Спосіб підвищення візуалізації лімфатичних капілярів і судин

Реферат: Спосіб підвищення візуалізації лімфатичних капілярів і судин включає наповнення лімфатичного русла фарбувальними масами на свіжих органах шляхом непрямої ін'єкції фарбувальних мас у товщу органа. Додатково, прямим уведенням фарбувальних мас у лімфатичні капіляри та судини, що стали помітними внаслідок попередньої непрямої ін'єкції, проводять донаповнення лімфатичного русла досліджуваного органа на вже виготовлених просвітлених макромікропрепаратах під бінокулярним мікроскопом. UA 122350 U (54) СПОСІБ ПІДВИЩЕННЯ ВІЗУАЛІЗАЦІЇ ЛІМФАТИЧНИХ КАПІЛЯРІВ І СУДИН UA 122350 U UA 122350 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема до способів просвітлених виготовлення макромікропрепаратів лімфатичного русла різних органів. Відомий аналог (Стефанис Ф.А. Лимфатические сосуды желудка человека/ Ф.А. Стефанис // Университетские известия. -К.: 1902. - № 2. - Ч. II. - С. 1-49.; 2. Сушко А.А. Некоторые особенности функциональной анатомии лимфатической системы/ А.А. Сушко, Л.В. Чернышенко. -К.: Здоров'я, 1966. - 288 с; 3. Чернышенко Л.В. Морфология лимфомикроциркуляторного русла / Чернышенко Л.В., Котляров B.C., Кузьменко В.Н. - К.: Здоров'я, 1985. - 152 с), що полягає у наповненні лімфатичних капілярів і судин фарбувальними масами на свіжих не фіксованих органах шляхом непрямої (внутрішньотканинної) ін'єкції мас у товщу органа. Недоліком відомого аналога є те, що всі хімічні речовини, у які поміщалися шматочки органа з наповненим фарбувальними масами лімфатичним руслом для фіксації (запобігання від гниття та розпаду тканин органа під час зберігання і дослідження отриманого препарату), мають сильну дубильну дію, внаслідок чого лімфатичні судини та капіляри стискаються навколишніми структурами і фарбувальна маса з них витискається за межі капілярів та судин. Як наслідок - на кінцевому етапі виготовлення просвітлених макромікропрепаратів (наслідком просвітлення є набування тканинами органа прозорості) лімфатичні капіляри та судини стають погано видимими, оскільки фарбувальна маса з них була витиснута дубильною дією під час їх фіксації, дегідратації та просвітлення. Такі просвітлені макромікропрепарати значно важче досліджувати та здійснювати фотодокументування результатів досліджень. На них слабо видно лише контури лімфатичних капілярів та судин, але важко встановити їх просторове співвідношення, особливості архітектоніки сіток лімфатичних капілярів та сплетень лімфатичних судин. Корисною моделлю ставиться задача підвищити якість просвітлених макромікропрепаратів шляхом збільшення контрастності лімфатичних капілярів і судин способом донаповнення їх цією ж фарбувальною масою на вже готових просвітлених макромікропрепаратах. Поставлена корисною моделлю задача вирішується тим, що візуалізація лімфатичних капілярів і судин (за відомими аналогами вона здійснюється наповненням лімфатичного русла фарбувальними масами на свіжих органах шляхом непрямої ін'єкції фарбувальних мас у товщу органа), згідно з заявленою корисною моделлю, додатково, здійснюється прямим донаповненням фарбувальною масою вже видимих під бінокулярним мікроскопом лімфатичних капілярів і судин на просвітлених макромікропрепаратах. Приклад здійснення способу. Для наповнення внутрішньоорганного лімфатичного русла з метою візуалізації невидимих на фоні навколишніх структур лімфатичних капілярів і судин використовується свіжий (без ознак розпаду чи гниття) матеріал (різні внутрішні органи, шкіра тощо), який не піддавався дії фіксуючих розчинів (формальдегіду, етанолу тощо). Далі готується спеціальна фарбувальна маса (найбільш широко використовується жовта маса Стефаніса) і тонкою ін'єкційною голкою така маса ін'єкується у товщу досліджуваного органа. Наступним етапом дослідження внутрішньоорганного лімфатичного русла є відрізування кусочків органа з наповненими фарбувальною масою лімфатичними судинами та капілярами (розмір таких кусочків залежить від