Спосіб отримання перев’язувального матеріалу

1 Спосіб отримування перев'язувального матеріалу, що включає іммобілізацію на активний носій білка і наступне висушування, причому як білок використовують композицію засобів, яка має ферментативну активність, який відрізняється тим, що композиція містить не менш трьох ферментів, одним з яких є папаш або бромелаш (по відношенню до суми інших ферментів 1-10 5-50), а після висушування перев'язувальний матеріал стерилізують опромінюванням 2 Спосіб отримування перев'язувального матеріалу за п 1, який відрізняється тим, що перев'язувальний матеріал додатково обробляється композицією, вибраною із однієї або декількох речовин - протимікробних, протизапальних, раноза Винахід належить до області медицини, а саме до способу отримання перев'язувальних матеріалів для лікування ран різної етіології У медичній практиці відоме використання протеолітичних ферментів для лікування гнійно-запальних захворювань, однак нативні ферменти, незважаючи на високу лікувальну активність, нестійкі по відношенню до інгібіторів у рані, до змін рН і температури При надходженні у рану нативні ферменти швидко шактивуються і тому в процесі лікування потрібна велика витрата ферментів Для зниження витрат ферментів при лікуванні гнійних та інфікованих ран були створені перев'язувальні матеріали пролонгованої дії, що містять ХІМІЧНО іммобілізовані ферменти на текстильному носи Відомий спосіб отримання перев'язувального матеріалу, що полягає в тому, що текстильну матрицю тканини з пол і кап роам ід них ниток активують глутаровим альдегідом і обробляють розчином протеолітичного ферменту, наприклад, трипсину, гоювальних, гормональних, протиалерпчних, біологічно активних, всмоктувальних 3 Спосіб отримування перев'язувального матеріалу за п 1, який відрізняється тим, що до перев'язувального матеріалу додається один або декілька шарів, і кожен із шарів складається з однієї або декількох речовин - протимікробних, протизапальних, ранозагоювальних, гормональних, протиалерпчних біологічно активних, всмоктувальних 4 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що засоби вибирають із групи - хімопсин, папаш, хімопапаїн, лізозим, лекозим, бромелаш, лізоцим, дезоксирибонуклеаза, рибонуклеаза, фібринолізин, фіцин, субтилізин, колагеназа, лізоамідаза, панкреатин, хімотрипсин, трипсин 5 Спосіб за п 2 або п 3, який відрізняється тим, що як біологічно активні речовини використовують антиоксиданти і/або гідролізати білків, і/або суміш амінокислот, і/або гідролізати нуклеїнових кислот, і/або суміш нуклеотидів, і/або вітаміни, і/або мінеральні речовини, і/або стабілізатори при співвідношенні мас ферменту і підкладки 0,04 - 0,2 99,96 - 99,8 (а с СРСР № 1448441, кл А 61 К 31/00, 1981) Використання матеріалу дозволяє покращити лікування гнійних ран, однак недостатньо ефективне Відомий спосіб отримання перев'язувального матеріалу, що полягає в тому, що медичну марлю попередньо окислюють до диальдепдцелюлози, після чого обробляють розчином трипсину, промивають і висушують Після ЧОГО отриманий матеріал просочують 0,9 - 1,2% розчином декаметоксину при модулі 4 - 6 з наступним віджимом до привісу 100 -120% (Російський патент № 2143923, 1998) Отриманий матеріал має пролонговані протизапальні властивості, однак він недостатньо ефективний при лікуванні гнійно-септичних ускладнень Відомий більш близький до заявленого спосіб отримання перев'язувального матеріалу, що полягає в тому, що медичну марлю попередньо окислюють до диальдепдцелюлози, після чого оброб СО 00 Ю о> ю 59583 ляють розчином трипсину, відмивають