Спосіб індукції оогенезу самиць проовігенних перетинчастокрилих ентомофагів

Реферат: Спосіб індукції оогенезу самиць проовігенних перетинчастокрилих ентомофагів, при якому виконують процес розведення ентомофагів в яйцях комах-господарів за певних умов температури та відносної вологості повітря. Відбирають найбільш життєздатні яйця комахгосподарів проовігенних ентомофагів, з лінійними розмірами: довжина 0,5 мм, ширина 0,25 мм, з характерним молочно-білим забарвленням та архітектонікою яєць. UA 118912 U (54) СПОСІБ ІНДУКЦІЇ ООГЕНЕЗУ САМИЦЬ ПРООВІГЕННИХ ПЕРЕТИНЧАСТОКРИЛИХ ЕНТОМОФАГІВ UA 118912 U UA 118912 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до сільського господарства, зокрема до галузі масового вирощування комах-етомофагів для потреб біологічного захисту рослин від фітофагів і може бути реалізована у технологіях розведення ентомофагів з проовігенною репродуктивною стратегією. Відомо, що серед арсеналу біологічних засобів, найбільш поширеною є трихограма паразит яєць переважно лускокрилих фітофагів зернових культур, технічних, овочевих та плодових насаджень. Частка трихограми серед усіх біологічних засобів становить понад 80 %. Тільки в Україні функціонує понад 70 лабораторій, де масово вирощують трихограму [Дрозда В.Ф., Кочерга М.О. Промислові культури ентомофагів в технологіях захисту овочів. Екологічний моніторинг, інноваційні та ресурсозберігаючі технології в системі захисту картоплі і овочевих культур від шкідливих організмів. - Житомир, 2014. - с. 18-19]. Відомо, що ефективність паразитування яєць комах-фітофагів в агроценозах ентомофагами залежить від рівня життєздатності, який визначається умовами розведення ентомофагів у біолабораторіях. Високожиттєздатні лабораторні культури надійно контролюють чисельність фітофагів. Прогнозування ефективності лабораторних культуру ентомофагів, ґрунтується на основі оцінки тестових характеристик. Відомий також спосіб розведення лабораторних культур трихограми, який передбачає використання як комахи-господаря трихограми яєць зернової молі Sitotroga cereallella Oliv. Суттєвим у способі є і те, що весь період розведення трихограми відбувається у постійні темряві [Способ массового разведения трихограммы. Авторское свидетельство СССР, № 1655419, МКИ А01К 67/00, Опубл. 15.06.1991, Бюл. № 22, Чернышев В.Б., Афонина В.М., Гаврилица Л.Ф., Зотов В.А., Шляхтич В.А.]. Реалізація цього способу призводить до суттєвого спрощення процесу розведення трихограми, проте, без суттєвих ознак підвищення загальної продуктивності способу. Відомий також спосіб масового лабораторного розведення трихограми, який є найбільш близьким технічним рішення до способу, що пропонується і вибраний як найближчий аналог [Способ разведения трихограммы. Авторское свидетельство СССР, № 865243, МКИ А01К 67/00, Опубл. 23.09.1981, Бюл. № 35, Малявин И.С., Эгамбердиева Л.А., Сангов Р.]. Спосіб викладений у найближчому аналогу полягає у тому, що як комаху-господарь трихограми використовують млинову вогнівку (Ephestia kuehniella Z.). Суттєвим при цьому є і те, що в процесі розведення трихограми підтримують температуру повітря 25-35 °C та відносної вологості 50-70 %. Реалізація цього способу супроводжується частковою стимуляцією репродуктивного процесу самиць трихограми - типового представника проовігенного оогенезу самиць. Як наслідок, суттєво підвищується плодючість самиць трихограми та зростає термін життя самиць. Проте, спосіб-найближчий аналог має такі недоліки: млинова вогнівка є досить небезпечний шкідник зерна та зернопродуктів, що зберігаються у складах, коморах та елеваторах. Спосіб не оцінює такі важливі характеристики трихограми як функціональну структуру складових частин гонад самиць, як гермарій, вітеллярій та оваріоли. Не оцінюється також рухова активність імаго самиць та їх пошукова здатність. В основу корисної моделі поставлено задачу експериментально обґрунтувати спосіб індукції оогенезу самиць перетинчастокрилих ентомофагів. Ставилось завдання запропонувати спосіб, складові частини якого б спрямовано індукували продукцію гонад самиць, а відтак і рівень життєздатності та продуктивності ентомофагів. Поставлена задача вирішується тим, що послідовно реалізують суттєві елементи запропонованого способу. Зокрема, відбирають найбільше життєздатні яйця комах-господарів проовігенних ентомофагів, з лінійними розмірами: довжина 0,5 мм, ширина 0,25 мм, з характерним молочно-білим забарвленням архітектонікою яєць, крім того, відбирають високожиттєздатних самиць проовігенних ентомофагів, наприклад види роду Trichogramma, яких ізолюють і пропонують їм для зараження відібрані яйця, наприклад зернової молі (Sitotroga cerealella Oliv.). Зразу після відродження імаго трихограми дочірнього покоління, їм згодовують у перший день у період спаровування тільки вуглеводневу дієту у вигляді 20 %-ного водного розчину фруктози. Суттєвим є і те, починаючи з другого дня, імаго ентомофагів згодовують дієту у вигляді 20 %-ного водного розчину мальтози та гемолімфи гусениць третього віку дубового шовкопряда (Antheraea pernyi G.M.). Цю частину дієти згодовують сумісно з 0,02-0,04 %-ним водним розчином нативної рибонуклеїнової кислоти (РНК). Суттєвим у способі є і те, що у біолабораторії підтримується температурний режим - удень, температура повітря становить 23,0-25,0 °C. Відносна вологість повітря 75-80 %. Уночі температура повітря становить 17,0-19,0 °C. Відносна вологість повітря 65-70 %. Режим фотоперіоду - удень 17-18 годин світло, уночі 6-7 годин темрява. 