Спосіб визначення імунної відповіді організму на комбіновану дію ксенобіотиків довкілля

Спосіб визначення імунної відповіді організму на комбіновану дію ксенобіотиків довкілля, який складається з дослідження стану окремих ланок імунної системи на вплив ксенобіотиків довкілля за допомогою комплексу імунологічних тестів, який відрізняється тим, що вивчення стану імунної системи здійснюється при комбінованій дії нітриту, нітрату натрію, хлороформу і фенолу на рівні гігієнічних нормативів та в реально визначуваних у водному середовищі концентраціях. Корисна модель відноситься до галузі медичної екології, зокрема до визначення впливу чинників довкілля на імунну систему організму. Відомим є спосіб визначення ступеню небезпечності хімічних забруднень водоймищ на основі вивчення сенсибілізуючого ефекту за ізольованого та комбінованого переорального надходження речовин до організму [Див. Русаков Н.В. Изучение степени опасности и разработка основ профилактики сенсибилизирующего действия химических загрязнений водоемов: Автореф. дис.. .доктора мед. наук: 14.00.07 / Москва. НИИ общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина. - М., 1987. 41с]. Недоліками цього способу є визначення небезпечності дії хімічних забруднень на імунну систему тільки за показниками сенсибілізації. Найбільш близьким до заявленого є спосіб дослідження імунотоксичної дії потенційно небезпечних хімічних речовин при їх гігієнічній регламентації, який полягає у визначенні імунного статусу за допомогою комплексу імунологічних тестів в динаміці ізольованого впливу препаратів, у відновний період та після антигенного навантаження [Див. Дослідження імунотоксичної дії потенційно небезпечних хімічних речовин при їх гігієнічній регламентації: Методичні рекомендації / М.Г. Проданчук, П.Г. Жмінько, Д.В. Зінченко, С.М. Кузьмінський, М.В. Янкевич. - Київ, 2003]. Недоліком цього способу є те, що імунний статус визначається лише за ізольованої дії пестицидів та агрохімікатів. Основним завданням способу, який пропонується, було підвищення достовірності визначення комбінованої дії убіквітарних забруднень довкілля на організм. Поставлене завдання вирішено тим, що визначення імунної відповіді організму на дію ксенобіотиків довкілля, згідно із заявленим способом, полягає у дослідженні стану окремих ланок імунної системи за допомогою комплексу імунологічних тестів саме при комбінованій дії полютантів, а саме нітриту, нітрату натрію, хлороформу і фенолу на рівні гігієнічних нормативів та в реально визначуваних у водному середовищі концентраціях. Спосіб здійснюється наступним чином. Експериментальні дослідження проводяться на білих нелінійних щурах. Хімічні сполуки в різних дозах і комбінаціях надходять до організму тварин з питною водою (нітрит та нітрат натрію на рівні ГДК, 5 і 10 ГДК; хлороформ - ГДК і 5 ГДК, фенол - ГДК і З ГДК)Імунотоксична дія досліджуваних сполук вивчається в підгострому (1 місяць), субхронічному (2 місяці) і хронічному (6 місяців) експериментах. Для визначення глибини та стійкості порушень Сї CM ю 2 + N a NO 3 -1 ГДК; 7 група - хлороформ на рівні 5 ГДК, NaNO2 + N a NO 3 - 5 ГДК; 8 група - хлороформ на рівні 5 ГДК, NaNC>2 + Визначення стану імунної системи у щурів здійснювали в 1-, 2-, 6-терміни дії ксенобіотиків, через 