Днк експресуюча касета, дріжджовий вектор експресії, спосіб одержання поліпептиду

1. ДНК экспрессирующая кассета, отличающаяся тем, что включает в себя последовательность 5'-P-SP-LS-PS-*ген*-(T)i-3', где Ρ обозначает промоторную последовательность, SP обозначает ДНК последовательность, кодирующую сигнальный пептид, LS обозначает ДНК последовательность, кодирующую лидерный пептид общей формулы I: Х4-Х5-Х6 , Ю (II) C2 (13) 40648 где X4 обозначает последовательность от 1 до 21 одинаковой или разной кодируемой аминокислоты, X5 обозначает Pro или одну из аминокислотных последовательностей ValAsnLeu, LeuAlaAsnValAlaMetAla, LeuAspValValAsnLeuProGly или LeuAspValValAsnLeuIleSerMet, и X6 обозначает последовательность от 1 до 8 одинаковых или разных кодируемых аминокислот. 8. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X4 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в себя один или несколько мотивов LeuValAsnLeu, SerValAsnLeu, MetAlaAsp, ThrGluSer, ArgPheAlaThr или ValAlaMetAla. 9. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающа яся тем, что X4 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в себя последовательность AsnSerThr или AsnThrThr. 10. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X4 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в себя последовательность (Ser/Leu)ValAsnLeu, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAsp, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAspAsp, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSer, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSer lle или (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThr. 11. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X4 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в себя последовательность (11) где X1 обозначает пептидную связь или кодируемую аминокислоту, X2 обозначает пептидную связь или кодируемую аминокислоту, или последовательность до 4 одинаковых или разных кодируемых аминокислот, Ζ обозначает кодируемую аминокислоту кроме Pro, и X3 обозначает последовательность от 4 до 30 одинаковых или разных кодируемых аминокислот, PS обозначает ДНК последовательность, кодирующую процессинговый сайт, *ген* обозначает ДНК последовательность, кодирующую полипептид, Т обозначает терминаторную последовательность, и і равно 0 или 1. 2. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что X1 в общей формуле I обозначает Ser, Thr или Ala. 3. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что X2 в общей формуле I обозначает Ser, Thr или Ala. 4. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что X2 в общей формуле I обозначает SerIle. 5. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что X2 в общей формуле I обозначает SerAlaIle. 6. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что X2 в общей формуле I обозначает SerPheAlaIle. 7. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что X3 в общей формуле I обозначает аминокислотную последовательность общей формулы II: (I) UA GlnProIle(Asp/Glu) (Asp/Glu)X1(Glu/Asp)X2 AsnZ(Thr/Ser)X3 , (19) (21) 96124661 (22) 16.06.1995 (24) 15.08.2001 (31) 0705/94; 08/282.852 (32) 16.06.1994; 29.07.1994 (33) DK; US (86) PCT/DK95/00249, 16.06.1995 (46) 15.08.2001, Бюл. № 7, 2001 р. (72) К'єлдсен Томас Бьорглум, DK, Вад Кнуд, DK (73) НОВО НОРДІСК А/С, DK (56) Julius, D.A. et al., Cell 37 (1984b) 1075. 40648 Asn(Thr/Ser)ThrLeu, Asn(Thr/Ser)ThrLeuAsnLeu или Asn(Thr/Ser)ThrLeuValAsnLeu. 12. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X5 в общей формуле II обозначает Pro. 13. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X5 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность ValAsnLeu. 14. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X5 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность LeuAlaAsnValAla MetAla. 15. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X5 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность LeuAspValVal AsnLeuProGly. 16. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X5 в общей формуле II обозначает аминокислотную последовательность LeuAspValValAsnLeuIleSerMet. 17. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что Х6 в общей формуле II обозначает Ala, Gly, Leu, Thr, Val или Ser. 18. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что X6 в общей формуле II обозначает GlyAla или SerAla. 19. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что Х6 в общей формуле II обозначает AlaVal Ala. 20. Экспрессирующая кассета по п.7, отличающаяся тем, что Х6 в общей формуле II обозначает GlyAlaAspSerLysThrValGlu. 21. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что лидерный пептид, кодируемый ДНК последовательностью LS, выбран из группы, содержащей 2 40648 3 40648 22. Экспрессирующая кассета по п. 21, отличающаяся тем, что лидерный пептид, кодируемый ДНК последовательностью LS, выбран из группы, содержащей: 4 40648 23. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что SP представляет собой ДНК последовательность, кодирующую сигнальный пептид a-фактора, сигнальный пептид амилазы из слюны мыши, сигнальный пептид карбоксипептидазы, сигнальный пептид дрожжевой аспартиновой протеазы 3 или дрожжевой BAR1 сигнальный пептид. 24. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что PS представляет собой ДНК последовательность, кодирующую L ysArg, ArgLys, LysLys, Arg Arg или Ile-GluGlyArg. 25. Экспрессирующая кассета по п.1, отличающаяся тем, что полипептид, кодируемый *геном*, выбран из группы, включающей в себя апротинин, ингибитор тканевого фактора пути метаболизма или ингибиторы других протеаз, инсулин или предшественники инсулина, инсулиноподобный фактор роста I, инсулиноподобный фактор роста II, человеческий или бычий гормон роста, интерлейкин, глюкагон, глюкагоноподобный пептид-1, тканевой активатор плазминогена, трансформирующий фактор роста a или β, происходящий из тромбоцитов фактор роста, ферменты или их функциональный аналог. 26. Дрожжевой вектор экспрессии, содержащий экспрессирующую кассету по любому из пп.1-25. 27. Способ получения полипептида, включающий культивирование дрожжевых клеток, способных экспрессировать целевой полипептид в под 5 40648 ходящей среде, с последующим выделением из среды, отличающийся тем, что используют дрожжевые клетки, трансформированные дрожжевым вектором экспрессии по п. 26. ______________________________ Настоящее изобретение относится к синтетическим лидерным пептидным последовательностям для секреции полипептидов в дрожжах. Дрожжевые организмы продуци руют большое число белков, синте зируемых внутриклеточно, но функционирующи х за пределами клетки. Такие внеклеточные белки называют секретируемыми белками. Эти секретируе мые белки сначала экспрессируются внутри клетки в форме предшественника (или пре-белка), содержащего предпоследовательность, обеспечивающую эффективное направление экспрессированного продукта через мембрану эндоплазматического ретикулума (ЭР). Предпоследовательность, которую обычно называют сигнальным пепти дом, обычно отщепляется от инте ресующего нас продукта в хо де транслокации. Предназначенный для секреции белок транспортируется в аппарат Гольджи. Из аппарата Гольджи белок может быть различными путями доставлен в компартменты, такие как клеточная вакуоль или клеточная мембрана, или может быть выведен из клетки для секреции во внешнюю среду [1]. Было предложено несколько подхо дов к экспрессии и секреции в дрожжах ге терологичных для них белков. Известен [2] способ, при котором гетерологичные для дрожжей белки экспрессируются, процессируются и секретируются путем трансфор мации дрожжевого организма вектором экспрессии, несущим кодирующую ин тересующий нас белок ДНК и сигнальный пептид, получе ния культуры трансфор мированного организма, выращивания этой культуры и выделения указанного белка из такой культуральной среды. Сигнальный пептид может быть собственным сигнальным пептидом инте ресующего нас белка, гетерологичным сигнальным пептидом или гибридом нативного и гетерологичного сигнального пепти да. При использовании гетерологичных для дрожжей сигнальных пептидов может встать проблема не обеспечения гетерологичным сигнальным пептидом эффективной транслокации и/или последующего отщепления такого сигнального пептида. Известно [3], что Saccharomyces cerevisiae MFa1 (a-фактор) синтезируется в препро форме из 165 аминокислот, содержащей сигнальный или препептид из 19 аминокислот, за которым следует "ли дер" или пропептид из 64 аминокислот, включающий в себя три N-связанных сайта гликозилирования, за которым следует (LysАrg(Аsр/Glu,Аlа)2-3a-фактор)4. Сигнально-лидерная часть препpoMFa1 