Спосіб боротьби з нозематозом комах-хазяїв ентомофагів

Спосіб боротьби з нозематозом комах-хазяїв ентомофагів, що включає дію на яйця зернової молі та млинової вогнівки, відрізняється тим, що незаражену популяцію комах обробляють антигеном із живим збудником нозематозу сумісно з диметилсульфоксидом в період першої доби ембріонального розвитку. (19) (21) 98052299 (22) 06.05.1998 (24) 16.10.2000 (33) UA (46) 16.10.2000, Бюл. № 5, 2000 р. (72) Дрозда Валентин Федорович (73) ІНСТИТУТ ЗАХИСТУ РОСЛИН УКРАЇНСЬКОЇ АКАДЕМІЇ АГРАРНИХ Н АУК 29288 користання у запропонованому способі будь-яких препаратів. Поставлене завдання вирішується таким чином, що при вирощуванні основних хазяїв ентомофагів зернової молі та млинової вогнівки для боротьби з нозематозом, проводять імунізацію здорових популяцій цих комах, застосовуючи для цього композицію, що складається зі специфічного антигену з живим збудником нозематозу та диметилсульфоксиду (ДМСО). Імунізацію проводять шляхом одноразової обробки композицією щойно відкладених самицями яєць, вік яких не перевищує одну добу. Оптимальні витрати ДМСО у запропонованому способі, становить 3-5 мг на 5 г яєць. Обробка композицією яєць здійснюється у перший день їх розвитку, після їх відкладання. Дослідження впродовж трьох (1994-1996) років проводились в Інституті захисту рослин УААН. Матеріалом досліджень були лабораторні культури зернової молі Sitotroga cerealella Oliv. Та млинової вогнівки Ephestia kuehniella Z. Приклади здійснення способу Приклад 1. Лабораторна культура зернової молі, основного хазяїна трихограми. Міль розводять на зернах ячменю за відомою технологією. Вихідна популяція зернової молі - здорова, тобто не заражена нозематозом. У іншій лабораторії підтримують культур у зернової молі, заражену хворобою, збудником якої є нозематоз. Хвороба передається дочірньому поколінню трасноваріально, тобто через відкладені яйця. Відбирали яйця зернової молі, заражені нозематозом, у кількості 3 г, які клали у порцелянову чашку з ступкою. Кожну наважку з яєць розбавляли у 3-х частинах водопровідної води, ретельно розтирали до однорідної маси. Після цього гомогенат фільтрували. Емульсія, яку отримали таким чином, називалась "антиген". Це був специфічний антиген яєць зернової молі, ураженої нозематозом. Перед використанням до антигену додавали диметилсульфоксид (ДМСО) з розрахунку 1, 3, 5 та 8 мг на 5 г здорових яєць зернової молі. Крім того, використовували специфічний антиген з вбитим за допомогою високої температури збудником нозематозу. Використовували також, як окремі варіанті, неспецифічний антиген колодій. Були інші варіанти, зокрема, окремо використовували ДМСО, а також варіант, де здорові гусениці оброблялись суспензією нозематозу. Наступний елемент способу - готували популяцію зернової молі здорову, тобто не заражену нозематозом. Наступний елемент способу. Здорові кладки яєць зернової молі, по 300 штук у кожному варіанті, занурювали у композицію, яка складалась із специфічного антигену та ДМСО. Контакт тривав 4-5 хвилин. Таку операцію проводили і у випадку з іншими варіантами. Тобто здорові яйця молі занурювали у відповідні розчини, як це наведено у табл. 1. Для порівняння застосовували і спосібпрототип. Обгрунтовували оптимальний вміст ДМСО, як складової частини композиції, специфічний антиген - ДМСО, тобто те, що пропонується у способі. Обгрунтовувався також оптимальний період дії композиції на певний період ембріонального роз витку. Для цього операцію проводили в 1-й та 3-й день ембріонального розвитку. Наступний прийом способу - штучне зараження гусениць зернової молі нозематозом у першому віці, найбільш сприйнятливому до дії збудника. Інфікування проводилось шляхом обприскування зерна ячменю суспензією спор ноземи, куди проникають гусениці зернової молі. Отже, гусениці старших віків знаходяться всередині зерна і не можуть уражуватись в такому стані збудником. Результати ефективності запропонованого способу оцінювали порівнянням ефективності його з іншими способами та прототипом. Оцінювали такі показники, як