1 і 2 місяця відновного періоду, а також після антигенного навантаження Т-залежним антигеном. Для прикладу в таблиці представлено дані щодо характеру змін в імунному статусі тварин після 6 місяців перорального надходження досліджуваних сполук. Як видно з наведених даних, розвиток більш глибоких зрушень як в системі імунологічного нагляду, так і неспецифічних факторів резистентності організму виявлявся у тварин, які підлягали саме комбінованому впливу ксенобіотиків. Найбільша кількість імунологічних показників були змінені у тварин, що зазнавали впливу трьохкомпонентної системи хімічних речовин. Майже всі вони були пригнічені, що є прогностичне не сприятливим. Так, у щурів, що отримували різне за рівнем навантаження тільки нітросполуками (2, 3 та 4 групи), спостерігалась різна спрямованість змін імунологічних показників: частина їх зазнавала стимуляції, а частина пригнічення, що може вказувати на напруження адаптаційно-компенсаторних механізмів організму тварин. В той же час, на кінець 6 місяця експозиції у тварин, що зазнали одночасної дії нітриту, нітрату натрію та хлороформу (6, 7 і 8 групи), майже всі зміни в імунному статусі мали однонаправлений характер: спостерігалося зниження кількості імунокомпетентних клітин та пригнічення їх функціональної активності. В усіх дослідних групах визначалися слабкопозитивна сенсибілізація, у частини аутосенсибілізація. Виявлені зрушення в імунному статусі тварин цих груп менш сприятливі і можуть свідчити про розвиток імунологічної недостатності і порушення адаптаційно-компенсаторних процесів в організмі. Застосування запропонованого способу дозволяє визначити імунотоксичні ефекти за комбінованої дії широкого спектру антропогенних забруднень довкілля. N a NO 3 -10rflK. Таблиця Характеристика змінених показників порівняно з*: Групи дослідних тварин 4гр. 5гр. бгр. 7гр. 8гр. |ЛІМ а , t Лім%, ІТ%1 | Лей, 4ЕОЗ, 4 Лей, 4Т%, 4Во/о, | СЯН, 1 Лей, і СЯН, 4 Лей, 4 СЯН, ІВо/о, аутоімунна |В%, 4 в%, t Лім% ІТ%, 4 Т а , Т Лім%, і Фаг%, 5 групою (ізольовано хлороформ) Згр. |Лей, "ГЛІМа, 1 групою (контрольною) 2гр. р-ція, ГНТ(нн) ГНТ(нн) ГНТ(нн) 4В а , 4 НеЙ а , 4 Фаг а , ГНТ(хл) 4ЛІМ а , 4 Т а , 4 В%, 1 В а , 4В% |Ва, 4 НеЙа, 4 Ней% 4 Фаг а , аутоімунна 4 НеЙа, 4 Фаг а , р-ція, ГНТ(хл) ГНТ(нн) ГНТ(хл) 4 Ней%, 4 НеЙа, 4Т% 4Т%, 4 Т а , 4 В % 4Ва, 4 Ней % , 4 Ней а , 4Фаг а , аутоімунна р-ція, ГНТ(нн) ГНТ ( Х Л ) 4 Т%, 4 В% 7252 J-Фага Примітка * умовні позначення вміст у периферичній крові Лей - лейкоцитів, СЯН - сегмунтоядерних нейтрофілів, ЕОЗ - еозинофілів, Лім% - відносний лімфоцитів, Лім а - абсолютний лімфоцитів, Т%- відносний Т-лімфоцитів, Т а - абсолютний Т-лімфоцитів, В% - відносний В-лімфоцитів, Ва - абсолютний В-лімфоцитів, Ней% - відносний нейтрофілів, Нейа - абсолютний нейтрофілів, Фаг% - відносний активно фагоцитуючих клітин, Фаг а - абсолютний активно фагоцитуючих клітин, аутоімунна р-ція - ГНТ до тканинного антигену, ГНТ (*„) - ГНТ до гаптеру (хлороформ), ГНТ (НН) - ГНТ до гаптеру (нітрит, нітрат натрію), І - зниження показників, | - підвищення показників Комп ютерна верстка А Рябко Підписне Тираж 28 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул Урицького, 45, м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Глазунова, 1, м Київ - 4 2 , 01601