широко используется для достижения синтеза и секреции гетерологичных белков в S. cerevisiae. Также известно [4-10] использование сигнального/лидерного пепти да, гомологичного для дрожжей. Описано как использование предшественника a-фактора S. cerevisiae [9], так и использование сигнального пепти да инвертазы Saccharomyces cerevisiae PH05 [10] и использование сигнального пептида PH05 [11] для секреции чужеродных белков. Описаны также [4-8] способы, при помощи которых сигнал-лидер из а-фактора Saccharomyces cerevisiae (MFa1 и MFa2) используют для секреции экспрессированных гетерологичных белков в дрожжах. Путем присоединения ДНК-последовательности, кодирующей сигнал/лидер последовательность S. cerevisiae MFa1, к 5’ концу ге на, кодирующего интересующий нас белок, была продемонстрирована секреция и процессинг интересующего нас белка. Известна [12] систе ма секреции полипептида из S. cerevisiae с использованием лидерной последовательности a-фактора, усеченной для исключения четырех единиц a-фактора, присутствующи х на нативной лидерной последовательности, с тем чтобы убрать сам лидерный пептид, присоединенный к гетерологичному полипепти ду через процессинговый сайт a-фактора LysArgGluAlaGluAla. Указано, что такая конструкция приводит к эффективному процессингу меньших пептидов (менее 50 аминокислот). Для секреции и процессинга больши х пептидов нативная лидерная последовательность a-фактора была усечена, чтобы убрать одну или две единицы a-фактора между ли дерным пептидом и полипептидом. Некоторое количество секретированных пептидов было подвергнуто воздействию протеолитической процессинговой систе ме, способной расщеплять пептидную связь на карбокси-конце двух последовательных основных аминокислот. Эта ферментативная активность кодируется в S.cerevisiae геном КЕХ 2 [13]. Процессинг продукта КЕХ 2 протеазой необходим для секреции активного S.cerevisiae скрещивающего фактора a1(MFa1 или a-фактора), в то время как КЕХ 2 не вовлечен в секрецию активного S.cerevisiae скрещивающего фактора a. Секреция и корректный процессинг полипептида, который должен быть секретирован, достигается в некоторых случаях при культивировании дрожжевых организмов, которые трансформированы векто ром, сконструированным как указано в приведенных выше ссылках. Однако, во многих случаях уровень секреции очень низок или секреция отсутствует, или протеолитический процессинг осуществляется некорректно или неполностью. Таким образом, задачей данного изобретения является создание лидерных пептидов, которые обеспечивают бо лее эффективную экспрессию и/или процессинг полипептидов. Неожиданно был обнаружен новый тип лидерного пептида, который позволяет достигать высокого уровня секреции полипептидов в дрожжах. Согласно этому, данное изобретение относится к ДНК экспрессирующей кассете, включающей в се бя следующую последовательность: 6 40648 5'-P-SP-LS-PS-*reн*-(T)i-3' SP обозначает ДНК последовательность, кодирующую сигнальный пептид, LS обозначает ДНК последовательность, кодирующую лидерный пептид общей фор мулы I: где Р обозначает промоторную последовательность, GInProIle (Asp/Glu) (Asp/Glu) X1 (Glu/Asp) X2 AsnZ (Thr/Ser) X3 где Х1 обозначает пептидную связь или кодируемую аминокислоту, Х2 обозначает пептидную связь или кодируемую аминокислоту, или последовательность до 4 одинаковых или разных кодируемых аминокислот, Z обозначает кодируемую аминокислоту кроме Pro, и Х3 обозначает последовательность от 4 до 30 одинаковых или разных кодируемых аминокислот, PS обозначает ДНК последовательность, кодирующую процессинговый сайт, *ген* обозначает ДНК последовательность, кодирующую по липептид, Т обозначает терминаторную последовательность, и i равно 0 или 1. В данном контексте под термином "лидерный пептид" понимают пептид, чьей функцией является позволить экспрессированному полипептиду быть направленным из эндоплазматического ретикулума в аппарат Гольджи и далее в секреторные везикулы для секреции в среду (то есть передвижение экспрeссированного полипептида через клеточную стенку или по меньшей мере через клеточную мембрану в периплазматическое пространство клетки). Выражение "синтетический", используемое по отношению к лидерным пептидам, подразумевает, что та кой лидерный пептид не обнаруживается в природе. Выражение "сигнальный пептид" обозначает препоследовательность, главной особенностью которой является гидрофобная природа, и которая присутствует как N-концевая последовательность в предшественнике внеклеточного белка, экспрессируемого в дрожжах. Функция сигнального пептида заключается в том, что бы позволить экспрессированному белку, который должен быть секретирован, попасть в эндоплазматический ретикулум. Сигнальный пептид в норме отщепляется в течение данного процесса. Сигнальный пептид может быть гетерологичным или гомологичным для дрожжевого организма, продуци рующего указанный белок. Выражение "полипептид" обозначает как гетерологичный полипептид, то есть полипептид, который не продуци руется в природе хозяйским дрожжевым организмом, так и гомологичный полипептид, то есть полипептид, который продуцируется в природе хозяйским дрожжевым организмом, и любые их преформы. В предпочтительном воплощении экспрессирующая кассета по изобретению кодирует ге терологичный полипептид. Выражение "кодируе мая аминокислота" подразумевает аминокислоту, которая может быть закодирована при помощи триплета ("кодона") нуклеотидоов. Если в аминокислотной последовательности, приведенной в настоящем описании, трехбуквенные коды двух аминокислот, разделенных косой чертой, да ны в скобках, например (Asp/Glu), то подразумевается, что данная последовательность (I) содержит либо одну,ли бо другую из этих аминокислот в соответствующем положении. Еще одним аспектом данного изобретения является способ продуцирования полипептидов в дрожжах, при котором в подходящей среде культивируют дрожжевую клетку, способную экспрессировать полипептид и которая трансформирована дрожжевым вектором экспрессии, как описано выше, содержащим лидерную пептидную последовательность по изобретению, с достижением экспрессии и секреции полипептида, после чего этот полипептид выделяют из среды. Настоящее изобретение иллюстрируется далее со ссылкой на прилагаемые рисунки, на которых: Фиг.1 схе матично изображает плазмиду рАК492; Фиг.2 показывает часть последовательности ДНК, кодирyющей сигнальный пептид/ли дер/МI3 предшественник инсулина;. Фиг.3 показывает конструкцию плазмиды рАК546; Фиг.4 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.4 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.5 показывает ДНК последовательность экспрессионной плазмиды рАК546 S.cerevisiae, кодирующей YAP3 сигнальный пептид, лидера SEQ ID No.4 и предшественник инсулина MI3, и закодированную аминокислотную последовательность; Фиг.6 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.6 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.7 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.8 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.8 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.17 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.9 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.16 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.10 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.19 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.11 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.20 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.12 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.21 и кодирующую ее последовательность ДНК; Фиг.13 показывает фрагмент ДНК рАК527, используемый как прямая матрица в конструкции SEQ ID No.4 и 6. Фиг.14 показывает фрагмент ДНК рАК531, используемый как прямая матрица в конструкции SEQ ID No.8. Фиг.15 показывает фрагмент ДНК рАК555, используемый как прямая матрица в конструкции SEQ ID No.16 и 17. 