рівень ураження нозематозом дочірнього покоління, яке було штучно заражене нозематозом, але після того, як раніше проводили обробки яєць молі згідно з запропонованим способом. Оцінку проводили також за господарськими показниками: плідністю самиць, життєздатністю та за кількістю зібраних яєць молі. В табл. 1 наведені результати, що свідчать про рівень ураження зернової молі нозематозом в залежності від того, чим обробляли яйця молі перед її інфікуванням нозематозом. Як видно, у варіанті, де яйця обробляли специфічним антигеном з живим збудником, сумісно з ДМСО (спосіб, що пропонується), при інфікуванні нозематозом гусениць першого віку, було заражено 1,7-11,3%. Отже, оптимальний вміст ДМСО у композиції становить 3-5 мг на 5 г яєць зернової молі. Отримані результати про те, що популяція зернової молі, яйця якої були згідно зі способом, що пропонується, оброблені композицією з вмістом нозематозу, виявилась стійкою до збудника. У інших варіантах було уражено 63,3-73,2%. На 19,8% була заражена популяція у способі-прототипі (табл. 1). Приклад 2. Умови досліду аналогічні наведеним у прикладі 1. Різниця у тому, що яйця молі обробляли, згідно з програмами дослідів на 3-й день їх розвитку. Результати досліджень ефективності способу наведено у табл. 2. Встановлено, що рівень ураження молі у варіанті, де застосовували специфічний антиген з живим збудником нозематозу (спосіб, що пропонується) становив 29,4-46,5%. Отримані результати свідчать про те, що обробка яєць на 3-й день їх розвитку малоефективна. Це підтверджують також результати інших показників, у тому числі і урожайності яєць молі. Приклад 3. Лабораторна культура млинової вогнівки. Вогнівка розводилась згідно з існуючою технологією. Ви хідна популяція млинової вогнівки здорова, тобто не заражена нозематозом. У іншій лабораторії підтримували культуру млинової вогнівки, заражену хворобою, збудником якої є нозематоз. Всі інші особливості дослідів, аналогічні наведеним у прикладі 1. Перелік варіантів досліду був аналогічний наведеному прикладі 1. У склад композиції входив специфічний антиген сумісно із ДМСО. Обгрунтовувався оптимальний вміст ДМСО у композиції, а також період ембріонального розвитку молі, оптимальний для найбільш ефективної дії композиції для отримання стійкості до нозематозу. У табл. 3 наведені результати досліджень. Як видно, оптимальний вміст ДМСО у композиції становив 3-5 мг на 5 г яєць молі. Це свідчить про ви 2 29288 сокий рівень ефективності композиції в запропонованому способі в режимах оптимальної витрати ДМСО. В ци х параметрах отримані високі показники і господарська ефективність у порівнянні зі способом-прототипом. Приклад 4. Умови досліду аналогічні наведеним у прикладі 3. Різниця у тому, що яйця вогнівки обробляли на 3-й день їх розвитку. Результати досліджень ефективності способу наведено у табл. 4. Встановлено, що рівень ураження вогнівки у варіанті, де застосовували специфічний антиген з живим збудником нозематозу (спосіб, що пропонується), становив 29,7-41,6%. Отримані результати свідчать про те, що обробка яєць на третій день їх розвитку малоефективна. Це підтверджують також результати інших показників, у тому числі і урожайність яєць вогнівки. Таким чином, запропонований спосіб індукції стійкості зернової молі та млинової вогнівки технологічно сприйнятливий, дає суттєві переваги перед існуючими способами, з суттєвим позитивним результатом. Джерела інформації: 1. Подготовка и заражение зерна при массовом разведении зерновой моли, лабораторного хозяина трихограммы: Методические указания / Абашкин А.С., Горбан В.П. и др. – Кишинев: ВАС ХНИЛ. Всес. НИИ биол. методов защиты растений, 1979. – 31 с. 2. Ме тодические указания по разведению и использованию яиц мельничной огневки / Цибульская Г.Н., Кошевская Н.Н. и др. – М.: МСХ СССР. Союзсельхозхимия, 1984. – 17 с. 3. Виденова Е., Иванова Р., Балабанов В. Метод улучшения качества зерновой моли при производстве три хограммы в биолабораториях / Применение трихограммы и биопрепаратов в интегрированной борьбе с вредителями растений: Докл. симп. 1983, София, НРБ, МОБ ВПРС. - София, 1985. - С. 74-76. 