Спосіб прижиттєвої диференціації онкосфер давенеозу та райєтинозу птиці

Реферат: Спосіб прижиттєвої диференціації онкосфер давенеозу та райєтинозу птиці включає відбір фекалію, розмішування його у великій кількості води, відстоювання, зливання надосадової рідини, розглядання капсул у чашках Петрі. Як барвник застосовують брильянтову зелень. UA 78451 U (54) СПОСІБ ПРИЖИТТЄВОЇ ДИФЕРЕНЦІАЦІЇ ОНКОСФЕР ДАВЕНЕОЗУ ТА РАЙЄТИНОЗУ ПТИЦІ UA 78451 U UA 78451 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до ветеринарної гельмінтології, а саме до методу прижиттєвої диференційної діагностики цестодозів птиці. Давенеоз та райєтиноз - небезпечні природно-вогнищеві гельмінтози курей, індиків, цесарок, павичів, фазанів і інших диких птахів, спричинені цестодами родини Davaineidae роду Rallietina, які паразитують в тонкому кишечнику. Тяжко хворіє молодняк 2 - 4 місячного віку. За гострого перебігу, який триває 4-6 діб реєструють загибель до 30 % поголів'я, а за хронічного перебігу птиця втрачає продуктивність, відстаючи в рості і розвитку. Існує мортальний спосіб діагностики цестодозів за морфологічними ознаками сколекса. [Киреев Н.А. Биология возбудителя, эпизоотология и терапия райетиноза индеек // Автореф. дис. канд. вет. наук. - Москва, 1966.-16 с.]. Але цей спосіб є неточним та складним. Відома диференціація онкосфер цестод, які паразитують у птиці шляхом порівняння будови оболонок. Онкосфери (зародки) цестодозів птиці мають три оболонки: зовнішню - хоріон, середню - бластодерм, внутрішню - онкосферна мембрана [Степанов, А.В. Гельминтозы сельскохозяйственных животных в тропических странах. Цестодозы [Текст] / А.В. Степанов // Уч. пособие для студентов вет. фак-та. - М., 1980. - Ч. П.-95 с.]. У цестоди Davainea proglottina можна виділити лише дві оболонки - хоріон та онкосферну мембрану, так як друга і третя оболонки щільно прилягають одна до іншої і майже непомітні. У Raillietina tetragona і R. echinobothrida онкосфера округло-овальної форми, діаметром 93 × 74 мкм. Внутрішня оболонка досить розвинена і складається з периферичного прозорого шару та центрального, твердого, гранульованого, який має овальну форму і не змінюється. Хоріон містить колоїди, які знаходяться в стані набряку. На полюсах з онкосферної мембрани виділяються два трубкоподібні утворення, які з'єднуються з хоріоном. За такими мікроморфологічними ознаками яєць цестодозів птиці визначити належність до виду досить складно. Недоліком прижиттєвих гельмінтологічних досліджень цестодозів птиці є складність видовизначення збудника та їх диференціація. Найбільш близьким аналогом до способу, що заявляється є спосіб послідовних промивань [Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды: Справочник. - М.: Колос, 1984.-208 с.]. За цим способом проводять відбір фекалію, розмішують його у великій кількості води, відстоюють, зливають надосадову рідину доти, поки вона буде прозорою і потім розглядають капсули у чашках Петрі. Але визначити члеників цестод та їх онкосфер до певного виду досить складно. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб прижиттєвої диференціації онкосфер давенеозу та райєтинозу птиці, що включає відбір фекалію, розмішування його у великій кількості води, відстоювання, зливання надосадової рідини та розглядання капсул у чашках Петрі шляхом застосування як барвника - брильянтової зелені в розведенні 1:10000, щоб забезпечити ефективність способу. Спосіб виконують таким чином. Спочатку беруть інвазованих курей давенеозною інвазією і райєтинозною. Потім проводять відбір фекалію, розмішують його у великій кількості води, відстоюють, зливають надосадову рідину доти, поки вона не стане прозорою, відбирають осад з капсулами давеній та райєтин, які містять яйця, фарбують за допомогою брильянтової зелені в розведенні 1:10000, після чого розглядають капсули у чашках Петрі. Приклад. Дослід проводили на базі віварію Одеської дослідної станції ННЦ "ІЕКВМ". З присадибних господарств півдня Одеської області шляхом гельмінтоовоскопії було вилучено спонтанно інвазованих троє курей давенеозною інвазією і двоє - райєтинозною. Птицю утримували в окремих клітках на сітчастій підлозі і годували за звичним раціоном. Упродовж 3 діб методом послідовних промивань фекалію птиці, відбирали осад з капсулами давеній та райєтин, які містили яйця. Враховуючи морфобіологічну характеристику яєць давеній та райєтин, проведено фарбування з метою підбору концентрації фарби та експозиції. Для фарбування застосували брильянтову зелень та фарбу Романовського в концентраціях 1:5000 та 1:10000 при експозиції 1, 3 та 5 хв. Результати досліду наведено в таблиці.Доведено, що онкосфери Davainea proglottina чітко фарбувались у світло-зелений колір брильянтовим зеленим в розведенні 1:10000 за експозиції 3 та 5 хв, а за 1 хв у цій концентрації та за 5 хв у розведенні 1:5000 фарбувався лише хоріон. За аналогічної схеми фарбування онкосфер Raillietina tetragona концентрація 1:5000 за відповідних експозицій не давала забарвлення, а концентрація 1:10000 за експозиції 3 та 5 хв фарбували лише зовнішню 1 UA 78451 U 5 10 оболонку (хоріон). Фарба Романовського, у порівнянні з брильянтовим зеленим, не давала достатньо чіткого зображення. Під дією брильянта зеленого в концентрації 1:10000 та за експозиції 3 та 5 хв. у вологому середовищі в яйці Davainea proglottina розширюється просвіт між хоріоном і онкосферною мембраною, який стає набряклим і відповідно фарбується в світло-зелений колір чого не відбувається з онкосферою Raillietina tetragona. Для встановлення кінцевого діагнозу щодо видовизначення цестодозів кури були забиті і підлягли частковому гельмінтологічному розтину яким підтверджено відповідний вид цестод. Таким чином, спосіб прижиттєвої диференціації онкосфер давенеозу та райєтинозу птиці можна використовувати в лабораторіях птахогосподарств. Таблиця Спосіб прижиттєвої диференціації онкосфер давенеозу та райєтинозу птиці брильянтова зелень фарба Романовського Наявність оболонок в 1:5000 1:10000 1:5000 1:10000 яйці 1 хв 3 хв 5 хв 1 хв 3 хв 5 хв 1 хв 3 хв 5 хв 1 хв 3 хв 5 хв хоріон і Davainea онкосферна ± ± + + ± + proglottina мембрана хоріон, Raillietina бластодерм, ± ± ± ± tetragona онкосферна мембрана Примітки: 1. «+» - чітке фарбування, 2. «±» - фарбування лише хоріону, 3. «-» - відсутнє фарбування Збудник ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 Спосіб прижиттєвої диференціації онкосфер давенеозу та райєтинозу птиці, що включає відбір фекалію, розмішування його у великій кількості води, відстоювання, зливання надосадової рідини, розглядання капсул у чашках Петрі, який відрізняється тим, що як барвник застосовують брильянтову зелень в розведенні 1:10000. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2