того, який орган досліджується і становить не більше 10 см завдовжки та стільки завширшки і не більше 0,5 см завтовшки) та поміщення їх (у розправленому стані) у фіксувальний розчин (7-10 % водний розчин формальдегіду), у якому вони витримуються від 1-2 до 5-7 діб. Далі здійснюється дегідратація цих кусочків органів у етанолі зростаючої концентрації від 70 % до 100 %, після чого ці шматки просвітлюються у метилсаліцилаті і можуть досліджуватися за допомогою мікроскопа МБС будь-якої модифікації. Запропонований спосіб донаповнення внутрішньоорганного лімфатичного русла масою Стефаніса на вже готовому просвітленому макромікропрепараті здійснюється способом прямої ін'єкції лімфатичних капілярів та судин. Під візуальним контролем за допомогою мікроскопа МБС спеціально підготовлена ін'єкційна голка з фарбувальною масою вводиться у лімфатичну судину або капіляр значного діаметра після чого здійснюється донаповнення певного фрагмента внутрішньоорганного лімфатичного русла. Спеціальна підготовки ін'єкційної голки полягає у тому, що гострий кінець її згинається під кутом, близьким до 120° таким чином, щоб площина зрізу голки була паралельною до її поздовжньої осі, а верхівка гострого кінчика, для запобігання травмуванню стінки лімфатичних капілярів чи судин, загинається до середини, як показано на фіг. 1. На фіг. 1 загальний вигляд ін'єкційної голки із загнутим у напрямі зрізу голки кінцем (1) та верхівка її гострого кінчика, злегка загнута до середини (2) для запобігання травмуванню стінки судин під час донаповнення лімфатичного русла. Наступним етапом є введення такої голки у видимий під бінокулярним мікроскопом МБС лімфатичний капіляр або судину на просвітленому макромікропрепараті, який підтримується за 1 UA 122350 U 5 10 15 допомогою анатомічного пінцета та пряма ін'єкція внутрішньоорганного лімфатичного русла фарбувальною масою (фіг. 2). Фіг. 2. Донаповнення лімфатичного русла на просвітленому макромікропрепараті (схема): 3 - лімфатичні судини; 4 - ін'єкційна голка із загнутим до середини кінцем; 5 - анатомічний пінцет; 7 - просвітлений макромікропрепарат; 6-лімфатичні капіляри. Отримані таким чином макромікропрепарати мають значно вищу якість, лімфатичні капіляри і судини на них чітко контрастують на фоні навколишніх структур (фіг. 3). Досліджуючи їх під бінокулярним мікроскопом МБС можна встановити особливості архітектоніки сіток лімфатичних капілярів та сплетень лімфатичних судин, зробити достовірні морфометричні проміри, встановити наявність зв'язків між лімфатичними капілярами та судинами різних шарів органа тощо. Фіг. 3. Донаповнені масою Стефаніса внутрішньоорганні лімфатичні судини з добре помітними клапанами: 8 - місця розташування клапанів лімфатичних судин; 3 - лімфатичні судини. Слід зазначити, що на фіксованих за пропонованим способом макромікропрепаратах клапани лімфатичних судин не можуть достатньою мірою заважати руху лімфи у відцентровому напрямі, оскільки втрачають еластичність, внаслідок чого лімфатичне русло донаповнюється фарбувальною масою як у звичайному, так і у ретроградному (зворотному) напрямах. Запропонований спосіб підвищення візуалізації лімфатичних капілярів і судин застосовується для виготовлення наочних навчальних препаратів та під час проведення наукових досліджень на морфологічних кафедрах. 20 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 25 Спосіб підвищення візуалізації лімфатичних капілярів і судин, що включає наповнення лімфатичного русла фарбувальними масами на свіжих органах шляхом непрямої ін'єкції фарбувальних мас у товщу органа, який відрізняється тим, що додатково, прямим уведенням фарбувальних мас у лімфатичні капіляри та судини, що стали помітними внаслідок попередньої непрямої ін'єкції, проводять донаповнення лімфатичного русла досліджуваного органа на вже виготовлених просвітлених макромікропрепаратах під бінокулярним мікроскопом. 2 UA 122350 U Комп’ютерна верстка О. Рябко Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3