Спосіб хроматографічного визначення каптоприлу в таблетках

Реферат: Спосіб хроматографічного визначення кількісного вмісту каптоприлу в таблетках включає приготування аналітичного та стандартного розчинів з подальшим хроматографуванням і розрахунком кількісного вмісту каптоприлу. Приготування аналітичного розчину проводять шляхом розчинення таблеткової маси каптоприлу в рухомій фазі (метанол Р - 0,1 % розчин кислоти трифтороцтової Р (60:40)), з використанням хроматографічної колонки Ascentis Express C18 розміром 4,6×150 мм, з розміром часток 5 мкм, й детектування за довжини хвилі 220 нм. UA 120745 U (12) UA 120745 U UA 120745 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до фармації, зокрема до способів фармацевтичного аналізу, а саме до контролю якості лікарських форм промислового виробництва, які містять каптоприл. За даними літератури кількісний вміст каптоприлу можна визначати екстракційнофотометричними методами і методами рідинної хроматографії, які характеризуються складністю пробопідготовки та довготривалістю аналізу [1]. До аналогів заявленого способу хроматографічного визначення каптоприлу можна віднести наступний спосіб кількісного визначення каптоприлу [2]: Аналітичний розчин препарату: точну наважку таблеткової маси, що відповідає 50 мг каптоприлу, розчиняють у 25,0 мл метанолу. Фільтрують крізь мембранний фільтр, відкидаючи перші 5 мл фільтрату. Стандартний розчин: 10,00 мг/мл (точна наважка) фармакопейного стандартного зразку (ФСЗ) каптоприлу розчиняють у метанолі. Згідно з даним аналогом заявленого засобу використовуються наступні хроматографічні умови: хроматографічна колонка категорії L1 (з нерухомою фазою С18); рухома фаза - метанол Р: вода Р: кислота фосфорна Р (550:450:0,5); довжина хвилі - 220 нм, швидкість потоку - 1,0 мл/хв. Основним недоліком даного методу можна вважати достатньо тривалий час від початку хроматографування до виходу активного фармацевтичного інгредієнта та довготривалість пробопідготовки. Задача корисної моделі полягає у створенні простого способу кількісного визначення каптоприлу в таблетках, використовуючи умови ізократичного елюювання з бінарною рухомою фазою, що складається з метанолу та 0,1 % розчину кислоти трифтороцтової Р в співвідношенні 60:40 для досягнення оптимальної симетрії піка діючої речовини. При розробці методики була використана хроматографічна колонка Ascentis Express С18, яка має ряд переваг з переліку колонок L1. За рахунок використання Fused-Core® технології колонка Ascentis Express C18 забезпечує високі швидкість та ефективність за меншого тиску системи. Це скорочує час хроматографування і кількість використовуваної рухомої фази, що відповідно знижує витрати на аналіз й, водночас, забезпечує необхідну специфічність, точність та відтворюваність результатів аналізу під час проведення контролю якості. Поставлена задача вирішується таким чином, що у способі хроматографічного визначення кількісного вмісту каптоприлу у таблетках включає приготування аналітичного та стандартного розчинів з подальшим хроматографуванням і розрахунком кількісного вмісту каптоприлу, згідно з корисною моделлю, приготування аналітичного розчину проводять шляхом розчинення таблеткової маси каптоприлу у рухомій фазі (метанол Р - 0,1 % розчин кислоти трифтороцтової Р (60:40)), причому з використанням хроматографічної колонки Ascentis Express C18 розміром 4,6×150 мм, з розміром часток 5 мкм; детектування за довжини хвилі 220 нм. За даних умов пік каптоприлу елююється близько 1,35 хв. Крім цього скорочення часу аналізу досягається за рахунок спрощення умов пробопідготовки завдяки використанню як розчинника рухомої фази. Всі параметри заявленого способу визначені дослідним методом. Придатність заявленої методики підтверджується валідаційними характеристиками, які визначаються згідно з ДФУ [3]. Заявлений спосіб здійснюється наступним чином: Аналітичний розчин препарату: Точну наважку порошку розтертих таблеток, еквівалентну 50 мг каптоприлу, змішують з 30 мл рухомої фази, витримують на УЗ-бані протягом 15 хв. Розчин охолоджують та доводять тим же розчинником до об'єму 50,0 мл. Фільтрують крізь мембранний фільтр з розміром пор 0,45 мкм, відкидаючи перші 5 мл фільтрату. Стандартний розчин: 25,0 мг (точна наважка) ФСЗ каптоприлу розчиняють у рухомій фазі і доводять тим самим розчинником до об'єму 25,0 мл. Хроматографування проводять на рідинному хроматографі зі спектрофотометричним детектором за таких умов: - колонка Ascentis Express C18 розміром 4,6×150 мм, з розміром часток 5 мкм; - рухома фаза: метанол Р - 0,1 % розчин кислоти трифтороцтової Р (60:40); - швидкість рухомої фази: 1,2 мл/хв; - температура колонки: 35 °C; - детектування за довжини хвилі: 220 нм; - об'єм проби, що вводиться: 2 мкл. Хроматографують розчин порівняння. Хроматографічна система вважається придатною, якщо: - ефективність хроматографічної колонки, обчислена за піком каптоприлу, має бути не менше 2000 теоретичних тарілок; 1 UA 120745 U 5 10 15 20 25 30 - відносне стандартне відхилення, розраховане для площі піка каптоприлу, має бути не більше 1,0 %; - коефіцієнт симетрії, обчислений за піком каптоприлу, має