівір (п/о) 6,0 6,0 6,25 4,5 Фіз.розчин (п/о) АКК + фіз. розчин (п/о) Амізон + фіз.розчин (п/о) АКК + Амізон (п/о) 6,0 5,25 5,25 4,25 Наведені в табл. З результати свідчать про те, що всі препарати використовували в дозах, нижчих за мінімальні ефективні, при цьому кожний з противірусних препаратів, який був застосований окремо, не захищав у достатній мірі експериментальних тварин від загибелі через грипозну інфекцію, тоді як комплексне застосування Амінокапронової кислоти і протигрипозного препарату (Амізону, ОзельтамівІру) приводило до статистичне значущого ефекту захисту тварин. Тобто, можна стверджувати, що комплексне застосування Амінокапронової кислоти і препарату з іншим механізмом противірусної дії (Амізону, Озельтамівіру) дозволить знизити терапевтичні дози препаратів і таким чином зменшити вірогідність їх токсичної дії при збереженні лікувального ефекту. Крім того, це знижує вартість лікувального курсу при грипі. Джерела інформації 1. Weekly С. Epidemiological record.- 2000.Vol.75, №35.- P.281-288. 2. Lozitsky V.P, "Anti-infectious actions of proteolysis inhibitor E-aminocaproic acid (E-ACA)". NIAID, NIH, Vol.1 Frontiers in Research, Ed. V.S. Georgiev, K.A. Western, J.J. McGowan. Humana Press Inc., Totowa NJ, USA, 2008, Chapter 19, pp. 193-198. 7 50497 8 Підписне Тираж 26 прим. 3. Ашмарин И.П. Вычисление ЕД50 при малом числе подопытных животных// Ж. Микробиол. 1959.-№2.-С.102-108. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601