Модифікований хімеричний поліпептид з покращеними фармакокінетичними властивостями

1. Молекула нуклеїнової кислоти, що кодує злитий поліпептид, що має здатність до зв'язування VEGF поліпептиду, яка містить:

(a) нуклеотидну послідовність, яка кодує компонент першого рецептора фактора росту ендотеліальних клітин судин (VEGF), що переважно містить імуноглобуліновий (Ig) домен 2 першого VEGF рецептора, оперативно зв'язану з

(b) нуклеотидною послідовністю, що кодує компонент другого VEGF рецептора, що переважно містить імуноглобуліновий домен 3 другого VEGF рецептора; та

(c) нуклеотидною послідовністю, що кодує мультимеризуючий компонент, де першим VEGF рецептором є Flt1, a другим VEGF рецептором є Flk1 або Flt4 та компоненти VEGF рецептора за (а) та (b) є єдиними компонентами VEGF рецептора злитого поліпептиду.

2. Молекула нуклеїнової кислоти за п. 1, яка відрізняється тим, що нуклеотидна послідовність, що кодує Ig домен 2 зовнішньоклітинного домену першого VEGF рецептора розташовується за нуклеотидною послідовністю, що кодує Ig домен 3 зовнішньоклітинного домену другого VEGF рецептора.

3. Молекула нуклеїнової кислоти за п. 1, яка відрізняється тим, що нуклеотидна послідовність, що кодує Ig домен 2 зовнішньоклітинного домену першого VEGF рецептора розташовується перед нуклеотидною послідовністю, що кодує Ig домен 3 зовнішньоклітинного домену другого VEGF рецептора.

4. Молекула нуклеїнової кислоти за будь-яким з пп. 1-3, яка відрізняється тим, що мультимеризуючий компонент містить імуноглобуліновий домен.

5. Молекула нуклеїнової кислоти за п. 4, яка відрізняється тим, що імуноглобуліновий домен вибрано з групи, яка включає Fc домен IgG та важкий ланцюг IgG.

6. Молекула нуклеїнової кислоти за п. 1, яка відрізняється тим, що містить нуклеотидну послідовність, вибрану з групи:

(a) нуклеотидна послідовність, зображена на Фіг. 21А-21С;

(b) нуклеотидна послідовність, зображена на Фіг. 22А-22С;

(c) нуклеотидна послідовність, зображена на Фіг. 24А-24С;

(d) нуклеотидна послідовність, яка є результатом виродженості генетичного коду, яка відрізняється від нуклеотидних послідовностей (а), (b) або (с).

7. Молекула нуклеїнової кислоти за п. 1, яка відрізняється тим, що компоненти злитого поліпептиду розташовані в комбінації: 1,2,3; 1,3,2; 2,1,3; 2,3,1; 3,1,2 або 3,2,1, де 1 означає компонент першого VEGF рецептора, 2 означає компонент другого VEGF рецептора, та 3 є мультимеризуючим компонентом.

8. Злитий поліпептид, який здатний зв'язуватися з поліпептидом VEGF, що кодується молекулою нуклеїнової кислоти за будь-яким з пп. 1-7.

9. Клонуючий вектор, що містить молекулу нуклеїнової кислоти за будь-яким з пп. 1-7.

10. Вектор експресії, що містить молекулу нуклеїнової кислоти за будь-яким з пп. 1-7, який відрізняється тим, що молекула нуклеїнової кислоти оперативно зв'язана з експресійною контрольною послідовністю.

11. Спосіб одержання векторної системи хазяїна для продукування злитого поліпептиду, який включає введення вектору експресії за п. 10 до прийнятної клітини-хазяїна.

12. Спосіб за п. 11, який відрізняється тим, що прийнятною клітиною-хазяїном є бактеріальна клітина, клітина дріжджів, клітина комах або клітина ссавців.

13. Спосіб за п. 12, який відрізняється тим, що прийнятною клітиною-хазяїном є Е.соlі або СНО клітина.

14. Спосіб одержання злитого поліпептиду, який включає вирощення клітин векторної системи хазяїна, одержаної відповідно до способу за будь-яким з пп. 11-13, за умов, що дозволяють продукування злитого поліпептиду та відновлення злитого поліпептиду, одержаного таким чином.

15. Димерний антагоніст фактора росту ендотеліальних клітин судин (VEGF), що містить два злиті поліпептиди за п. 1.

16. Димерний антагоніст за п. 15, який відрізняється тим, що є модифікованим шляхом ацетилювання або пегування.

17. Злитий поліпептид, здатний зв'язуватися з поліпептидом VEGF, який містить:

(а) компонент VEGF рецептора, що переважно містить імуноглобуліновий (Ig) домен 2 Flt1 VEGF рецептора та Ig домен 3 Flt1 або Flt4 VEGF рецептора; та

(b) мультимеризуючий компонент, де компонент VEGF рецептора за (а) є єдиним компонентом VEGF рецептора злитого поліпептиду.

18. Злитий поліпептид за п. 17, який відрізняється тим, що мультимеризуючий компонент містить імуноглобуліновий домен.

19. Злитий поліпептид за п. 18, який відрізняється тим, що імуноглобуліновий домен вибраний з групи, що включає Fc домен IgG та важкий ланцюг IgG.

20. Злитий поліпептид за п. 19, який містить амінокислотну послідовність, зображену на Фіг. 21А-21С, Фіг. 22А-22С або Фіг. 24А-24С.

21. Спосіб гальмування активності фактора росту ендотеліальних клітин судин (VEGF) у ссавця, який включає введення ссавцеві ефективної кількості злитого поліпептиду за будь-яким з пп. 17-20 або димерного антагоніста за п. 15 або 16.

22. Спосіб за п. 21, який відрізняється тим, що ссавець є людиною.

23. Спосіб за п. 21 або 22, який застосовується для уповільнення або запобігання росту пухлини, зменшення або запобігання набряку, зменшення або запобігання утворенню асцитів, зниження або гальмування плазматичного просякання у ссавців або блокування росту кровоносних судин у людини.