і висушують Після ЧОГО отриманий матеріал просочують 0,02%-им розчином фурациліну в дистильованій воді (ас СССР № 1474917, кл А 61 К 31/25, 1984) Отриманий матеріал володіє наступними властивостями стимулює грануляцію тканин, призводить до скорочення строків лікування, однак він недостатньо ефективний при лікуванні гнійносептичних ускладнень, викликаних КЛІНІЧНИМИ мікроорганізмами Відомо, ЩО різні протеолітичні ферменти розщеплюють молекулу поліпептиду на різних ділянках Тому суміш різних ферментів володіє синергічними властивостями У суміші ферменти пдролізують субстрат каскадним чином У різних ферментів різняться оптимальні рН Відомо, ЩО В інфікованій рані через порушення процесів метаболізму клітин розвивається вторинний ацидоз рН знижується до 6 - 5,7, а в тяжких випадках - до 5,4 При гострому гнійному запаленні концентрація Н+ в центрі вогнища збільшується у 50 разів («Теория и практика местного лечения гнойных ран» Под ред Проф Б М Даценко, авторы Е П Безуглая и др , Киев, «Здоровье», 1995, с 47) Протеолітичні ферменти хімотрипсин і трипсин розщеплюють субстрати з максимальною швидкістю при рН 7 - 9, а при рН 6,0 швидкість розщеплення субстрату дуже низька («Кристаллические ферменты» Д Нортроп и др , 1950, «Издательство иностранной литературы», Москва С 116) Відомо, ЩО рослинні протеази мають більш широкий діапазон рН, при яких фермент активно пдролізує субстрат і може розщеплювати інгредієнти некротичних і гнійних мас Наприклад, один з рослинних протеолітичних ферментів папаш являє собою протеолітичний фермент, що отримують з рослини Сапса Papaya Цей фермент володіє протеолітичною, протизапальною і антикоагуляційною активністю (М Д Машковский, М , Изд "Медицина", 1988, 2 том, с 67, Старков Г Л , Осна Л И , и др Папайи как лечебный фермент в медицине, — Клин мед , 1978, № 8, с 119 - 122) Папаш активний в інтервалі рН 3 - 9 При застосуванні папашу разом з сериновими протеазами створюються умови для більш ефективного гідролізу гнійних мас сериновими протеазами трипсином і хімотрипсином За рахунок використання перев'язувального матеріалу з іммобілізованою композицією ферментів, що мають різні значення оптимальних рН, а також за рахунок використання разом з ферментами біологічно активних речовин протизапальної, антибактеріальної, ранозагоюючої і протиалерпчної дії досягається більш високий терапевтичний ефект, який пояснюється 1 розширенням діапазону рН активної дії суміші ферментів, за рахунок того, що ферменти, які входять у суміш, мають різні значення оптимальних рН, 2 синергічним результатом каскадної дії суміші різних ферментів на некротичні тканини, 3 протизапальною, антибактеріальною, ранозагоюючою і протиалерпйною дією біологічно активних речовин Завдання даного винаходу - отримання перев'язувального матеріалу, що має високу терапевтичну активність за рахунок пролонгованої лікувальної дм у більш широкому діапазоні станів раневої поверхні Вирішення поставленого завдання досягається за рахунок того, що отримування перев'язувального матеріалу включає іммобілізацію на активний носій білку і наступне висушування, причому як білок використовують композицію засобів, що має ферментативну активність, причому композиція містить не менш трьох ферментів, одним з яких є папаш або хімопапаш, або бромелаш, або дезоксирибонуклеаза, або рибонуклеаза (по відношенню до суми інших ферментів 1-10 5-70), а після висушування перев'язувальний матеріал стерилізують опромінюванням Причому в одному із варіантів перев'язувальний матеріал додатково обробляється композицією, вибраною із однієї або декількох