1 UA 118912 U 5 10 15 20 25 30 Суть запропонованого способу полягає у тому, що вирішується специфічне, досить складне завдання - підвищити функціональну активність оогенезу проовігенних ентомофагів. Група проовігенних паразитичних комах характеризуються тим, що оогенез самиць детермінований і відрізняється тим, що самиці статево дозрівають на стадії лялечки. Вони відроджуються з цілком сформованими гонадами і після спаровування зразу відкладають яйця. Спосіб відрізняється багатофункціональністю. Ентомофаги, а це види роду Trichogramma, проколюють своїм яйцекладом високожиттєздатні яйця комахи-господаря зернової молі, за певними стандартами. Специфічна вуглеводнево-білкова дієта, з додаванням нативної РНК, у сукупності з іншими суттєвими елементами індукує оогенез самиць ентомофагів. Приклад здійснення способу Типова біолабораторія, де розводять для потреб біологічного захисту рослин - трихограму. Це типовий представник проовігенних ентомофагів. Для обґрунтування запропонованого способу формували дослідні варіанти, яких було два та контроль. У першому варіанті реалізовували суттєві елементи запропонованого способу. У другому - спосіб-найближчого аналога. Для оцінки ефективності способів використовували найбільш інформативні тестові характеристики, що відображають функціональну активність усіх складових гонад самиць трихограми. Зокрема, оцінювали продукцію генезису оогонію в ооцити та утворення трофічних утворень у гермарії. У дослідах використовувались лабораторна культура типового представника проовігенних ентомофагів - трихограма, вид Trichogramma pintoi Voeg. Отриманий цифровий матеріал обробляли статистично. Результати досліджень наведено у таблиці. Встановлено, що задача, поставлена корисною моделлю, вирішена. Фактично за усіма тестовими показниками, запропонований спосіб перевищував найближчий аналог. Особливо вираженими були показники, що характеризують характер оогенезу самиць трихограми. У запропонованому способі спостерігалась ритмічна функціональна активність усіх складових частин гонад самиць: гермарію, вітеллярію та оваріол. Встановлений феномен формував мотиваційну рухову, статеву та пошукову здатність самиць трихограми. У підсумку, це забезпечило значний показник реальною плодючості самиць, котрий перевищував показник найближчого аналога на 40 %. Досить привабливим були і інші тестові характеристики. Це перш за усе господарсько-важливі ознаки, зокрема зростала рухова активність самиць трихограми та їх пошукова здатність по відношенню до яєць фітофагів. Рівень зараження яєць зернової молі трихограмою у запропонованому способі 87,3 %, проти 72,8 % у найближчому аналогу. Підсумкові результати оцінки способу індукції оогенезу самиць трихограми Способи, що порівнюються Оцінено особин трихограми, екз. Спосіб, що пропонується 175 Спосібнайближчий аналог 150 Контрольна популяція 150 HiP05 35 Характер оогенезу самиць трихограми Заражено Рухова Пошукова Плодючі активність здатність яєць імаго сть яєць гермарій вітеллярій оваріоли зернової самиць., самок фітофага молі, % см/хв. екз. Повноцінна продукція Виражена оогоніїв, Ритмічна Виражена та функціональна 42,8 68,3 87,3 ооцитів і їх функція помітна активність трансформаці я Спорадич ний Часткова Спостеріг Помітна, з процес дисфункція ається 30,6 51,2 ознаками 72,8 трансформації процесу резорбція аритмії оогоніїв вітеллогенезу яєць Уповільнений Аритмія Спорадична процес Аритмія процесу 20,8 44,9 з хронічною 70,1 функціонуванн оогенезу вітеллогенезу аритмією я усіх структур 43 6,5 5,6 Таким чином, реалізація запропонованого способу забезпечує тривалий процес індукції оогенезу самиць проовігенних перетинчастокрилих ентомофагів. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 40 Спосіб індукції оогенезу самиць проовігенних перетинчастокрилих ентомофагів, при якому виконують процес розведення ентомофагів в яйцях комах-господарів за певних умов температури та відносної вологості повітря, який відрізняється тим, що відбирають найбільш 2 UA 118912 U 5 10 життєздатні яйця комах-господарів проовігенних ентомофагів, з лінійними розмірами: довжина 0,5 мм, ширина 0,25 мм, з характерним молочно-білим забарвленням та архітектонікою яєць, крім того, відбирають високожиттєздатних самиць проовігенних ентомофагів, наприклад види роду Trichogramma, яких ізолюють і пропонують їм для зараження відібрані яйця, наприклад зернової молі (Sitotroga cerealella Oliv.), крім того, зразу після відродження імаго трихограми дочірнього покоління їм згодовують у перший день у період спаровування тільки вуглеводневу дієту у вигляді 20 %-ного водного розчину фруктози, крім того, починаючи з другого дня, імаго ентомофагів згодовують дієту у вигляді 20 %-ного водного розчину мальтози та гемолімфи гусениць третього віку дубового шовкопряда (Antheraea pernyi G.M.), сумісно з 0,02-0,04 %-ним водним розчином нативної рибонуклеїнової кислоти (РНК), крім того, у біолабораторії підтримують температурний режим - удень, температура повітря становить 23,0-25,0 °C, відносна вологість повітря 75-80 %, уночі температура повітря становить 17,0-19,0 °C, відносна вологість 65-70 %, режим фотоперіоду - удень 17-18 годин світла, уночі 6-7 годин темрява. Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3