7 40648 Фиг.16 показывает фрагмент ДНК рАК559, используемый как прямая матрица в конструкции SEQ ID No.19 и 20. Фиг.17 показывает фрагмент ДНК рАК562, используемый как прямая матрица в конструкции SEQ ID No.21. Фиг.18 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.27 и кодирующую ее последовательность ДНК SEQ ID Nо.66; Фиг.19 показывает аминокислотную последовательность SEQ ID No.70, удлиненного с Nконца предшественника инсулина MI3, и кодирующую ее последовательность ДНК SEQ ID No.71; Фиг.20 показывает аминокислотную последовательность лидера SEQ ID No.67 и кодирующую ее последовательность ДНК SEQ ID No.69; Фиг.21 показывает фрагмент ДНК SEQ ID No.72 рАК614, используемый как прямая матрица в конструкции SEQ ID No.27. Фиг.22 показывает фрагмент ДНК SEQ ID No.73 рАК625, используемый как прямая матрица в конструкции SEQ ID No.67. Детальное описание изобретения Когда Х1 в общей фор муле I обозначает аминокислоту, она предпочти тельно является Ser, Thr или Ala. Когда X2 в общей фор муле I обозначает аминокисло ту, она предпочти тель но является Ser, Thr или Ala. Когда Х2 в общей фор муле I обоз начает после дова тельность двух аминокислот, она предпочти тельно представляет со бой SerIle. Когда X2 в общей фор муле I обозначает последова тельность тре х аминокислот, она предпочти тельно предста вляет собой SerAlaIle . Когда X2 в общей фор муле I обозначает последова тельность четыре х аминокислот, она предпочтитель но представляет со бой SerPheAla Thr. В предпочтитель ном воплощении Х3 является аминокислотной последова тель ностью общей фор мулы II Х4-Х5-X6 довательность от 1 до 8 одинаковых или разных кодируемых аминокислот. В общей формуле II X4 предпочти тельно обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в себя один или несколько мотивов LeuValAsnLeu, SerValAsnLeu, MetAlaAsp, ThrGluSer, ArgPheAlaThr или ValAlaMetAla; или Х4 обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в себя последовательность AsnSerThr или AsnThrThr; или Х4 обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в се бя последовательность (Ser/Leu)ValAsnLeu, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAsp, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAspAsp, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSer, (Ser/Leu)ValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSer Ile или (Ser/Leu)Val AsnLeuMetAla AspAspThrGluSer ArgPheAlaThr; или Х4 обозначает аминокислотную последовательность, которая включает в себя последовательность Asn(Thr/Ser)ThrLeu, Asn(Thr/Ser)ThrLeuAsnLeu или Asn(Thr/Ser)ThrLeuValAsnLeu; или любую их комбинацию. В общей формуле II Х5 предпочти тельно обoзначает Pro или аминокислотную последовательность, которая включает в себя последовательность ValAsnLeu, LeuAlaAsnValAlaMetAla, LeuAspValValAsnLeuProGly или LeuAspValVal AsnLeuIleSerMet. Когда X6 в общей фор муле II обозначает одну аминокислоту, она предпочтительно является Ala, Gl y, Leu, Thr, Val или Ser. Когда X6 в общей формуле II обозначает последовательность двух аминокислот, она предпочти тельно представляет собой GlyAla или SerAla. Когда X6 в общей формуле II обозначает последовательность трех аминокислот, она предпочтительно представляет собой AlaVal Ala. Когда Х6 в общей формуле II обозначает последовательность восьми аминокислот, она предпочтительно представляет собой GlyAlaAspSerLysThrValGlu. Примерами предпочти тельных лидерных пептидов, кодируемых последовательностью ДНК LS являются: (II) где Х4 обозначает последовательность от 1 до 21 одинаковой или разной кодируемой аминокислоты, X5 обозначает Pro или одну из аминокислотных последовательностей Val AsnLeu или LeuAlaAsnValAlaMetAla, и Х6 обозначает после SEQ ID No. 1 GInProIleAspGluAspAsnAspThrSerValAsnLeuProAla; SEQ ID No. 2 GInProIleAspAspGluAsnThrThrSerValAsnLeuProAla; SEQ ID No. 3 GInProIleAspAspGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuProAla; SEQ ID No. 4 GInProIleAspAspGluAsnThrThrSerValAsnLeuProVal; SEQ ID No. 5 GInProIleAspAspThrGluAsnThrThrSerValAsnLeuProAla; SEQ ID No. 6 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuProAla; SEQ ID No. 7 GlnProIleAspAspGluAsnThrThrSerValAsnLeuMetAla; SEQ ID No. 8 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 9 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAla; SEQ ID No. 10 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnValProThr; SEQ ID No. 11 GInLProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrLeuValAsnValProThr ; SEQ ID No. 12 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuProThr; SEQ ID No. 13 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrLeuValAsnValProGlyAla; SEQ ID No. 14 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaProAlaValAla; SEQ ID No. 15 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAspLeuAlaValGlyLeuProGlyAla; SEQ ID No. 16 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 17 GInProIleAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 18 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; 8 40648 SEQ ID No. 19 ClnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAla AspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuProLeu; SEQ ID No. 20 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuAlaAsnValAlaMetAla; SEQ ID No. 21 GlnProIleAspAspThrGluSerAlaIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 22 GlnProIleAspAspThrGluSerPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 23 GlnProIleAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuProLeu; SEQ ID No. 24 GlnProIleAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAspValValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 25 GlnProIleAspAspThrGluSerAlaAlaIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 26 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuAlaAsnValAlaMetAla; SEQ ID No. 27 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAspValValAsnLeuIleSerMetAla; SEQ ID No. 28 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAla AsnThrThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAspValValAsnLeuIleSerMetAla; and SEQ ID No. 67 GlnProlleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAlaLeuAspValValAsnLeuIleSerMetAla. К конкретным предпочтительным лидерным пептидам, кодируемым последовательностью ДНК LS относятся: SEQ ID No. 15 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAspLeuAlaValGlyLeuProGlyAla; SEQ ID No. 16 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 17 GlnProIleAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla ; SEQ ID No. 18 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 19 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuProLeu; SEQ ID No. 20 GInProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuAlaAsnValAlaMetAla; SEQ ID No. 21 GInProIleAspAspThrGluSerAlaIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 22 GInProIleAspAspThrGluSerPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 23 GInProIleAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuProLeu; SEQ ID No. 24 GInProIleAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAspValValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 25 GInProIleAspAspThrGluSerAlaAlaIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla; SEQ ID No. 26 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuValAsnLeuAlaAsnValAlaMetAla; and SEQ ID No. 28 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAsnThrThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAspValValAsnLeuIleSerMetAla. SEQ ID No. 67 GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAlaLeuAspValValAsnLeuIleSerMetAla. Сигнальная последовательность (SP) может кодировать любой сигнальный пептид, который обеспечивает эффективное направление экспрессированного полипептида по секреторному пути в клетке. Этот сигнальный пептид может быть встречающимся в природе сигнальным пeптидом или его функциональной частью либо синтетическим пептидом. Было обнаружено, что подходящими сигнальными пeптидами являются сигнальный пептид a-фактора, сигнальный пептид амилазы из слюны мыши [14], модифи цированный сигнальный пептид карбоксипептидазы [15] или дрожжевой BAR1 сигнальный пептид [16] или сигнальный пептид липазы из Humicola lanuqinosa или их производные. Описан [17] сигнальный пептид дрожжевой аспартиновой протеазы 3. Подхо дящим дрожжевым процессинговым сайтом, кодируе мым последовательностью ДНК PS, может быть любая парная комбинация Lys и Arg, та кая как LysArg, ArgLys, L ysLys или ArqArq, которая позволяет осуществлять процессинг данного полипептида с помощью КЕХ2 протеазы Saccharomyces cerevisiae или эквивалентной протеа зы в других видах дрожжей [13]. Если КЕХ2 процессинг не подхо дит, например если он будет вести к расщеплению полипептидного продукта, например из-за присутствия двух последовательных основных аминокислот в самом интересующем нас продукте, то может быть выбран процессинговый сайт для другой протеазы, включающий в себя комбинацию аминокислот, не встречающуюся в полипептидном продукте, например процессинговый сайт для FХа, IleGluGlyArg [18]. Белком, продуци рованным способом по изобретению, может быть любой белок, который успешно продуци руется в дрожжах. Примерами таких белков являются апротинин, инги битор тканевого факто ра пути метаболизма или ингибиторы других протеаз, инсулин или предшественники инсулина, челове ческий или бычий гормон роста, интер