речовин протимікробних, протизапальних, ранозагоюючих, гормональних, протиалерпчних, біологічно активних, всмоктуючих Крім того в одному із варіантів до перев'язувального матеріалу додається один або декілька шарів, і кожен із шарів складається з однієї або декількох речовин - протимікробних, протизапальних, ранозагоюючих, гормональних, протиалерпчних, біологічно активних, всмоктуючих Ферментативні засоби вибирають із групи - хімопсин, папаш, хімопапаш, лізозим, лекозим, бромелаш, лізоцим, дезоксірибонуклеаза, рибонуклеаза, фібринолізин, фіцін, субтілізин, колагеназа, лізоамідаза, панкреатин, хімотрипсин, трипсин, а в якості біологічно активних речовин використовують антиоксиданти, і/або гідролізати білків, і/або суміш амінокислот, і/або гідролізати нуклеїнових кислот, і/або суміш нуклеотидів, і/або вітаміни, і/або мінеральні речовини, і/або стабілізатори При лікуванні рану вкривають перев'язувальним матеріалом, що виготовлений вищеописаним способом Спосіб здійснюють наступним чином Спочатку проводять окислення медичної марлі будь-яким відомим способом Окислений матеріал промивають дистильованою водою і висушують при кімнатній температурі Ступінь окислення марлі складає 1 - 85% Іммобілізацію ферментів проводять обробкою матриці розчином ферментів з концентрацією 0,01 - 5% при рН 3,0 - 9,5 на протязі 0,1 - 72 год Матеріал віджимають і сушать на повітрі Після ЧОГО цей або наступний шар перев'язувального матеріалу обробляють композицією протимікробних і/або композицією протизапальних, і/або композицією ранозагоюючих засобів і/або композицією біологічно активних речовин Потім перев'язувальний матеріал в упаковці стерилізують опромінюванням Отриманий матеріал володіє властивостями пролонгованого гідролізу некротичних тканин рани, СТІЙКІСТЮ ферментативної активності до змін рН рани, антимікробними властивостями Використання заявляемого способу призводить до скорочення строків лікування гнійних ран Приклад 1 59583 У якості вихідної матриці при отриманні перев'язувального матеріалу використовують медичну марлю Спочатку проводять активацію марлі окисленням до диальдепдцелюлози (ДАЦ) будьяким відомими способом Окислений матеріал промивають водою Співвідношення ваги розчину і марлі при окисленні 25 1 Ступінь окислення складає 1 - 3% Іммобілізацію протеолітичних ферментів, а саме препарату «Хімопсин» (виробляє ЗАТ «Бюлек», м Харків) і папашу проводять обробкою носія водним розчином «Хімопсин» І папашу, що містить 0,05мг/мл «Хімопсину» і 0,03мг/мл папашу, при рН 3,0 - 8,5 на протязі 2 год Потім матеріал віджимають до приросту ваги 120 - 150% і висушують на повітрі Препарат «Хімопсин» являє собою суміш хімотрипсину и трипсину (М Д Машковский, М, Изд "Медицина", 1988, 2 том, с 51) Протеолітична активність 0,5 ПО/г Масове співвідношення носія і протеолітичних ферментів 1000 0,65 Матеріал просочують 0,02%-им розчином фурацилшу у дистиляті і висушують Після цього перев'язувальний матеріал в упаковці стерилізують опромінюванням ВІДОМОСТІ про лікувальні активності отриманого матеріалу наведені утаблиці Приклад 2 В якості вихідної матриці при отриманні перев'язувального матеріалу використовують медичну марлю Спочатку проводять активацію марлі окисленням до диальдепдцелюлози (ДАЦ) будьяким відомим способом Окислений матеріал промивають водою Співвідношення ваги розчину і марлі при окисленні 25 1 Ступінь окислення складає 1 - 3% Іммобілізацію протеолітичних ферментів, а саме препарату «Хімопсин», папашу і панкреатичної дезоксирибонуклеази проводять обробкою носія водним розчином «Хімопсину», папашу і дезоксірибонуклеази, що