Специфічний спосіб визначення каптоприлу

Специфічний спосіб виявлення каптоприлу шляхом нанесення проби, що аналізується, на хроматографічну пластину з подальшою її обробкою сумішшю 15 % розчину феруму (III) хлориду і 1 % розчин калію гексаціаноферату (III) (1:1) з утворенням плями синього кольору, який відріз 3 29704 передбачає, в загальному випадку, отримання деривату (похідного) досліджуваної речовини та встановлення відношення Rf деривату та вихідної речовини після хроматографування у відповідній системі розчинників та проявлення відповідним проявником. Заявлений спосіб здійснюють наступним чином: на лінію старту хроматографічної пластини наносять в дві точки проби з вірогідним вмістом каптоприлу. В одну з точок вводять 0,6% розчин гідроген пероксиду з метою отримання каптоприлу дисульфіду та після висушування плям пластину елююють в системі розчинників толуол-метанолкислота ацетатна концентрована (9:1:1). Після елюювання пластину обробляють сумішшю 15% розчину феруму (III) хлориду і 1% розчину калію гексаціаноферату (III) (1:1). При цьому утворюються плями, забарвлені в синій колір. Rf плям каптоприлу та дисульфіду каптоприлу становлять 0,60 і 0,36 відповідно. Пляма каптоприлу забарвлюється миттєво. Забарвлення плями дисульфіду каптоприлу розвивається поступово протягом 5-10 хвилин. Можливість використання суміші 15% розчину феруму (III) хлориду і 1% розчину калію гексаціаноферату (III) (1:1) для проявлення плям дисульфідів встановлено авторами вперше. Корисна модель ілюструється прикладами. Приклад 1 Експериментальним шляхом підібрано оптимальні умови проведення виявлення каптоприлу заявленим способом. У досліді готували розчин каптоприлу у воді з концентрацією 1мг/мл. На лінію старту хроматографічної пластини «Sorbfil» ПТСХ-ІІВ (силікагель СТХ-1ВЕ, тип підложки - ПЕТФ, зв'язуюча речовина - силіказоль, фракція - 8-12мкм, товщина шару - 100мкм) наносили в дві точки по 5мкг каптоприлу. Після висихання в другу точку вводили за допомогою капіляра 2мкл 0,6% розчину гідроген пероксиду. Після висушування плям при кімнатній температурі пластину елюювали в системі розчинників толуол метанол - кислота ацетатна концентрована (9:1:1). Хроматографування проводили в камері об'ємом 500см 3, в яку вносили 50мл системи розчинників. Камеру насичували протягом 30хв. Довжина шляху пробігу розчинників становить 8см. Після досягнення системою розчинників лінії фінішу пластину виймали з камери, висушували при кімнатній температурі і обробляли свіжопригото-ваною сумішшю 15% розчину феруму (III) хлориду і 1% розчину калію гексаціаноферату (III) (1:1). При цьому утворювалися плями, забарвлені в синій колір. Rf першої та другої плям становлять 0,60 і 0,36 відповідно. Величина відношень Rf другої та першої плям становить 0,60. Комп’ютерна в ерстка Н. Лисенко 4 Перша пляма забарвлюється миттєво, забарвлення другої плями розвивається поступово протягом 5-10 хвилин. Приклад 2 Експериментальним шляхом вивчалося відношення каптоприлу до окиснення 0,6% розчином гідроген пероксиду. За даними літератури сполуки, що містять сульфгідрильну гр упу, окиснюються гідроген пероксидом до відповідних дисульфідів: 2RSH+H 2O2®R-S-S-R+2H 2O У досліді готували розчин каптоприлу у воді та розчин каптоприлу дисульфіду в метанолі з концентрацією 1 мг/мл. На лінію старту хроматографічної пластини Sorbfil наносили пробу каптоприлу та вводили в цю ж точку за допомогою капіляра 2мкл 0,6% розчину гідроген пероксиду. Після висушування проби при кімнатній температурі пластину елюювали в системі розчинників толуол-метанол-кислота ацетатна концентрована (9:1:1) з використанням як «свідка» дисульфіду каптоприлу та обробляли свіжоприготованою сумішшю 15% розчину феруму (III) хлориду і 1% розчину калію гексаціаноферату (III) (1:1). При цьому утворювалися плями, забарвлені в синій колір. Rf плям дисульфіду каптоприлу і каптоприлу, окисненого 0,6% розчином гідроген пероксиду, були рівні і становили 0,36. Розвиток забарвлення плям дисульфіду каптоприлу і каптоприлу, окисненого 0,6% розчином гідроген пероксиду, розвивається поступово протягом 5-10 хвилин. Приклад 3 В експерименті застосовували запропонований спосіб виявлення до різних органічних речовин, що містять в своїй структурі сульфгідрильну груп у. У досліді готували розчини мерказолілу, цистеїну, ацетилцистеїну з концентрацією 1мг/мл. При цьому на пластинах виявлялося також по дві плями. Причому плями дисульфідів, на відміну від плям дисульфіду каптоприлу, забарвлювалися одночасно з плямами сполук, що містять сульфгідрильну групу. Крім того, величини відношень Rf плям відповідних дисульфідів і сульфгідрильних сполук не співпадали з величиною відношення Rf дисульфіду каптоприлу та каптоприлу, що дорівнює 0,60. Таким чином, два аналітичні чинники - відмінність в швидкостях проявлення плям каптоприлу і його дисульфіду, а також величина відношення Rf дисульфіду каптоприлу та каптоприлу, що дорівнює 0,60 - роблять зазначений спосіб виявлення специфічним для каптоприлу. Таким чином, заявлено новий спосіб виявлення каптоприлу, що дає можливість специфічно визначити його та не потребує наявності стандартного зразка зазначеної речовини. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601