лейкин, глюкагон, глюкагон-подобный пептид-1 (GLP-1), IGF-I, IGF-II, тканевой активатор плаз миногена, трансфор мирующий фактор роста a или b, происходящий из тромбоцитов фактор роста, ферменты или функциональный аналог любого из эти х белков. В данном контекс 9 40648 те термин "функциональный аналог" обозначает белок со сходными с нативным белком функциями (подразумевается скорее природа, чем уровень биологической активности нативного белка). Белок может быть струк тур но схож с на тивным белком и может быть получен из нативного белка путем добавления одной или нескольких аминокислот к С- и/или N-концу на тивного белка, путем замещения одной или нескольких аминокислот в одном или нескольких различных сай та х нативной аминокислотной последовательности, п утем делеции одной или нескольких аминокислот с одного или с обоих концов нативного белка или в одном или нескольких сайта х аминокислотной последовательности, или путем вставки одной или нескольких аминокислот в один или несколько сайтов на тивной аминокислотной последовательности. Та кие модифи кации хорошо известны для некоторых упомянутых выше белков. Также предшественники или промежуточные продукты для други х белков могут быть получе ны способом по изобретению. Примером подходяще го предшественника является предшественник инсулина MI3, со держащий аминокислотную последовательность B(1-29)-Ala-Ala-L ys-A(1-21), где А(1-21) обозначает А цепь человеческого инсулина и В(1-29) обозначает В цепь челове ческого инсулина, в ко торой отсутствует Thr (B30). Предпочти тельны ДНК-конструк ции, кодирующие ли дерные последовательности, показанные на Фиг. 4-12 или их подхо дящие модифи кации. Примерами подхо дящи х модификаций последова тельности ДНК являются замены нуклеотидов, которые не приводят к получению другой аминокислотной последовательности белка, а соответствуют использованию кодонов дрожжевого организма, в который вво дят эту последовательность ДНК, или за мены нуклеотидов, которые не приводят к получению другой аминокислотной последовательности и, следовательно, возможно, другой струк туре белка. Другими примерами возможных модификаций являются вставки одного или нескольких кодонов в последовательность или добавление одного или нескольких кодонов к любому концу последовательности, или делеция одного или нескольких кодонов на любом конце или внутри данной последовательности. Рекомбинантным вектором экспрессии, несущим экспрессирующую кассету ны к соответствующему тер минатору, например TPI терминатору [19]. Рекомбинантный вектор экспрессии по изобретению содержит далее последовательность ДНК, способствующую репликации данного вектора в дрожжах. Примерами таких последовательностей являются гены репликации REP 1-3 и сайт инициации репликации дрожжевой плазмиды 2m. Такой вектор также может содержать селективный маркер, например TPI ген Schizosaccharomyces pombe [20]. Ме тоды, используемые для лигирования последовательности 5'-P-SP-LS-PS-*гeн*-(T)і-3' и вставки их в подходящие дрожжевые векторы, содержащие необходимую для репликации в дрожжах информацию, являются хорошо известными специалистам [18]. Очевидно, что такой вектор может быть сконструи рован либо путем получе ния ДНК-конструкции, содержащей полную последовательность 5'-P-SP-LS-PS-*гeн*-(T)і-3' с последующей вставкой этого фрагмента в подхо дящий вектор экспрессии, либо путем последовательной вставки в подхо дящий вектор фрагментов ДНК, кодирующи х информацию об индивидуальных элементах (таких как промоторная последовательность, сигнальный пептид, лидерная последовательность GlnProIle(Asp/Glu)(Asp/Glu)X1(Glu/Asp)X2 AsnZ(Thr/Ser)X3, процессинговый сайт, полипептид и, если имеется, терминаторная последовательность), с последующим лигированием. Дрожжевым организмом, используемым в способе по изобретению, может быть любой подхо дящий дрожжевой организм, который при культивировании продуци рует большие количества интересующего нас полипептида. Примерами подходящих дрожжевых ор ганизмов служат штаммы дрожжей видов Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces kluyveri, Saccharomyces pombe или Saccharomyces uvarum. Трансформацию дрожжевых клеток можно осуществить путем создания протопластов с последующей трансформацией известными способами. Средой, используемой для культивирования клеток, может быть любая традиционная среда, подхо дящая для выращивания дрожжевых ор ганизмов. Секретированный полипептид, значительная часть которого должна присутствовать в среде в правильно процессированной форме, может быть выделен из среды традиционными способами, включая отделение дрожжевых клеток от среды путем центрифугирования или фильтрации, осаждение белковых компонентов супернатанта или фильтрата с помощью соли, например сульфа та аммония, с последующей очисткой различными хроматографическими методами, например ион-обменной хроматографией, аффинной хроматографией и т.д. Настоящее изобретение далее демонстрируется на следующи х примерах, которые не ограничивают рамки заявленного изобретения. ПРИМЕРЫ. Плазмиды и ДНК. Все плазмиды для экспрессии имеют С-РОТ тип. Такие плазмиды описаны [21] и характеризуются наличием гена триозо фосфат изомеразы (РОТ) из Schizosaccharomyces pombe для селекции и стабилизации плазмид. Содержащие ген 5'-P-SP-LS-PS-*гeн*-(T)і-3' где Р, SP, LS, *ген*, Т и і определены выше, может быть любой вектор, способный реплицироваться в дрожжевых организмах. Промотором может быть любая последовательность ДНК, обнаруживающая транскрипционную активность в дрожжах, и которая может быть получе на из генов, кодирующи х либо гомологичные, либо гетерологичные для дрожжей белки. Такой промотор предпочти тельно получают из генов, кодирующи х гомологичные для дрожжей белки. Примерами подходящих промоторов являются промоторы Saccharomyces cerevisiae MFa1, TPI, ADH или PGK. Показанные выше последовательности должны также предпочтительно быть присоедине 10 40648 РОТ плазмиды могут быть получены из депонированного штамма E.coli (ATCC 39685). Далее эти плазмиды содержат промотор и терминатор триозо фосфат изомеразы из S. cerevisiae (PTPI и ТТРI). Они идентичны рМТ742 [22] (см.Фиг.1), за исключением области, определенной рестрикционным сайтом EcoRI-Xbal, охватывающим область, кодирующую сигнал/лидер/продукт. Плазмиды рАК527, рАК531, рАК555, рАК559, рАК562, рАК614 и рАК625 были использованы в качестве ДНК-матриц в ПЦР, примененной в конструкции лидеров, описанной в примерах. Синтетические фрагменты ДНК, служащие в качестве прямых матриц, показаны на Фиг. 13-17. За исключением показанных областей ДНК эти плазмиды идентичны рАК492, показанной на Фиг.1. Синтетические фрагменты ДНК были синтезированы на авто матическом ДНК-синтезаторе (Applied Biosystems model 380A) с использованием фосфорамидитной химии и коммерчески доступных реагентов [23]. Все остальные использованные материалы и методы являются широко известными [18]. Пример 1. Синтез лидера SEQ ID No. 4 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК546). Лидер SEQ ID No 4. имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAsp AspGluAsnThrThrSerValAsnLeuProVal. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: # 94 5'-ТАААТС ТАТААСТАСААААААСАС АТА-3' # 333 5'-GACTCTCTTAACTGGCAAGTTGACA-3' # 312 5'-AAGTAC AAAGCTTC AACCAAGTGAGAACCAC AC AAGTGTT GGTTAACGAATCTCTT-3' # 1845 5'-CATAC ACAATATAAACGACGG–3' Следующие полимеразные цепные реакции (ПЦР) были осуществлены с использованием набора реагентов Gene Amp PCR (Perkin Elmer, 761 Main Avewalk, CT 06859, USA), согласно инструкции производителя. В течение реакции на ПЦРсмесь наслаивали 100 мкл минерального масла (Sigma Chemical CO, St. Louis МО, USA): Полиме разная цепная реакция №1 5 мкл олигонуклеотида # 94 (50 пмоль) 5 мкл олигонуклеотида # 333 (50 пмоль) 10 мкл 10х ПЦР-буфера 16 мкл смеси dNTP 0,5 мкл Taq фермента 0,5 мкл плазмиды рАК527 (Фиг.13) в качестве матрицы (0,2 мкг ДНК) 63 мкл воды Было проведено в общем 12 циклов, один цикл составлял 94°С в течение 1 мин, 37°С в течение 2 мин, 72°С в течение 3 мин. ПЦР-смесь затем наносили на 2%-ный агарозный гель и стандартным образом проводили электрофорез [18]. Полученные фрагменты ДНК вырезали из агарозного ге ля и выделяли, используя Gene Clean kit (Bio 101 inc., PO BOX 2284, La Jolla, CA 92038, USA), согласно инструкции производителя. Полиме разная цепная реакция №2 5 мкл олигонуклеотида # 312 (50 пмоль) 5 мкл олигонуклеотида # 94 (50 пмоль) 10 мкл 10 х ПЦР-буфера 16 мкл смеси dNTP 0,5 мкл Taq фермента 10 мкл очищенного фрагмента ДНК из ПЦР №1 53,5 мкл воды Было проведено в общем 12 циклов, один цикл составлял 94°С в течение 1 мин, 37°С в течение 2 мин, 72°С в течение 3 