Спосіб приготування еритроцитарних тіней собаки

Реферат: Спосіб приготування еритроцитарних тіней собаки передбачає застосування лікарських розчинів. Для утворення отворів у мембранах еритроцитів використовують трифлуоперазину гідрохлорид. UA 69714 U (54) СПОСІБ ПРИГОТУВАННЯ ЕРИТРОЦИТАРНИХ ТІНЕЙ СОБАКИ UA 69714 U UA 69714 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до медицини, а саме до способів приготування еритроцитарних тіней собаки. Можливість транспорту лікарських речовин до вогнища патологічного процесу завдяки використанню біологічних контейнерів-носіїв дотепер продовжує цікавити дослідників. Серед різноманітних варіантів для такого транспорту речовин одним із самих доступних є застосування автологічних еритроцитарних тіней-носіїв. Транспортні властивості цих біологічних контейнерів можуть залежати від їх розміру. Для того, щоб провести порівняння цих властивостей для тіней еритроцитів з різними розмірами в експерименті, необхідною умовою є наявність декількох варіантів виготовлення останніх. На сьогоднішній день існує один спосіб приготування еритроцитарних тіней собаки. При відомому способі приготування еритроцитарних тіней собаки (Деклараційний патент № 34920 А Україна, МПК G01N 33/50 Спосіб приготування еритроцитарних тіней у собак / М. І. Бурковський; М. Д. Желіба., заявл. 20.07.99; опубл. 15.03.01; Бюл. № 2) на певному етапі для утворення дефектів у мембрані еритроцитів використовується розчин аміназину, що потім дозволяє забезпечити вільний вихід гемоглобіну завдяки застосуванню гіперосмолярного розчину глюкози. Даний спосіб не дозволяє створювати автологічні тіні, що мають діаметр менше 2,00 мкм. В основу корисної моделі "Спосіб приготування еритроцитарних тіней собаки" поставлена задача розробки способу отримання тіней еритроцитів, які б мали діаметр менший ніж 2,00 мкм, що може підвищити здатність таких тіней-носіїв проникати у вогнище гнійно-запального процесу при їх реґіонарному підведенні. Поставлена задача вирішується у способі приготування еритроцитарних тіней собаки, при якому для утворень перфорацій у мембранах еритроцитів застосовується розчин трифтазину. Спосіб здійснюється наступним чином. У собаки проводиться забір 5 мл венозної крові у флакон, що містить 5 мл 0,9 % розчину натрію хлориду та 2000 ОД гепарину. Після цього тричі виконується відмивання еритроцитів шляхом центрифугування при 2000 об/хв. протягом 7 хвилин. Після видалення надосаду до отриманих еритроцитів додається 2,5 мл фізіологічного розчину хлориду натрію, шляхом струшування виконується ресуспендування та додається 2,0 мл розчину трифтазину (4 мг трифлуоперазину гідрохлориду). Отримана суміш витримується при кімнатній температурі 15 хвилин, після чого до неї додається 1500 ОД гепарину, що запобігає у подальшому утворенню згустку еритроцитів. Потім після струшування додається 6 мл 40 % розчину глюкози. При кімнатній температурі суміш витримується 20 хвилин. Виділення отриманих тіней еритроцитів із інкубаційного середовища проводиться шляхом центрифугування при 4000 об/хв. протягом 15 хвилин. Отримані тіні тричі відмиваються фізіологічним розчином натрію хлориду по 15 хвилин при 4000 об/хв. Для насичення тіней еритроцитів лікарською речовиною, що має фізіологічне середовище, необхідно додати останню у кількості 10 мл і витримати отриману суміш при кімнатній температурі протягом 30 хвилин. Для контролю утворення насичених речовиною еритроцитарних тіней застосовується фазово-контрастна мікроскопія. Приклад. В умовах операційної науково-експериментальної клініки Вінницького національного медичного університету ім. М. І. Пирогова у здорової собаки вагою 13 кг виконано забір 5 мл венозної крові у флакон, що містить 5 мл фізіологічного розчину натрію хлориду та 2000 ОД гепарину. (Дозвіл комітету з біоетики від 26.11.2009 p.). Відмивання еритроцитів виконане шляхом трикратного центрифугування по 7 хвилин при 2000 об/хв. До отриманих еритроцитів додали 2,5 мл 0,9 % розчину натрію хлориду і після струшування ще додали 2,0 мл розчину трифтазину. Суміш витримали 15 хвилин при кімнатній температурі і додали до неї 1500 ОД гепарину і 6 мл 40 % розчину глюкози. Після 20-ти хвилинної експозиції виконали виділення отриманих тіней еритроцитів центрифугуванням при 4000 об/хв. протягом 15 хвилин. Потім отримані тіні ще тричі відмили, застосовуючи центрифугування при 4000 об/хв. по 15 хвилин кожне. До суміші еритроцитарних тіней додали 10 мл фізіологічного розчину натрію хлориду і витримали її при кімнатній температурі 30 хвилин. Після цього були зроблені мазки отриманої суміші, які фіксували 96 % етиловим спиртом. Отримані мазки були вивчені з використанням фазово-контрастної мікроскопії. Також було проведене морфологічне дослідження отриманих тіней за допомогою комп'ютерного програмного забезпечення "Paradise". Діаметр тіней еритроцитів склав 1,20±0, 07 мкм. Даний спосіб приготування тіней еритроцитів собаки дозволяє отримувати тіні-носії з діаметром менше 2,00 мкм. 1 UA 69714 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб приготування еритроцитарних тіней собаки, що передбачає застосування лікарських розчинів, який відрізняється тим, що для утворення отворів у мембранах еритроцитів використовують 4 мг трифлуоперазину гідрохлориду. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2