4. Дрозда В.Ф. Засіб боротьби з хворобами лабораторних популяцій комах. Патент України № 20296, 1997. МКИ А01К67/00 (прототип). Таблиця 1 Результати використання спеціалізованого антигену при обробці яєць зернової молі у перший день, з наступним інфікуванням гусениць у 1-му віці нозематозом Варіанти порівняння Специфічний антиген Специфічний антиген сумісно із ДМСО (спосіб, що пропонується) ДМСО Специфічний антиген з вбитим збудником Гомогенат із яєць здорової популяції Здорові гусениці оброблені суспензію ноземи Спосіб-прототип Колодій Контроль, без обробки, здорова популяція Вміст ДМСО, мг/5 г яєць 1 3 5 8 5 Заражено ноземою, % Плодючість самиць, яєць/самку екз. Життєздатність, % Зібрано яєць з 1 кг зерна, г 18,4 11,3 1,7 2,3 8,9 70,2 41,3 42,6 51,4 50,9 40,8 36,4 72,6 70,1 75,2 80,4 77,9 66,4 7,28 7,05 8,16 7,86 6,58 5,94 5 66,9 34,8 66,5 6,07 5 72,4 30,9 53,2 5,18 5 73,2 31,4 48,4 5,06 5 19,8 63,3 40,8 35,1 70,2 63,8 7,53 6,22 0,6 50,2 68,2 7,18 Таблиця 2 Результати використання спеціалізованого антигену при обробці яєць зернової молі на 3-й день їх розвитку, з наступним інфікуванням гусениць у 1-му віці нозематозом Варіанти порівняння Специфічний антиген Специфічний антиген сумісно із ДМСО (спосіб, що пропонується) ДМСО Вміст ДМСО, мг/5 г яєць 1 3 5 8 5 Заражено ноземою, % Плодючість самиць, яєць/самку екз. Життєздатність, % Зібрано яєць з 1 кг зерна, г 38,1 34,5 29,4 31,2 46,5 68,9 31,4 33,7 30,5 32,9 30,1 34,2 57,4 49,8 51,6 52,4 58,3 65,2 7,37 7,26 7,08 7,45 7,18 6,23 3 29288 Продовження табл. 2 Варіанти порівняння Специфічний антиген з вбитим збудником Гомогенат із яєць здорової популяції Здорові гусениці оброблені суспензію ноземи Спосіб-прототип Колодій Контроль, без обробки, здорова популяція Вміст ДМСО, мг/5 г яєць Заражено ноземою, % Плодючість самиць, яєць/самку екз. Життєздатність, % Зібрано яєць з 1 кг зерна, г 5 68,8 35,2 68,2 6,12 5 73,5 31,6 54,8 5,31 5 76,5 34,1 50,5 5,19 27,7 71,2 41,8 36,8 70,2 65,6 7,64 6,14 1,4 44,2 69,2 6,84 Таблиця 3 Результати використання спеціалізованого антигену при обробці яєць млинової вогнівки у перший день, з наступним інфікуванням гусениць у 1-му віці нозематозом Варіанти порівняння Специфічний антиген Специфічний антиген сумісно із ДМСО (спосіб, що пропонується) ДМСО Специфічний антиген з вбитим збудником Гомогенат із яєць здорової популяції Здорові гусениці оброблені суспензію ноземи Спосіб-прототип Колодій Контроль, без обробки, здорова популяція Вміст ДМСО, мг/5 г яєць 1 3 5 8 5 Заражено ноземою, % Плодючість самиць, яєць/самку екз. Життєздатність, % Зібрано яєць з 1 кг зерна, г 16,2 9,8 2,5 2,3 5,9 74,4 73,4 81,9 99,3 102,6 84,6 72,1 70,1 77,3 80,4 76,5 75,9 68,2 7,36 7,74 8,21 8,15 7,54 7,12 71,8 70,5 62,9 6,88 66,8 68,8 54,6 6,67 77,9 64,5 53,2 6,22 18,3 59,2 88,7 69,5 70,8 62,8 7,72 6,57 0,5 82,6 70,4 6,73 Таблиця 4 Результати використання спеціалізованого антигену при обробці яєць млинової вогнівки на 3-й день розвитку, з наступним інфікуванням гусениць у 1-му віці нозематозом Варіанти порівняння Специфічний антиген Специфічний антиген сумісно із ДМСО (спосіб, що пропонується) ДМСО Специфічний антиген з вбитим збудником Гомогенат із яєць здорової популяції Здорові гусениці оброблені суспензію ноземи Вміст ДМСО мг/5 г яєць 1 3 5 8 5 Заражено ноземою, % Плодючість самиць, яєць/самку екз. Життєздатність, % Зібрано яєць з 1 кг зерна, г 40,5 41,6 34,2 29,7 33,8 71,5 73,3 74,8 77,3 67,9 70,4 68,4 74,5 66,8 68,3 70,5 71,4 54,9 7,12 7,05 7,28 7,39 7,01 6,16 68,4 70,3 55,4 6,58 77,2 62,4 49,2 6,06 71,2 66,5 48,8 6,45 4 29288 Продовження табл. 4 Варіанти порівняння Спосіб-прототип Колодій Контроль, без обробки, здорова популяція Вміст ДМСО мг/5 г яєць Заражено ноземою, % Плодючість самиць, яєць/самку екз. Життєздатність, % Зібрано яєць з 1 кг зерна, г 19,7 70,4 80,8 72,1 71,8 66,4 7,08 6,40 1,5 77,8 72,3 6,44 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 34 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 5