мин. Полученные после ПЦР №2 фрагменты ДНК выделяли и очища ли, используя Gene Clean kit (Bio 101 inc., PO BOX 2284, La Jolla, CA 92038, USA), согласно инструкции производителя. Очищенные ПЦР фрагменты ДНК растворяли в 10 мкл воды и буфера для рестрикционных нуклеаз, и разрезали рестрикционныии эндонуклеазами Asp 718 и Hind III в общем объеме 15 SEQ ID No. 29 SEQ ID No. 30 SEQ ID No. 31 SEQ ID No. 32 мкл, используя стан дартные методики [18]. Фрагмент ДНК 167 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очищали, используя Gene Clean kit как описано. S.cerevisiae экспрессионная плазмида рАК492 (показано на Фиг.1) является производной описанной выше плазмиды рМТ742, в которой фрагмент, кодирующий сигнал/лидер/предшественник инсулина был заменен на EcoRI-XbaІ фрагмент, показанный на Фиг.2. Этот фрагмент был синтезирован на Applied Biosystem ДНК синтезаторе, согласно инструкциям производителя. Плазмиду р АК492 разрезали рестрикционными эндонуклеазами Asp 718 и Hind III и выделяли фрагмент ДНК 140 пн, кодирующий часть предшественника инсулина MI3. Три фрагмента ДНК лигировали вместе, используя Т4 ДНКлигазу в стандартных условиях [18]. Затем лигированной смесью трансформировали компетентный штамм E.coli (R-, M+) и определяли трансформантов по устойчивости к ампицилину. Вы деляли плазмиды из полученных колоний E.coli, используя стандартные методики [18], осуществляя проверку подхо дящими рестрикционными эндонуклеазами, то есть EcoRI, Xbal, Ncol и Hind III. С помощью ДНК сиквенс-анализа (Sequenase, U.S. Biochemical Corp.) с использованием праймера # 94 было показано, что отселектированная плазми-да рАК546 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.4. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID No.4, показана на Фиг. 4. Плазмидой рАК546 трансформировали штамм МТ663 S.cerevisiae [24] и назвали получен ный штамм уАК546. Последовательность ДНК области экспрессионной плазмиды, кодирующей белок, дана на Фиг.5. Пример 2. Синтез лидера SEQ ID No. 6 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм yAK531). Лидер SEQ ID No 6. имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAsp AspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuProAla. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: 11 40648 # 331 5'-GAATCTCTTAGCTGGC AAGTTGAC AGAAGTAGTGTTAG TTTC AGAGTCGTC AATT-3’ Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида # 333 использовали олигонуклеотид 331. Фрагмент ДНК 168 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очища ли как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде как описано в Примере 1. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК531 содержит последовательность ДНК, кодирующую лидер SEQ ID No.6. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID No.6, показана на Фиг.6. Плазмидой рАК531 трансфор SEQ ID No. 33 мировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали полученный штамм уАК531. Последовательности ДНК, кодирующие сигнальный пептид и предшественник инсулина MI3, являются такими же, как на Фиг.5. Пример 3. Синтез лидера SEQ ID No. 8 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм yAK547). Лидер SEQ ID No 8. имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAsp AspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuProAla. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: # 345 5 ' -AACGAATCTCTTAGC ACCTGGC AAGTTGAC AGAAGT-3' Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида # 333 использовали олигонуклеотид #345 и в качестве матрицы - плазмиду рАК531 (Фиг.14). Фрагмент ДНК 171 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очища ли как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде как описано в Примере 1. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК547 содержит последовательность ДНК, кодирующую лидер SEQ ID No.8. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID No.8, SEQ ID No. 34 показана на Фиг.7. Плазмидой рАК547 трансформировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали полученный штамм уАК547. Последовательности ДНК, кодирующие сигнальный пептид и предшественник инсулина MI3, являются такими же, как на Фиг.5. Пример 4. Синтез лидера SEQ ID No.17 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК561). Лидер SEQ ID No. 17 имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAspAspThrGluSerAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: 25 # 376 5'-AACGAATCTCTTAGC ACCTGGC AAGTTGACC AAAGTAG TGTTGATAGATTC AGTGTCGTC-3' Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида #333 использовали олигонуклеотид # 376 и в качестве матрицы - плазмиду рАК555 (Фиг.15). Фрагмент ДНК 180 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очища ли как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде как описано в Примере 1. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК561 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.17. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID SEQ ID No. 35 No.17, показана на Фиг. 8. Плазмидой рАК561 трансфор мировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали получен ный штамм уАК561. Последовательности ДНК, кодирующие сигнальный пептид и предшественник инсулина MI3, являются такими же, как на Фиг.5. Пример 5. Синтез лидера SEQ ID No. 16 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК559). Лидер SEQ ID No.16 имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAsp AspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAspAspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla. Были синте зированы следующие олиго нуклеотиды: # 375 5'-AACGAATCTCTTAGC ACCTGGC AAGTTAACCAAAGTAGT GTTGATAGATTCAGTGTCGTC AGCCATCAAGTTGAC-3' Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида # 333 использовали олигонуклеотид # 375 и в качестве матрицы - плазмиду рАК555 (Фиг.15). Фрагмент ДНК 222 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очища ли как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экс SEQ ID No. 36 прессионной плазмиде как описано в Примере 1. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК559 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.16. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID No.16, показана на Фиг.9. Плазмидой рАК559 трансфор мировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали получен ный штамм уАК559. Последова 12 40648 тельности ДНК, кодирующие сигнальный пептид и предшественник инсулина MI3, являются такими же, как на Фиг.5. Пример 6. Синтез лидера SEQ ID No. 19 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК580). Лидер SEQ ID No.19 имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAsp AspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAsp AspThrGluSerArgPhe Ala ThrAsnThrThrLeu Val AsnLeuProLeu. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: #384 5'-AACGAATCTCTTCAATGGC AAGTTAACCAAAGTAGTGT TAGTAGCGAATCTAGATTC AGTGTCGTC AGCC AT-3' Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида #333 использовали олигонуклеотид # 384 и в качестве матрицы - плазмиду рАК559 (Фиг.16). Фрагмент ДНК 228 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очища ли как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде как описано в Примере 1. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК580 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.19. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID No.19, показана на Фиг.10. Плазмидой рАК580 SEQ ID No. 37 трансфор мировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали получен ный штамм уАК580. Последовательности ДНК, кодирующие сигнальный пептид и предшественник инсулина MI3, являются такими же, как на Фиг.5. Пример 7. Синтез лидера SEQ ID No.20 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК583). Лидер SEQ ID No.20 имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAsp AspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAsp AspThrGluSerIleAsnThrThrLeuValAsnLeuAlaAsnValAla MetAla. Были синтезированы следующие олигонуклеотиды: # 390 5'-AACGAATCTCTTAGCC ATGGCAACGTTAGCC AAGTTAA CCAAAGT-3' Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида #333 использовали олигонуклеотид #390 и в качестве матрицы - плазмиду рАК559 (Фиг.16). Фрагмент ДНК 231 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очища ли как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде как описано в Примере 1. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК583 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.20. