Спосіб одержання засобу з антимікробною активністю з насіння люпину багатолистого

Реферат: Спосіб одержання засобу з антимікробною активністю шляхом двократної екстракції рослинної сировини гарячою водою з наступною фільтрацією та упарюванням у вакуумі об'єднаних екстрактів до сухого порошку. Як рослинну сировину використовують насіння люпину багатолистого. Екстракцію проводять при постійно підтримуваній температурі 75-80 °C при співвідношенні сировини і екстрагенту 1:10-1:12. UA 105965 U (12) UA 105965 U UA 105965 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі хіміко-фармацевтичної галузі, а саме до способів одержання засобів рослинного походження з антимікробною активністю, зокрема сухого екстракту з насіння люпину багатолистого (Lupinus polyphyllus Lindl), який можна використати як активну субстанцію при створенні нових лікарських засобів у різних лікарських формах. Відомим аналогом є спосіб одержання засобу з протизапальною та антимікробною дією з листя ільма граболистого [1] шляхом трикратної екстракції водно-спиртовою сумішшю, а саме 40-60 % спиртом етиловим протягом двох годин при загальному співвідношенні сировини і екстрагенту 1:15-1:20 при температурі кипіння екстрагенту, об'єднанням одержаних екстрактів з подальшим їх відстоюванням, фільтрацією та концентруванням до густого стану. Недоліком аналога є використання спирту етилового. Відомим аналогом є спосіб одержання засобу з антимікробною активністю з листя евкаліпта [5], що складається з екстракції сировини органічним розчинником при співвідношенні сировина:екстрагент 1:3-1:20, фільтрації та упарювання одержаного рідкого екстракту до 1/201/22 попереднього об'єму, очищення 4 % розчином міді сульфату, вилучення цільового продукту гексаном або бензином-калошею, упарювання. До недоліків аналога слід віднести використання великих об'ємів органічних розчинників та використання імпортної сировини - листя евкаліпта, що веде до здороження виробництва. Відомим аналогом є спосіб одержання комплексу біологічно активних речовин з анаболічною, адаптогенною та антимікробною активністю з кореневища півників болотяних [3] шляхом трикратної екстракції рослинної сировини водою при загальному співвідношенні сировини і екстрагенту 1:20 при постійно підтримуваній температурі 90 °C з подальшою фільтрацією та упарюванням у вакуумі об'єднаних екстрактів до сухого порошку. Недоліком аналога є багатостадійність, що ускладнює його здійснення у виробничих умовах. В основу корисної моделі поставлена задача створення нового способу одержання засобу рослинного походження з антимікробною активністю, який передбачає екстракцію насіння люпину багатолистого гарячою водою при заданих умовах, що дозволяє скоротити кратність екстракції до 2-х разів та дає можливість більш повної екстракції комплексу біологічно активних речовин за рахунок підвищення температури екстрагенту. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб одержання засобу з антимікробною активністю шляхом екстракції рослинної сировини гарячою водою з подальшою фільтрацією та упарюванням у вакуумі об'єднаних екстрактів до сухого порошку, згідно з корисною моделлю, як рослинну сировину використовують насіння люпину багатолистого, екстракцію проводять при постійно підтримуваній температурі 75-80 °C при співвідношенні сировина:екстрагент 1:10-1:12 у два етапи тривалістю 45 та 30 хвилин кожен відповідно. Заявлений спосіб одержання передбачає використання як рослинної сировини насіння люпину багатолистого. У народній медицині відомі дані про використання листя та насіння люпину як тонізуючого та протизапального засобу. Хінолізидинові алкалоїди люпину стимулюють дихання, впливають на артеріальний тиск і виявляють анестезуючу дію [4]. Авторами вперше було виявлено антимікробну активність біологічно активних речовин, одержаних з насіння люпину багатолистого. Всі параметри корисної моделі визначено експериментальним шляхом з урахуванням біологічної активності одержаного екстракту, ефективності, доступності та нешкідливості реактивів, практичного відтворення способу у промислових умовах. Вибір екстрагента було здійснено експериментальним шляхом, виходячи з кількості одержаних екстрактивних речовин, вартості та екологічної безпечності екстрагента. Такий екстрагент є дешевим, доступним та екологічно безпечним. Експериментально встановлено, що використання співвідношення сировина:екстрагент менше 1:10 не забезпечує достатню екстракцію БАР, що призводить до зниження фармакологічної активності та виходу цільового продукту. Якщо співвідношення більше 1:12, то це призводить до ускладнення та подовження технологічного процесу, збільшення використання розчинника та енерговитрат. Заявлений спосіб здійснюють шляхом двократної екстракції подрібненого насіння люпину багатолистого гарячою водою при співвідношенні сировина:екстрагент 1:10-1:12 при постійному перемішуванні та постійно підтримуваній температурі у межах 75-80 °C. Першу екстракцію здійснюють протягом 45 хвилин, а другу - 30 хвилин. Одержані водні екстракти об'єднують, фільтрують і упарюють у вакуумі до одержання сухого світло-жовтого майже без запаху порошку. Вихід готового продукту складає 18-20 %. Корисна модель пояснюється прикладами конкретного виконання. Приклад 1. 