Спосіб одержання біопрепарату для профілактики і лікування шлунково-кишкових захворювань

1 Спосіб одержання біопрепарату для профілаїсгики та лікування шлунково-кишкових захворювань, який включає роздільне культивування штамів ентеробактерій Eshenchia coll Г-1-59, Винахід стосується галузі медицини, мікробіологічної промисловості і може бути використаний для одержання біопрепарату для профілактики та лікування шлунково-кишкових захворювань На сьогодні гостро стоїть проблема лікування та профілактики шлунково-кишкових захворювань Існують препарати що подавляють розвиток патогенних та умовно-патогенних бактерій такі як колі-, біфідум-, лактобактерин, бюспорін та ш Найбільш близьким до способу, що заявляється, є спосіб одержання біопрепарату для профілактики та лікування шлунково-кишкових захворювань, що включає біомасу чотирьох штамів ентеробактерій Eshenchia coll Г-1-59, Г-2-60, Г-361 та Streptococcus faecahs Г-4-62 у співвідношенні 1 1 1 2 та наповнювач (патент України №21979 МПК А61К35/66, бюл №2 1998р) Приготування суспензії мікробних культур здійснюється роздільним культивуванням штамів ПОСЛІДОВНІСТЬ операцій така - посів петлею кожного штаму бактерій на м'ясопептонний агар та інкубація при 37°С протягом 24 годин, - пересів бактерій на бактеріологічні матраци на комерційне середовище та тримання у термостаті 24 години при 37°С, ДЛЯ видається під відповідальність власника патенту ПРОФІЛАКТИКИ І ЛІКУВАННЯ ШЛУНКОВО Eshenchia coll Г-2-60, Eshenchia coll Г-3-61, Streptococcus faecalhs Г-4-62, змив колоній бактерій з живильного середовища, змішування культур ентеробактерій у співвідношенні 1 1 1 2 ВІДПОВІДНО, введення захисного середовища та ліофільне висушування, який відрізняється тим, що роздільне культивування ентеробактерій проводять у присутності колоїдного золота 2 Спосіб за п 1 , який відрізняється тим, що колоїдне золото при культивуванні ентеробактерій додають до живильного середовища у концентрації 25'10 5 - 50'10 5 мкг/мл - змив колоній бактерій фізіологічним розчином, - змішування бактерій у певному співвідношенні (1 1 1 2), - введення захисного середовища та ліофільне висушування препарату Однак, недоліком прототипу є недостатня швидкість приросту біомаси, що безпосередньо повлязано з інтенсивністю дихання клітин Е соїі (див табл 1, контроль- прототип) В основу винаходу поставлено завдання удосконалення способу одержання біопрепарату, у якому за рахунок використання певної добавки до живильного середовища при культивуванні культур мікроорганізмів, досягають підвищення швидкості приросту біомаси при одночасному поліпшенні якості отриманого препарату Поставлене завдання вирішується таким чином, що у способі одержання біопрепарату, який включає роздільне культивування штамів ентеробактерій, змив колоній бактерій з живильного середовища, змішування в певному співвідношенні та ліофільне висушування, додається колоїдне золото (КЗ) до живильного середовища на стадії роздільного культивування штамів бактерій 1 (О ю 56497 Таблиця 1 1 Нами встановлені особливості впливу колоїдного золота (КЗ) на інтенсивність росту культур бактерій, що входять до складу препарату В ході експерименту в середовища росту клітин (середовище Ендо) Е coll Г-1-59, Г-2-60, Г-3-61 та Streptococcus faecafis Г-4-62, вносилась певна Вплив колоїдного золота на інтенсивність дихання клітин Е соїі Г-1 -59 Концентрація КЗ, мкг/мл 5010° D 25 40 D 5010 4 5010 Контроль Поглинання Ог, мкл/г/мг сухої біомаси Ecoh Г-1-59 % до контролю 22,32 90 27,78 112 30,27 122 19,84 84 24,80 100 КІЛЬКІСТЬ КЗ при ПОСТІЙНІЙ засівній дозі культури Інтенсивність ендогенного дихання клітини Е соїі (табл 1) зростала на 12 і 22% при ВМІСТІ КЗ (50мкг/мл по сухій вазі) Ds4o-0,105 Золь золота (КЗ) отримано методом Зігмонді і мав, середній розмір частинок біля 20нм Вихідна концентрація колоїдного золота по металу становила 50мкг/мл Інтенсивність росту культури оцінювали за зміною оптичної густини клітинної суспензії при Л=540нм на спектрофотометрі Сф-46 (Табл 2, З, 4,5) 25 10 5 1 50 10 5мкг/мл ВІДПОВІДНО Роль колоїдного золота (КЗ) в пробютику Таблиця 2 Вплив колоїдного золота на інтенсивність росту Е соїі Г-1-5 № проби 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Концентрація КЗ в середовищі росту, мкг/мл 0 5010" 5010' 5010° 5010 D 50104 5010' 5010' 5010 ' 50 (Вих КЗ) Ефект D540 клітинної суспензії 0,873 0,725 0,794 0,825 0,985 0,623 0,425 0,106 0,103 0,104 норма незначне пригнічення незначне пригнічення незначне пригнічення стимуляція пригнічення пригнічення росту немає росту немає росту немає Таблиця З Вплив колоїдного золота на інтенсивність росту Е соїі Г-2-60 № проби 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Концентрація КЗ в середовищі росту, мкг/мл 0 5010" 5010' 5010° 5010 D 50104 5010' 5010' 5010 ' 50(Вих КЗ) Ефект D540 клітинної суспензії 0,912 0,870 0,0834 0,895 1,184 0,855 0,504 0,105 0,100 0,103 норма незначне пригнічення незначне пригнічення незначне пригнічення стимуляція пригнічення пригнічення росту немає росту немає росту немає Таблиця 4 Вплив колоїдного золота на інтенсивність росту Е соїі Г-3-61 № проби 1 2 3 4 Концентрація КЗ в середовищі росту, мкг/мл 0 5010" 5010' 5010° D540 клітинної суспензії 0,812 0,745 0,732 0,804 Ефект норма незначне пригнічення незначне пригнічення незначне пригнічення 56497 Таблиця 4 (продовження) № проби 5 6 7 8 9 10 Концентрація КЗ в середовищі росту, мкг/мл D 5010 4 5010 5010' 5010' 5010 ' 50 (Вих КЗ) Ефект D540 клітинної суспензії 1,112 0,752 0,504 0,102 0,100 0,104 стимуляція пригнічення пригнічення росту немає росту немає росту немає Таблиця 5 Вплив колоїдного золота на інтенсивність росту Streptococcus faecahs Г-4-62 № проби 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Концентрація КЗ в середовищі росту, мкг/мл 0 5010" 5010' 5010° 5010 D 50104 5010' 5010' 5010 ' 50 (Вих КЗ) D540 клітинної суспензій* 0,564 0,408 0,400 0,508 0,756 0,702 0,404 0,080 0,070 0,072 Ефект норма незначне пригнічення незначне пригнічення незначне пригнічення стимуляція пригнічення пригнічення росту немає росту немає росту немає Час інкубації - 24годин Результати достовірні, Р