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID SEQ ID No. 38 No.20, показана на Фиг.11. Плазмидой рАК583 трансфор мировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали получен ный штамм уАК583. Последовательности ДНК, кодирующие сигнальный пептид и предшественник инсулина MI3, являются такими же, как на Фиг.5. Пример 8. Синтез лидера SEQ ID No. 21 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК586). Лидер SEQ ID No.21 имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAspAsp ThrGluSerAlaIleAsnThrThrLeuValAsnLeuProGlyAla. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: # 401 5'-AACGAATCTCTTAGC ACCTGGC AAGTTGACC AAAGTAG TGTTGATAGC AGATTCAGTGTCG-3' Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида #333 использовали олиго-нуклеотид # 401 и в качестве матрицы - плазмиду рАК562 (Фиг.17). Фрагмент ДНК 183 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очища ли как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде как описано в Примере 1. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК586 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.21. Последовательность ДНК, кодирующая лидер SEQ ID No.21, показана на Фиг.12. Плазмидой рАК586 трансфор мировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали получен ный штамм уАК586. Последова SEQ ID No. 39 тельности ДНК, кодирующие сигнальный пептид и предшественник инсулина MI3, являются такими же, как на Фиг.5. Пример 9. Экспрессия предшественника инсулина с использованием выбранных лидерных последовательностей согласно настоящему изобретению. Дрожжевой штамм, несущий плазмиды, как описано выше, выращивают на YPD среде [26]. Для каждого штамма помещают на качалку при 30°С на 72 ч 6 индивидуальных культур по 5 мл до фи нальной OD600 oколо 15. После центрифугирования удаляют супернатант для HPLC анализа, с помощью которого измеряют концентрацию секретированного предшественника инсулина [27]. В таблице 1 даны уровни экспрессии предшественника инсулина MI3, полученные с исполь 13 40648 зованием выбранных лидерных последовательностей согласно изобретению, в виде процента от уровня, получен ного у трансфор мантов рМТ742 с использованием MF a(l) лидер S.cerevisiae. Таблица 1 Лидер Уровень экспрессии,% МТ748 a-лидер SEQ ID No.15 SEQ ID No.16 SEQ ID No.17 100 87 215 157 SEQ ID No.19 166 SEQ ID No.20 86 SEQ ID No.21 145 SEQ ID No.22 137 SEQ ID No.23 121 Пример 10. Синтез лидера SEQ ID No.27 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК677). Лидер SEQ ID No.27 имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAsp AspThrGluSerAsnThrThrSerValAsnLeuMetAlaAsp AspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAspValValAsnLeuIleSerMetAla. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: # 440 5'-GGTTAACGAACTTTGGAGCTTCAGCTTC AGCTTCTTCTCTCTTAGCCAT GGAGATC AAGTTAACAAC ATCC AAAGTAGTGTT-3' SEQ ID No. 64 и # 441 5'-CAAGTACAAAGCTTC AACCAAGTGGGAACCGCAC AAGTGTTGGTTAACG AACTT-3’ SEQ ID No. 65 Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида # 333 использовали олигонуклеотид # 440 и в качестве матрицы - плазмиду рАК614. Для второй ПЦР вместо олигонуклеотида # 312 использовали олигонуклеотид #441. Очищенные ПЦР фрагменты ДНК выделяли и разрезали рестрикционными эндонуклеазами Asp 718 и Hind III, как описано в примере 1. Фрагмент ДНК 268 пн Asp 718/Hind III подвергали электрофорезу на агарозном геле и очищали как описано в Примере 1. Фрагмент ДНК Asp 718/Hind III субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде, как описано в Примере 1, за исключением того, что фрагмент 140 пн HindIII/Xbal был получен из рАК602 и кодирует AspВ28 человеческий инсулин. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселектированная плазмида рАК616 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.27. Последовательность ДНК SEQ ID No.66, кодирующая лидер SEQ ID No.27, показана на Фиг.11. Фрагмент ДНК 268 пн Asp 718/Hind III из рАК616 выделяли и лигировали с фрагментом ДНК 10986 пн Asp 718/XbaI из рАК464 (кодирующим удлиненный AspВ28 че ловеческий инсулин), обозначив рАК625. Фрагмент ДНК 180 пн Asp718/NcoI из рАК625 был выделен и лигирован с фрагментом ДНК 221 пн NcoI/Xbal из pJB146 (кодирующим удлиненный предшественник инсулина) и фрагментом ДНК 10824 пн Asp718/XbaI из рАК601, полученную плазмиду обозначили рАК677. Плазмидой рАК677 трансформировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали полученный штамм уАК677. За исключением последовательности ДНК, кодирующей лидер, последовательность ДНК, кодирующая сигнальный пептид, показана на Фиг.5. Последовательность ДНК, кодирующая удлиненный предшественник инсулина MI3, показана на Фиг.19. Пример 11. Синтез лидера SEQ ID No.67 для экспрессии предшественника инсулина MI3 в S.cerevisiae (штамм уАК680). Лидер SEQ ID No.67 имеет следующую аминокислотную последовательность: GlnProIleAspAspThrGluSerAsnTh rThrSerVal AsnLeu MetAla AspAspThrGluSerArgPheAlaThrAsnThrThrLeuAlaLeuAspVal Val AsnLeuIleSerMetAla. Были синтезированы следующие олиго нуклеотиды: # 577 5 ' -TCTCTTAGCCATGGAGATC AAGTTAACAAC ATCC AAAG CCAAAGTAGTGTT-3' SEQ ID No. 68 Полимеразная цепная реакция была проведена как описано в Примере 1, но вместо олигонуклеотида #333 использовали олигонуклеотид # 557 и в качестве матрицы - плазмиду рАК625, а вторую ПЦР не проводили. ПЦР фрагмент разрезали рестрик ционными эндонуклеазами Asp 718 и Nco I, как описано в примере 1. Фрагмент ДНК 190 пн Asp 718/NcoI подвергали электрофорезу на агарозном геле и очищали как описано в Примере 1, за исключением того, 14 40648 что векторный фрагмент ДНК 10824 пн Asp 718/XbaI был вы делен из рАК601. Фрагмент ДНК 190 пн Asp 718/NcoI субклонировали в S.cerevisiae экспрессионной плазмиде, как описано в Примере 1, за исключением того, что фрагмент 221 пн NcoI/Xbal (кодирующий удлиненную вер сию предшественика инсулина) был получен из рАК677 и использован вместо фрагмента HindIII/Xbal ДНК. С помощью ДНК сиквенс-анализа, как описано в Примере 1, было показано, что отселекти рованная плазмида рАК680 содержит последовательность ДНК, кодирующую ли дер SEQ ID No.67. Последовательность ДНК SEQ ID No.69, кодирующая лидер SEQ ID No.67, показана на Фиг.20. Плазмидой рАК680 трансфор мировали штамм МТ663 S.cerevisiae [25] и назвали полученный штамм уАК680. За исключением последовательности ДНК, кодирующей лидер, последовательность ДНК, кодирующая сигнальный пептид, показана на Фиг.5. Последовательность ДНК, кодирующая удлиненный предшественник инсулина MI3, показана на Фиг.19. Пример 12. Экспрессия удлиненного с N-конца предшественника инсулина MI3 с использованием лидерных последовательностей SEQ ID No.27 и SEQ ID No.67 согласно настоящему изобретению. Дрожжевой штамм, не сущий плаз миды, как описано вы ше, вы ращи вают на YPD сре де [26]. Для каждого штамма помещают на ка чалку при 30°С на 72 ч 6 индивидуаль ных культур по 5 мл до фи нальной OD600 около 15. После центрифуги рова ния удаляют супернатан т для HPLC анализа, с помощью которо го измеряют концентрацию секретиро ванного предшественника инсулина [27]. В таблице 2 да ны уровни экспрессии некоторых удлиненных с N-кон ца предшественников инсулина MI3, по лучен ных с использованием лидерных после дователь ностей SEQ ID No.27_и_SEQ ID No.67 согласно изобретению, в ви де процента о т уро вня, получен ного у трансфор манто в р МТ742 с использованием MFa(1) лидера S.cere visiae . Таблица 2 Штамм Сигнальный пептид Лидер МТ748 a a уАК675 YAP3 YAP3 251% К SEQ ID EEAEAEAE PK SEQ ID EEAEAEAP К SEQ ID EEAEAEAE No. 67 уАК680 YAP3 EEAEAEAP No. 67 уАК681 SEQ ID No. 27 YAP3 Относительно МТ748 No.27 уАК677 Удлиняющая последовательность PK ЛИТЕРАТУРА 224% 248% 362% 16. WO 87/02670. 17. Заявка на патент Дании №0828/93. 18. Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY, 1989. 19. T.Alber and G.Kawasaki, J.Mol.Appl.Genet. 1, 1982, pp.419-434. 20. P.R.Russell, Gene 40, 1985, pp. 125-130. 21. Заявка на патент EP 171 142. 22. Egel-Mitani M. et al. Gene 73 (1988) pp.113-120. 23. S.L.Beaucage and M.H.Caruthers, Tetrahedron Letters 22, 1981, pp. 1859-1869. 24. Опубликованная заявка на Европейский патент № 214 826. 25. Заявка на Европейский патент 86306721.1. 26. Sherman et al. Methods in Yeast Genetics, Cold Spring Harbor Laboratory (1981). 27. Snel, L. et al. Chromatographia 24 (1987) 329-332. 1. Pfeffer, S.R. and Rothman, J.E. Ann.Rev.Biochem. 56 (1987), 829-852. 2. European Publication No.0088632A. 3. Kurjan, J. and Herskowitz, I. Cell 30 (1982), 933-943. 4. Патент США №4,546,082. 5. European Publication Nо.0116201A. 6. European Publication No.0123294A. 7. European Publication No.0123544A. 8. European Publication No.0163529A. 9. European Publication No.0123289A. 10. Публикация патента DK No.3614/83. 11. WO 84/01153. 12. EP 206 783. 