1,0 кг подрібненого насіння люпину багатолистого заливали 10,0 л гарячої води і екстрагували при постійному перемішуванні та постійно підтримуваній температурі у межах 75 1 UA 105965 U 5 10 80 °C протягом 45 хвилин. Другу екстракцію проводили за попередніх умов протягом 30 хвилин. Одержані екстракти об'єднували, відфільтровували і упарювали у вакуумі до сухого залишку. Одержали 191,8 г порошку. Вихід сухого екстракту склав - 19,18 %. Приклад 2. Антимікробну активність сухого екстракту з насіння люпину багатолистого, одержаного за заявленим способом, вивчали методом дифузії в агар та серійних розведень [5, 6]. Для оцінки активності екстракту використовували стандартні штами мікроорганізмів, регламентовані ВООЗ для вивчення антибактеріальної дії препаратів: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Proteus vulgaris ATCC 4636, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans 885-663. Культури мікроорганізмів вирощували на м'ясо-пептонному агарі при температурі 37 °C. Термін культивування мікроорганізмів складав 24 години. Сухий екстракт з насіння люпину багатолистого, використовували у вигляді 2 % спиртового розчину. Результати проведених досліджень наведені в таблиці. 15 Таблиця Вивчення антимікробної активності сухого екстракту насіння люпину Тест-штами мікроорганізмів S. aureus ATCC 25923 Е. coli ATCC 25922 P. aeruginosa ATCC 27853 P. vulgaris ATCC 4636 B. subtilus ATCC 6633 C. albicans ATCC 885-663 Діаметр зон затримки росту, мм 10,1±0,3 34,4±0,3 24,2±0,3 24,4±0,2 *МБсК, мкг/мл **МБцК, мкг/мл >1000 15,6 62,5 31,25 >1000 >1000 >1000 31,25 125 62,5 >1000 >1000 Примітка: *МБсК - мінімальна бактеріостатична концентрація; **МБцК - мінімальна бактерицидна концентрація 20 25 30 35 40 Аналіз даних таблиці свідчить, що сухий екстракт з насіння люпину багатолистого, одержаний за заявленим способом, проявляє антимікробну активність відносно більшості тестштамів мікроорганізмів. Діаметри зон затримки росту складають 10,1-34,4 мм, що вказує на чутливість мікроорганізмів до екстракту. Досліджуваний екстракт виявив слабку дію відносно S. aureus та її відсутність до В. subtilis і С. albicans. Корисна модель є простою у відтворенні, економічною, екологічно безпечною та може бути здійснена в умовах промислового виробництва з використанням стандартного обладнання. Сухий екстракт, одержаний за за корисною моделлю, проявляє виражену антимікробну дію і є перспективним для створення нових лікарських засобів зазначеної дії. Джерело інформації: 1. Патент 61037, Україна, МПК (2011.01) А61K36/00, А61К127/00, А61Р29/00, А61Р31/04 (2006.01). Спосіб одержання засобу з протизапальною та антимікробною активністю. Заявл. 19.10.2010; Опубл. 11.07.2011, Бюл. № 13, 2011. 2. Патент 89926, Україна, МПК (2009) А61K36/61 (2006.01), А61Р31/00. Спосіб одержання засобу з антимікробною активністю з листя евкаліпта. Заявл. 21.04.2009; Опубл. 10.03.2010, Бюл. № 5. 3. Патент 96694, Україна, МПК (2011.01) А61K36/882 (2006.01), А61K125/00, А61Р3/00, А61Р31/00. Спосіб одержання комплексу біологічно активних речовин з анаболічною, адаптогенною та антимікробною активністю. Заявл. 20.08.2010; Опубл. 25.11.2011, Бюл. № 22. 4. Бойнік В.В. Визначення вмісту хінолізидинових алкалоїдів Lupinus polyphyllus / В.В. Бойнік, X.П. Акрітіду, Я.В. Белінська // Нове та традиційне у дослідженнях сучасних представників медичної науки: матеріали збірник, тез наук, робіт учасників міжнар. наук-практ. конфер., м. Львів, 27-28 лют. 2015: - Львів: ГО "Львівська медична спільнота", 2015. - С. 97-98. 5. Микробиология: Метод, рек. для студ. фар-мац. высш. учеб. завед. // И.Л. Дикий, И.Ю. Холупяк, М.М. Великая, Л.С. Стрельников, Н.Е. Шевелева, Л.Ф. Силаева, М.Ю. Стегний, О.Г. Гейдерих, Н.И. Филимонова. - X.: Изд-во НФаУ; Золотые страницы, 2004. - 144 с. 6. Вивчення специфічної активності протимікробних лікарських засобів: Метод, реком. / Волянський Ю.Л., Гриценко І.С., Широбоков В.П. і співавт. - Київ, 2004. - 40 с. 45 2 UA 105965 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб одержання засобу з антимікробною активністю шляхом двократної екстракції рослинної сировини гарячою водою з наступною фільтрацією та упарюванням у вакуумі об'єднаних екстрактів до сухого порошку, який відрізняється тим, що як рослинну сировину використовують насіння люпину багатолистого; екстракцію проводять при постійно підтримуваній температурі 75-80 °C при співвідношенні сировини і екстрагенту 1:10-1:12. Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3