бути не більше 1.5. Хроматографують випробовуваний розчин. У порівнянні з аналогічними способами, запропонований спосіб характеризується рядом переваг: підібрана більш проста пробопідготовка та розчинники, що дозволяють спростити проведення досліду, зменшити час і витрати на аналіз. Рухома фаза та хроматографічна колонка Ascentis Express С18 підібрані таким чином, що час утримування каптоприлу становить близько 1,35 хв. Для запропонованого способу кількісного визначення проведено вивчення наступних метрологічних характеристик: збіжність, прецизійність, правильність, лінійність. Отримані валідаційні характеристики узгоджені з критеріями відповідності, згідно з вимогами ДФУ. Корисна модель ілюструється прикладами. Приклад 1 Для дослідження заявленого способу було вивчено лінійність. Оцінка лінійності проводилася на всьому діапазоні застосування методу з використанням стандартної процедури [4-6]. Дослідження залежності площі піку від концентрації проводили з використанням модельних розчинів зразків. Отримані результати були статистично оброблені методом найменших квадратів відповідно до вимог ДФУ. Для кожного з випробовуваних розчинів розраховували середнє значення площі піку. Отримані результати були оброблені за допомогою методу найменших квадратів для рівняння у=m×х+b та метрологічні характеристики представлені на кресленні. Дані, отримані у результаті вивчення валідаційної характеристики лінійності, характеризуються їх відповідністю до критеріїв прийнятності заявленого способу. Приклад 2 Для дослідження заявленого способу було вивчено збіжність і прецизійність. Оцінка збіжності і прецизійності проводилася методом "введено-знайдено" на стандартних розчинах каптоприлу [4-6]. Модельні розчини готували відповідно до методики, повністю повторюючи процедуру, описану для приготування випробовуваного розчину. По двох розчинах порівняння для кожного аналіту будували калібрувальний графік (level 1-2, враховуючи всі паралельні інжекції і вказуючи відповідну концентрацію розчинів порівняння), що проходить через нуль. За калібрувальним графіком для кожного аналіту розраховували відповідну концентрацію модельного розчину. Дані розрахунків представлені у таблиці. Таблиця Результати кількісного визначення каптоприлу методом УВЕРХ Розчини RS1 RS2 MS 70 % MS 100 % MS 130 % Введено (концентрація розчину), мг/мл 0,996 1,040 0,7000 1,0000 1,3000 Критичне збіжності Знайдено (концентрація розчину), мг/мл 0,7026 0,9919 1,3021 Середнє значення значення для результатів Співвідношення знайденого для введеного, Z, % 100,4 99,2 100,2 99,9 виконується Δz %≤3,2 Критерій значущості похибки статистичної систематичної ≤0,20 виконується %  Z  100   z / n Загальний висновок про методику Коректна 35 Дані, отримані у результаті вивчення валідаційних характеристик збіжності і прецизійності, характеризуються їх відповідністю до критеріїв прийнятності заявленого способу. 2 UA 120745 U 5 10 15 20 Таким чином, заявлений спосіб хроматографічного визначення каптоприлу в таблетках відповідає вимогам ДФУ, є простим, швидким, економічним, доступним і може бути використаний для аналізу якості в лабораторіях з контролю якості лікарських засобів. Джерела інформації: 1. Logoyda L. Development and validation of new methods of analysis for the determination of different natural and synthetic original active pharmaceutical ingredients in medicines. Duphat 2015; 48. 2. "United States Pharmacopoeia (USP). Medicare Prescription Drug Benefit Model Guidelines Source Information", www.nlm.nih.gov. 3. Державна Фармакопея України: в 3 т. / Державне підприємство "Український науковий фармакопейний центр якості лікарських засобів". - 2-е вид. - Харків: Державне підприємство "Український науковий фармакопейний центр якості лікарських засобів", 2014. - Т. 2. - 724 с. 4. Logoyda L. Validation of chromatographic methods of analysis for the determination of active pharmaceutical ingredients in different medicines. PharmaSchool association for pharmaceutical development and scientific research 2016; 34. 5. Logoyda Liliya. Development of methodology for the chromatographic determination of captopril in medicines / Liliya Logoyda, Dmytro Korobko, Sergiy Kovalenko // PHARMACY XXI CENTURY: TRENDS AND PROSPECTS: Materials VIII National Congress of Pharmacists of Ukraine (Kharkiv, 13-16 September2016) - Kharkiv: NPhU, 2016. - V. 1. - P. 219. 6. ICH Topic Q2 (R1) Validation of Analytical Procedures: Text and methodology, June, 1995. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 25 30 Спосіб хроматографічного визначення кількісного вмісту каптоприлу в таблетках, який включає приготування аналітичного та стандартного розчинів з подальшим хроматографуванням і розрахунком кількісного вмісту каптоприлу, який відрізняється тим, що приготування аналітичного розчину проводять шляхом розчинення таблеткової маси каптоприлу в рухомій фазі (метанол Р - 0,1 % розчин кислоти трифтороцтової Р (60:40)), з використанням хроматографічної колонки Ascentis Express C18 розміром 4,6×150 мм, з розміром часток 5 мкм, й детектування за довжини хвилі 220 нм. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3