13. Julius, D.A. et al., Cell 37 (1984b) 1075. 14. O.Hagenbuechle et al., Nature 289, 1981, pp. 643-646. 15. L.A. Valls et al., Cell 48, 1987, pp. 887-897. 15 40648 (B) ОПЕРАЦИОННАЯ СИСТЕМА: PCDOC/MS-DOS (Г) ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ: PatentIn Release #1.0, Vesion #1.25 (6) ДАН НЫЕ О ТЕКУЩЕЙ ЗАЯВКЕ: (A) НОМЕР ЗАЯВКИ: (Б) ДАТА ПОДАЧИ: (B) КЛАС СИФИКАЦИЯ: (7) ДАН НЫЕ О ПРИОРИТЕТНОЙ ЗАЯВКЕ: (А) НОМЕР ЗАЯВКИ: DK 0705/94 и US 08/282,852 (Б) ДАТА ПОДАЧИ: 16.06.94 и 29.07.94 (8) ИНФОРМАЦИЯ О ПОВЕРЕННОМ/АГЕНТЕ: (A) И МЯ: Jorgensen, Dan et al. (B) НОМЕР ССЫЛКИ/ДЕЛА: 4085-WO,DJ (9) ТЕЛЕКОММУ НИКАЦИОННАЯ ИНФОРМАЦИЯ: (A) ТЕЛЕФОН: +45 4444 8888 (B) ТЕЛЕФАКС: +45 4449 3256 ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ (1)ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ: (1) ЗАЯ ВИТЕЛЬ: (А) И МЯ: No vo Nordisk A/S (Б) УЛИЦА: Novo Alle (Г) ГОРОД: DK-2880 Bagsvaerd (Д) СТРАНА: Denmark (Ж) ТЕЛЕФОН: +45 4444 8888 (3) ТЕЛЕФАКС: +45 4449 3256 (И) ТЕЛЕКС: 37173 (2) НАЗВАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ: СИНТЕТИЧЕСКИЕ ЛИДЕРНЫЕ ПЕПТИДНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ (3) КОЛИЧЕСТВО ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ: 73 (4) КОРРЕСПОНДЕНТСКИЙ АДРЕС (А) АДРЕС: Novo Nordisk A/S Corporate Patents (Б) УЛИЦА: Novo Alle (Г) ГОРОД: DK-2880 Bagsvaerd (Д) СТРАНА: Denmark (5) ФОРМА КОМПЬЮТЕРНОГО ПРЕДСТАВЛЕНИЯ: (A) ТИП НОСИТЕЛЯ: гибкий диск (Б) КОМПЬЮТЕР: IBM PC совместимый (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 1 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 15 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.1: GLn Pro Іle Asp Glu Asp Asn Asp Thr Ser Val Asn Leu Pro Ala 1 5 10 15 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 2 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 15 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.2: Gln Pro Ile Asp Asp Glu Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Pro Ala 1 5 10 15 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 3 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 16 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.3: Gln Pro Ilе Asp Asp Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Pro Ala 1 5 10 15 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 4 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 15 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.4: Gln Pro Ilе Asp Asp Glu Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Pro Val 1 5 10 15 (2) ИНФОРМАЦИЯ ТИ 5 О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОС (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ НОСТИ: 16 ПОСЛЕДОВАТЕЛЬ 40648 (А) ДЛИ НА: 16 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.5: Gln Pro Ile Asp Asp Thr Glu Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Pro Ala 1 5 10 15 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 6 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 17 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.6: Gln Pro Ile Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Pro 1 5 10 15 Ala (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 7 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 15 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.7: Gln Pro Ile Asp Asp Glu Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Met Ala 1 5 10 15 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 8 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 18 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.8: Gln Pro Ile Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Pro 1 5 10 15 Gly Ala (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 9 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 17 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.9: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Met 1 5 10 15 Ala (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 10 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 17 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.10: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Val Pro 1 5 10 15 Thr (2) ИНФОРМАЦИЯ ТИ 11 О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОС (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ НОСТИ: 17 ПОСЛЕДОВАТЕЛЬ 40648 (А) ДЛИ НА: 17 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.11: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Leu Val Asn Val Pro 1 5 10 15 Thr (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 12 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 17 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.12: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Pro 1 5 10 15 Thr (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 13 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 18 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 13: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Leu Val Asn Val Pro 1 5 10 15 Gly Ala (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 14 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 21 аминокислота (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.14: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Met 1 5 10 15 Ala Pro Ala Val Ala 20 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 15 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 25 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.15: Gln Pro Ile Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Met 1 5 10 15 Asp Leu Ala Val Gl y Leu Pro Gl y Ala 20 25 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 16 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 33 аминокислоты (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.16: 18 40648 Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Met 1 5 10 15 Ala Asp Asp Thr Glu Ser Ilе Asn Thr Thr Leu Val Asn Leu Pro Gly 20 25 30 Ala (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 17 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 19 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.17: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Ilе Asn Thr Thr Leu Val Asn Leu 1 5 10 15 Pro Gly Ala (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 18 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 18 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.18: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Leu Val Asn Leu Pro 1 5 10 15 Gly Ala (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 19 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 35 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.19: Gln Pro Ilе Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Met 1 5 10 15 Ala Asp Asp Thr Glu Ser Arg Phe Ala Thr Asn Thr Thr Leu Val Asn 20 25 30 Leu Pro Leu 35 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 20 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 36 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.20: Gln Pro Ile Asp Asp Thr Glu Ser Asn Thr Thr Ser Val Asn Leu Met 1 5 10 15 Ala Asp Asp Thr Glu Ser Ile Asn Thr Thr Leu Val Asn Leu Ala Asn 20 25 30 Val Ala Met Ala 35 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 21 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 20 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 21: 19 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 22 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 21 аминокислота (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 22: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 23 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 36 аминокислот (Б) ТИП; аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 23: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 24 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 39 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная(2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 24 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 25 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 21 аминокислота (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 25: 20 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 26 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 39 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 26: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 27 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 39 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 27 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 28 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 39 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 28: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 29 