містить 0,05мг/мл «Хімопсину», 0,03мг/мл папашу і 0,05мг/мл дезоксірибонуклеази, при рН 5,0 на протязі 2,5 год Потім матеріал віджимають до приросту ваги 120 - 150% і сушать на повітрі Протеолітична активність 0,5 ПО/г Масове співвідношення носія і протеолітичних ферментів 1000 0,65 Потім матеріал просочують 0,02%-им розчином фурацилшу у дистиляті і висушують Після ЦЬОГО перев'язувальний матеріал в упаковці стерилізують опромінюванням ВІДОМОСТІ про лікувальні активності отриманого матеріалу наведені утаблиці Приклад З Медичну марлю активують окисленням до диальдепдцелюлози (ДАЦ) будь-яким відомими способом Після ЧОГО зразок промивають водою (5 раз по ЗО хв ), віджимають до привісу 100% і обробляють 0,05%-им розчином трипсину, 0,05%-им розчином хімотрипсину (виробляє ТОВ «Рудіком», м Київ) і 0,02%-им розчином папашу в 0.06М фосфатному буфері при рН 7,5 и 4°С на протязі 12 год Отриманий зразок відмивають від білка, ХІМІЧНО не зв'язаного з носієм, фізіологічним розчином, дистильованою водою і сушать на повітрі Після сушки марлю, що містить ХІМІЧНО зв'язаний трипсин, хімотрипсин і папаш, обробляють 0,9%-им розчином декаметоксину у воді на протязі 12 год Після ЧОГО отриманий матеріал віджимають до привісу 120% і сушать на повітрі Після ЦЬОГО перев'язувальний матеріал в упаковці стерилізують опромінюванням ВІДОМОСТІ про лікувальні активності отриманого матеріалу наведені утаблиці Приклад 4 Медичну марлю активують окисленням до диальдепдцелюлози (ДАЦ) будь-яким відомими способом Після ЧОГО зразок промивають водою (5 раз по ЗО хвилин), віджимають до привісу 100% і обробляють 0,05%-им розчином трипсину, 0,05%-им розчином хімотрипсину і 0,02%-им розчином бромелашу у 0.06М фосфатному буфері при рН 7,5 і 4°С на протязі 12год Отриманий зразок відмивають від білка, ХІМІЧНО не зв'язаного з носієм, фізіологічним розчином, дистильованою водою і сушать на повітрі Після сушки марлю, що містить ХІМІЧНО зв'язаний трипсин, хімотрипсин і папаш, обробляють 0,9%-им розчином декаметоксину у воді на протязі 12 год Після ЧОГО отриманий матеріал віджимають до приваги 120% і сушать на повітрі Після цього перев'язувальний матеріал в упаковці стерилізують опромінюванням ВІДОМОСТІ про лікувальні активності отриманого матеріалу представлені утаблиці Приклад 5 Медичну марлю активують окисленням до диальдепдцелюлози (ДАЦ) будь-яким відомими способом Далі зразок промивають водою (5 разів по ЗО хв), віджимають до привісу 100% і обробляють 0,05%-им розчином трипсину, 0,05%-им розчином хімотрипсину (производства ООО «Рудиком», г Киев) і 0,02%-им розчином панкреатичної рибонуклеази в 0.06М фосфатному буфері при рН 7,5 і 4°С на протязі 12 год при модулі 5 Отриманий зразок відмивають від білка, ХІМІЧНО незв'язаного з носієм, фізіологічним розчином, дистильованою водою і сушать на повітрі Після сушки марлю, що містить ХІМІЧНО зв'язаний трипсин, хімотрипсин и рибонуклеазу, обробляють при модулі 50,9%-им розчином декаметоксину у воді на протязі 12 год Після ЧОГО отриманий матеріал віджимають до привісу 120% і сушать на повітрі Після ЦЬОГО перев'язувальний матеріал в упаковці стерилізують опромінюванням ВІДОМОСТІ про лікувальні активності отриманого матеріалу наведені утаблиці 59583 Таблиця № пп 1 2 Спосіб отримання перев'язувального матеріалу Пропонований спосіб Приклад 1 Приклад 2 Приклад 3 Приклад 4 Приклад 5 Спосіб по а с CPCPN 1474917, кл А 61 К 31/25, 1984 Комп'ютерна верстка А Крулевський Підписано до друку 06 10 2003 Строки очищения ран, діб 2,3 2,3 2,4 2,3 2,5 3,3 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна