Спосіб оцінки стану перекисного окиснення ліпідів у дітей, хворих на виразкову хворобу

Реферат: UA 68025 U UA 68025 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до педіатрії, дитячої гастроентерології, і може бути використана в діагностиці виразкової хвороби гастродуоденальної ділянки у дітей. Виразкова хвороба шлунка та дванадцятипалої кишки в дитячому віці належить до захворювань, в етіопатогенезі яких, окрім гелікобактерної інфекції, важливу роль відіграє порушення оксидантно-прооксидантного гомеостазу, зокрема перекисного окиснення ліпідів (ПОЛ). Враховуючи зростання поширеності даної патології серед дитячого населення, багатогранність патогенезу та ранню інвалідизацію, важливе значення має визначення всіх патогенетичних порушень та введення в протокол лікування засобів, які впливають на виявлені порушення. Вивчення особливостей перебігу вільнорадикальних процесів у дитячому організмі залежно від віку набуває особливого значення у зв'язку з тим, що в процесі онтогенезу відбувається модуляція інтенсифікації вільнорадикального окиснення і стану антиоксидантної системи тканин, що передбачає виникнення вікових відмінностей в клініці захворювання. На сьогоднішній день відомо, що інтенсифікація ПОЛ є універсальним механізмом пошкодження і загибелі покрівельно-ямкового епітелію, пригнічення резистентності слизової оболонки шлунка та дванадцятипалої кишки та виснаження біоантиоксидантної системи. Найближчим до способу, що заявляється, є визначення показників ПОЛ в периферичній крові (Соколов И.П., Марченко В.В. Антиоксидантная система защиты у детей. - СПб.: ПИТЕР, 2008. - 234 с.). Недоліками цього способу є те, що стан ПОЛ оцінюється на організменому, а не на органному рівні, адже антиоксидантна активність крові незначно змінюється в дітей, хворих на виразкову хворобу, порівняно з нормою, в той час як у місці виразкового дефекту відбувається значна активація процесів ПОЛ через порушення використання кисню в ланцюгу тканинного дихання та накопичення його активних форм. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалити спосіб діагностики порушення антиоксидантного захисту в дітей шляхом визначення показників ПОЛ безпосередньо в периульцерогенній зоні. Поставлена задача вирішується тим, що в способі діагностики стану ПОЛ при виразковій хворобі в дітей шляхом визначення показників ПОЛ ((малонового альдегіду (MA) та окислювальної модифікації білків (ОМБ)) у периферичній крові, проводиться визначення цих показників безпосередньо в периульцерогенній зоні слизової оболонки шлунка та дванадцятипалої кишки. Відомостей про застосування цього способу в педіатричній практиці немає. Спільними ознаками способу, що заявляється, і найближчого аналогу є оцінка стану ПОЛ в дітей шляхом визначення показників МА та ОМБ. Відмінністю між цими способами є середовище, в якому визначають ці показники. Методика. Рівень МА визначали спектрофотометричним методом за допомогою спектрофотометра СФ-46 при довжині хвилі 532 нм. В основі визначення вмісту МА лежить реакція між МА і тіобарбітуровою кислотою, яка при високій температурі та кислому значенні Ph перебігає з утворенням забарвленого триметинового комплексу. Інтенсивність ОМБ визначали фотоелектроколориметричним методом (Дубініна О.Є. та співавт., в модифікації І.Ф. Мещишина). Принцип методу ґрунтується на реакції взаємодії окислених амінокислотних залишків білків з 2,4-динітрофенілгідразином з утворенням альдегід- і кетондинітро-фенілгідразонів. ОМБ у тканині шлунка та ДПК оцінювали за співвідношенням величин червоного та синього спектрів забарвлення при комп'ютерній мікроспектрометрії, що здійснювалася шляхом фарбування гістологічного препарату за методикою Мікель-Кальво та проведення візуальної оцінки білкових груп, використовуючи систему аналізу кольору (RGB). Даний метод дозволяє визначити співвідношення між карбонільними та аміногрупами білків та по цьому співвідношенню у відносних величинах виміряти ступінь ОМБ, а, отже, і судити про інтенсивність утворення активних форм кисню в тканині шлунка та дванадцятипалої кишки. Приклад практичного використання способу. Нами було проведено оцінку ефективності запропонованого способу діагностики стану ПОЛ у дітей, хворих на виразкову хворобу. Проводилося визначення рівня МА та показників ОМБ за альдегід- і кетондинітрофенілгідразонів нейтрального характеру (АКДНФГ НХ) та альдегід- і кетондинітрофенілгідразонів основного характеру (АКДНФГ ОХ). Виявлено, що тільки у 13,5 % хворих дітей відзначалися підвищення показників ПОЛ у крові дітей, хворих на ВХ, тоді як у біоптатах слизової оболонки шлунка та дванадцятипалої кишки, взятих із периульцерогенної зони, майже у всіх дітей виявлено достовірні підвищення даних показників (табл.). Діагностична цінність методу складає 86,5 %. 1 UA 68025 U Таблиця Показники ПОЛ у дітей, хворих на виразкову хворобу Спосіб діагностики, що заявляється, (відхилення від норми, %) Спосіб діагностики за прототипом (%) Показник Хворі діти віком Хворі діти віком Хворі діти віком 13-18 Хворі діти віком 7-12 років 7-12 років (n=12) років (n=23) 13-18 років (n=23) (n=12) Малоновий альдегід 91,7±1,2* 95,7±1,8* 8,3±1,1 4,3±1,0 АКДНФГ НХ 83,4±1,9* 91,4±1,8* 16,6±1,2 8,6±1,0 АКДНФГ ОХ 83,4±1,2* 87,0±1,7* 16,6±1,2 13,0±1,0 Примітка. * - достовірно щодо показників контрольної групи (Р