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 27 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота. (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 29 TAAATCTATA ACTAC AAAAA AC AC ATA (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 30 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 25 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 27 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (3) ГИПОТЕТИЧЕСКАЯ: НЕТ (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 30 21 40648 GACTCTCTTA ACTGGCAAGT TGAC A (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 31 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 56 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 25 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: КДНК (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 31: AAGTACAAAG CTTC AACCAA GTGAGAACCA C ACAAGTGTT GGTTAACGAA TCTCTT (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 32 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 21 пара оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 56 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ; линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 32: САТАС АСААТ ATAAACGACG G (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 33 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 55 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 21 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.33: GAATCTCTTA GCTGGC AAGT TGACAGAAGT AGTGTTAGTT TC AGAGTCGT CAATT (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 34 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 36 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 55 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.34: AACGAATCTC TTAGC ACCTG GCAAGTTGAC AGAAGT (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 35 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 60 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 36 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.35: AACGAATCTC TTAGC ACCTG GCAAGTTGAC CAAAGTAGTG TTGATAGATT C AGTGTCGTC (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 36 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 75 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 60 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.36: AACGAATCTC TTAGC ACCTG GCAAGTTAAC C AAAGTAGTG TTGATAGATT C AGTGTCGTC AGCC ATC AAG TTGAC 22 60 75 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 37 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 72 пары оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 37: AACGAATCTC TTC AATGGCA AGTTAACCAA AGTAGTGTTA GTAGCGAATC TAGATTC AGT GTCGTC AGCC AT (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 38 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 45 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 60 72 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.38 AACGAATCTC TTAGCC ATGG C AACGTTAGC CAAGTTAACC AAAGT (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 39 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 61 пара оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота 45 (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.39: AACGAATCTC TTAGC ACCTG GCAAGTTGAC CAAAGTAGTG TTGATAGC AG ATTC AGTGTC G (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 40 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 372 пары оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая 60 61 (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 82..351 (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 40: 23 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 41 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 89 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 41: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 42 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 45 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ; однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 82..351 (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.42: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 43 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 15 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (3) ГИПОТЕТИЧЕСКАЯ: НЕТ (3) АН ТИСМЫС ЛОВАЯ: НЕТ (6) ПРОИСХОЖДЕНИЕ: (А) ОРГАНИЗМ: син тетическая (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 43: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 44 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 297 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..276 (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 44: 24 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 45 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 91 аминокислота (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 45: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 46 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 51 пара оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..51 (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.46: 25 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 47 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 17 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 47: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 48 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 54 пары оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..54 (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.48: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 49 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 57 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..57 (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.49: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 50 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 99 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..99 (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.50: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 51 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 105 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: 26 40648 (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..105 (11) ОПИСАНИЕ SEQ ID No.51: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 52 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 108 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..108 (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.52 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 53 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 60 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 1..60 (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.53: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 54 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 276 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 113..274 (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.54: 27 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 55 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 54 аминокислоты (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 55: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 56 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 282 пары оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 113..280 (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.56: 28 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 57 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 56 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 57: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 58 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 282 пары оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 113..280 (11) ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.58: 29 40648 (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 59 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 56 аминокислот (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 59: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 60 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (A) ДЛИНА: 330 пар оснований (Б) ТИП: нуклеиновая кислота (B) СКРУЧЕННОСТЬ: однонитевая (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: кДНК (9) ОСОБЕННОСТЬ: (А) И МЯ/КЛЮЧ: CDS (Б) ПОЛОЖЕНИЕ: 113..328 (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No.60: (2) ИНФОРМАЦИЯ О ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ 61 (1) ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ: (А) ДЛИ НА: 72 аминокислоты (Б) ТИП: аминокислотная (Г) ТОПОЛОГИЯ: линейная (2) ТИП МОЛЕКУЛЫ: пептид (11)ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ SEQ ID No. 61: 30