Спосіб оцінки біологічної активності екстрактів ехінацеї

Реферат: UA 80541 U UA 80541 U 5 10 15 20 25 30 35 Корисна модель належить до галузі біології, сільського господарства, а саме способів оцінки біологічної активності речовин шляхом біотестування, і може бути використаною під час вивчення фізіологічних процесів та скринінгу рослин. Відомий спосіб оцінки біологічної активності розчинів та екстрактів ехінацеї шляхом біотестування на паростках ячменю посівного (Hordeum sativum Lessen.) (Див. Пат. України № 27927 "Спосіб оцінки алелопатичної активності ехінацеї"). При цьому відсортоване насіння ячменю розкладають на фільтрувальний папір, змочений дистильованою водою, і ставлять в термостат при температурі 25-27 °C. Коли насіння покільчиться, відбирають те, у якого корінці достигли довжини 1-3 мм, по 20-25 штук розміщують в чашці Петрі з досліджуваними розчинами або екстрактами. Паралельно закладають контрольну чашку Петрі з дистильованою водою. На наступну добу відокремлюють корені від зернини в дослідах і контролі, зважують масу всіх коренів на аналітичних вагах і вираховують середнє по кожному варіанту досліду. Результати виражають у відсотках до маси коренів в контролі. Про біологічну активність судять за стимулювання або інгібування тест-системи за різних розведень. Незважаючи на простоту та надійність відомого способу, він має певні недоліки. Температура 25-27 °C, за якої проводять дослідження, викликає фізіологічні процеси під час проростання сім'янки ячменю, які впливають на результати оцінки. Задача корисної моделі полягає у підвищенні достовірності визначення біологічної активності екстрактів ехінацеї. Поставлена задача вирішується тим, що оцінку біологічної активності проводять за довжиною коренів і температури 5-15 °C. Спосіб здійснюється наступним чином. Насіння ячменю змочують дистильованою водою і ставлять в термостат за температури 25-27 °C. Коли насіння покільчиться відбирають те, у якого корінці достигли довжини 1-3 мм, по 20-25 штук розміщують в чашці Петрі з досліджуваними розчинами або екстрактами і поміщають у термостат за температури 5-15 С. Паралельно закладають контрольну чашку Петрі з дистильованою водою. Через 24 та/або 48 годин визначають довжину коренів в досліді й контролі і вираховують середнє по кожному варіанту досліду. Результати виражають у відсотках до середньої довжини коренів в контролі. Про біологічну активність судять за стимулюванням або інгібуванням тест-системи при різних розведеннях. Дослідами було встановлено, що за умов понижених температур тест культура краще реагує на фізіологічно активні речовини, що містяться в екстрактах ехінацеї. Як свідчать результати, наведені в таблиці 1, через 24 години усі досліджені концентрації екстракту за умов температури 5-15 °C показали стимулюючу дію. В той же час, за оцінкою по прототипу біологічна активність коливалась у межах -18,0…+0,4 %, що підтверджує більш високу достовірність пропонованого способу. Таблиця 1 Оцінка біологічної активності екстракту ехінацеї через 24 години (+/- до 100 % в контролі) Температура 5 °C 10 °C 15 °C 25 °C (прототип) -2 10 78,2* 73,9* 2,0* -13,7 -3 10 155,0* 135,3* 17,8* -18,0 Концентрація розчинів, % -4 -5 10 10 120,5* 136,6* 103,3* 130,1* 19,9* 36,6* -7,1 0,4 -6 10 110,5* 113,7* 34,7* -6,1 *) різниця достовірна порівняно з прототипом 40 45 Приклад. Була проведена оцінка біологічної активності екстракту ехінацеї за умов визначення довжини коренів ячменю через 48 годин і температури 10 С. Паралельно проводили визначення за прототипом. Результати наведені в таблиці 2. Можна зробити висновок, що при температурі +10 °C набагато краще проявляється дія екстракту. В -2 -8 концентраціях 10 -10 стимулююча дія проявлялася на рівні 31,1-104,9 % відносно контролю. -2 -8 За прототипом (+25 °C) незначна стимуляція спостерігалась лише в концентраціях 10 , 10 і 10 10 %. Достовірність різниці оцінки за прототипом і за пропонованим способом підтверджується статистично. 1 UA 80541 U Таблиця 2 Оцінка біологічної активності екстракту ехінацеї через 48 годин (+/- до 100 % в контролі) 10 Тест-система 25 град. (прототип) 10 град С Оцінка достовірності 5 % рівні *) 10 10 Концентрація розчинів (в %) -5 -6 -7 -8 10 10 10 10 10 10 10 0,79 69,2 -19,9 104,9 -13,9 98,5 -1,4 80,3 -8,5 31,1 -3,4 64,0 5,4 56,3 -17,0 -4,3 14,9 45,2 15,711,2 + + + + + + + + -2 С на -3 -4 -9 -10 -11 *) + різниця достовірна, - різниця не достовірна Таким чином, застосування пропонованого способу для оцінки біологічної активності екстрактів ехінацеї дозволяє більш достовірно оцінити їх фізіологічну активність. 5 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 10 Спосіб оцінки біологічної активності екстрактів ехінацеї шляхом пророщування сім'янок ячменю посівного, визначення їх морфометричних показників та порівняння дослідних варіантів з контролем, який відрізняється тим, що оцінку довжини коренів проводять за температури 515 °C. Комп’ютерна верстка І. Мироненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2